盧飛飛，任婧婧，劉 寧，王黎明，王言奎，孫顯璐

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東青島 266003)

研究表明，影響卵巢癌預(yù)后的因素較多，如手術(shù)后分期、組織類型、細(xì)胞分化程度、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、腹水中是否有癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)是否滿意等因素均與卵巢癌預(yù)后密切相關(guān)。本研究就核糖核苷酸還原酶大亞基(RRM1)在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的相關(guān)性進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2004年 6月 ～2008年 12月本院收治原發(fā)上皮性卵巢癌患者 62例，年齡 21～75(47.1±13.5)歲，術(shù)前均未接受任何治療。組織學(xué)分級:高分化 8例、中分化 18例、低分化 36例;病理類型:漿液性腺癌 31例、黏液性腺癌 17例、內(nèi)膜樣癌 6例、透明細(xì)胞癌 8例;FIGO分期:Ⅰ期 21例、Ⅱ期 5例，Ⅲ期 32例、Ⅳ期 4例。其中 57例有詳細(xì)隨訪資料(5例失訪)，隨訪時間為 4～72個月，平均40.8個月。隨訪截止時間為 2010年 6月，至最后 1次隨訪 42例死亡。

1.2 方法 采用 PV-6000兩步法檢測 RRM1蛋白的表達(dá)，每批切片中均設(shè)陽性對照片和陰性對照片。免疫組化結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)，采用二級評分法進(jìn)行，由兩名分子病理醫(yī)師判定。每張切片隨機(jī)觀察 5個高倍視野，每個視野記數(shù) 100個癌細(xì)胞，根據(jù)染色程度和染色細(xì)胞所占百分比進(jìn)行評分。顯色強(qiáng)度分為 4級:陰性(不著色)，弱陽性(著淡黃色)，陽性(著棕黃色)，強(qiáng)陽性(著棕褐色或者出現(xiàn)粗大的棕褐色顆粒)，以 0～3分分別代表不同顯色強(qiáng)度。著色陽性細(xì)胞占計數(shù)細(xì)胞 ＜5%為 0級(-)，5%～25%為 1級 (+)，26% ～50%為 2級 (++)，＞50%為 3級(+++)。用陽性強(qiáng)度評分乘以陽性腫瘤細(xì)胞比例評分得到最后的半定量 H值來衡量最終的蛋白表達(dá)強(qiáng)度:乘積 ＞4者為陽性表達(dá)(高表達(dá))，0～3者為陰性表達(dá)(低表達(dá))。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用 SPSS17.0分析軟件包，單因素生存分析采用 Kaplan-Meier方法，運(yùn)用 COX風(fēng)險比例模型對預(yù)后進(jìn)行單因素、多因素分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RRM1蛋白表達(dá)與上皮性卵巢癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系 見表1。

2.2 RRM1蛋白表達(dá)與上皮性卵巢癌預(yù)后的關(guān)系RRM1陰性表達(dá)組 (23例)5 a累積生存率為13.04%，陽性表達(dá)組(39例)5 a累積生存率為35.90%。Kaplan-Meier生存曲線分析顯示，RRM1陽性與陰性表達(dá)者生存率比較無統(tǒng)計學(xué)差異(χ2=0.155，P＞0.05)。 Ⅰ ～Ⅱ期卵巢癌中 RRM1陽性表達(dá)者較陰性表達(dá)者生存率高(χ2=4.111，P＜0.05)，Ⅲ ～Ⅳ期卵巢癌中 RRM1陽性表達(dá)者較陰性表達(dá)者生存率低(χ2=8.947，P＜0.05)。

2.3 影響上皮性卵巢癌預(yù)后的危險因素 COX模型單因素分析顯示，腹水、FIGO分期Ⅲ ～Ⅳ期、癌組織低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、殘癌灶直徑≥2 cm、大網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移及 RRM1表達(dá) +低分化在預(yù)后分析中具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均 ＜0.05)。多因素分析顯示 FIGO分期Ⅲ ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及 RRM1表達(dá) +低分化為卵巢癌總生存期的獨(dú)立危險因素;RRM1表達(dá) +低分化者死亡危險度是非 RRM1表達(dá) +低分化者的4.252倍。見表2。

表1 RRM 1蛋白與上皮性卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系

表2 上皮性卵巢癌預(yù)后影響因素的多因素COX回歸分析

3 討論

核糖核苷酸還原酶(RR)是 DNA通路中合成和修復(fù)的限速酶，腫瘤的形成和生長都和 DNA合成有關(guān)。RR由 M1和 M2兩個亞基構(gòu)成，RRM1是腫瘤抑制基因[1，2]。RRM1可以激發(fā) G2檢測點(diǎn)功能 ，增加 DNA損傷后的修復(fù)和凋亡，并可以抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲。研究報道，RRM1通過產(chǎn)生脫氧核苷酸和誘導(dǎo)磷酸酶和張力蛋白同源物產(chǎn)生來控制細(xì)胞增殖，阻止細(xì)胞遷移、浸潤和轉(zhuǎn)移[3]。本研究結(jié)果顯示 RRM1蛋白在低分化卵巢癌患者陽性表達(dá)率高于高、中分化患者，這表明 RRM1有可能參與了上皮性卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展過程。

有學(xué)者認(rèn)為 RRM1對惡性腫瘤的預(yù)后判斷具有一定的臨床價值。本資料中單因素生存曲線分析顯示，在Ⅰ ～Ⅱ期上皮性卵巢癌患者中，RRM1陽性表達(dá)者生存率比陰性表達(dá)者高，預(yù)后較好;而在Ⅲ ～Ⅳ期上皮性卵巢癌患者中，RRM1陽性表達(dá)者生存率低，預(yù)后較差，該結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)研究結(jié)果一致[4～7]。其原因可能是 RRM1在腫瘤的不同臨床分期中的作用機(jī)制不同。在早期癌癥中 RRM1可能作為一種腫瘤抑制基因阻止細(xì)胞遷移、浸潤和轉(zhuǎn)移，從而出現(xiàn) RRM1陽性表達(dá)者較陰性者預(yù)后好;而在晚期癌癥患者中，RRM1可能對一些化療后受損的癌細(xì)胞起到修復(fù)作用并保護(hù)腫瘤細(xì)胞逃避化療藥物誘導(dǎo)的凋亡，從而造成 RRM1陽性表達(dá)者預(yù)后差[8]。文獻(xiàn)報道，RRM1表達(dá)不能作為腫瘤患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素[9，10]，本研究結(jié)果與此一致。COX回歸模型多因素分析，RRM1陽性表達(dá) +癌組織低分化者死亡危險度是非 RRM1陽性表達(dá) +癌組織低分化者的 4.252倍，這表明 RRM1對預(yù)后的評價具有一定的指導(dǎo)意義。

綜上所述，RRM1對上皮性卵巢癌的診斷及預(yù)后評價具有一定的參考價值。但 RRM1在腫瘤不同臨床分期中的作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

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