肖佳音，王麗萍

(黑龍江省食品藥品檢驗(yàn)檢測所，黑龍江 哈爾濱 150001)

穿琥寧制劑適用于病毒性肺炎，病毒性上呼吸道感染等，被譽(yù)為“中華抗生素”，應(yīng)用于臨床已有20余年，得到了醫(yī)生和患者的認(rèn)可，但其不良反應(yīng)也時(shí)有報(bào)道，因此研究其急性毒性反應(yīng)對(duì)指導(dǎo)臨床用藥有著重要意義。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥品 穿琥寧注射液1號(hào)處方(由黑龍江省珍寶島制藥有限公司提供，濃度:50mg/ml，批號(hào)20071202);穿琥寧注射液2號(hào)處方(黑龍江省珍寶島制藥有限公司提供，濃度:50mg/ml，批號(hào)20071203)。藥物以生產(chǎn)單位提供的注射用水配制。

1.2 動(dòng)物 昆明種小鼠，體質(zhì)量18～20g，雌雄各半，由黑龍江省藥品檢驗(yàn)所提供，合格證號(hào):SCXK(黑)2006－005。飼養(yǎng)條件:用小鼠塑料籠飼養(yǎng)，雌、雄分養(yǎng)，每籠5只，自由飲食，實(shí)驗(yàn)室溫度控制在20～25℃，通風(fēng)良好，濕度55% ～60%，正常飼養(yǎng)3天后供試。

2 方法［1－3］

2.1 穿琥寧注射液1號(hào)處方急性毒性試驗(yàn)

昆明種小鼠50只，體質(zhì)量18～20g，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只。在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上取1∶0.85為劑量比，劑量分別為 522mg/kg、443.75mg/kg、377mg/kg、320.5mg/kg、272.5mg/kg，藥物采用低比稀釋法配制，給藥體積為0.5ml/20g，禁食16h后尾靜脈注射給藥，給藥后觀察動(dòng)物毒性反應(yīng)及死亡情況，每日1次，連續(xù)觀察14天，記錄動(dòng)物毒性反應(yīng)狀況和死亡動(dòng)物分布。

2.2 穿琥寧注射液2號(hào)處方急性毒性試驗(yàn)

昆明種小鼠50只，體質(zhì)量18～20g，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只。在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上取1∶0.85為劑量比，劑量分別為722.5mg/kg、614mg/kg、522mg/kg、443.75mg/kg、377mg/kg，藥物采用低比稀釋法配制，給藥體積為0.5ml/20g體質(zhì)量，禁食16h后尾靜脈注射給藥，給藥后觀察動(dòng)物毒性反應(yīng)及死亡情況，每日1次，連續(xù)觀察14天，記錄動(dòng)物毒性反應(yīng)狀況和死亡動(dòng)物分布。

3 結(jié)果

3.1 穿琥寧注射液1號(hào)處方急性毒性試驗(yàn)

小鼠靜脈注射該藥后，高劑量立即有小鼠開始出現(xiàn)死亡，存活動(dòng)物出現(xiàn)活動(dòng)減少，食欲下降，精神狀態(tài)低下等狀況。死亡主要集中在前2天，第3天后基本恢復(fù)正常。連續(xù)觀察14天，未見異常反應(yīng)及死亡。

小鼠14日死亡分布見表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用改進(jìn)寇氏法計(jì)算LD50值及95%可信限［2］，結(jié)果見表2。

表1 穿琥寧注射液1號(hào)處方小鼠14日死亡分布情況

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，穿琥寧注射液1號(hào)處方靜脈注射LD50值為 402.50mg/kg，95%可信限為 371.47～433.53mg/kg。

表2 穿琥寧注射液1號(hào)處方小鼠的LD50測定

3.2 穿琥寧注射液2號(hào)處方急性毒性試驗(yàn)

小鼠靜脈注射該藥后，高劑量組立即有小鼠開始出現(xiàn)死亡，存活動(dòng)物出現(xiàn)活動(dòng)減少，食欲下降，精神狀態(tài)低下等狀況。死亡主要集中在前3天，第4天后基本恢復(fù)正常。連續(xù)觀察14天，未見異常反應(yīng)及死亡。

小鼠14日死亡分布見表3。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用改進(jìn)寇氏法計(jì)算LD50值及95%可信限，結(jié)果見表4。

表3 穿琥寧注射液2號(hào)處方小鼠14日死亡分布情況

表4 穿琥寧注射液2號(hào)處方小鼠的LD50測定

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，穿琥寧注射液2號(hào)處方靜脈給藥LD50值為 539.25mg/kg，95%可信限為 489.79～588.71mg/kg。

4 討論

本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了穿琥寧注射液1號(hào)處方及2號(hào)處方小鼠靜脈注射的急性毒性試驗(yàn)。結(jié)果表明，穿琥寧注射液1號(hào)處方靜脈給藥LD50值為402.50mg/kg，95%可信限為371.47～433.53mg/kg;穿琥寧注射液2號(hào)處方靜脈給藥LD50值為539.25mg/kg，95%可信限為489.79～588.71mg/kg。其主要中毒癥狀為藥后可致小鼠活動(dòng)減少，食欲下降，精神萎靡。動(dòng)物死亡情況為穿琥寧注射液1號(hào)處方主要集中在前2天，穿琥寧注射液2號(hào)處方主要集中在前3天。

穿琥寧注射液主要成分為穿心蓮，為爵床科植物穿心蓮(圓錐須藥草)［Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees］的干燥地上部分，秋初莖葉茂盛時(shí)采割，曬干，其性寒味苦，有清熱解毒，涼血，消腫之功效。穿琥寧注射液是采用新工藝將穿心蓮內(nèi)酯經(jīng)酯化、脫水、成鹽而制成的脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯單鉀鹽，但其輔料及生產(chǎn)工藝又有不同。通過本實(shí)驗(yàn)可知，不同輔料的處方其半數(shù)致死量是有區(qū)別的，因此不斷改進(jìn)工藝，改善處方并進(jìn)行毒性研究對(duì)保障臨床使用的安全有效性并降低毒副作用具有重要意義。

［1］李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991:397.

［2］陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1993:112.

［3］劉霞，王軍永，張佐.雙向固體發(fā)酵后雷公藤菌質(zhì)的急性毒性研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2011，39(2):33－35.

［4］周海鈞.生物檢定統(tǒng)計(jì)方法［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1998:182－185.