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        尿糖對白細胞干化學(xué)法檢測結(jié)果的影響

        2011-04-14 04:03:40長江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院荊州市中心醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗部湖北荊州434020
        關(guān)鍵詞:尿糖酯酶比色

        關(guān) 濤 (長江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗部,湖北 荊州434020)

        為探討尿糖對尿液分析儀白細胞干化學(xué)檢測結(jié)果的影響,我們分析了我院門診干化學(xué)檢測尿糖陽性且鏡檢白細胞陽性的患者尿液標本200例的尿檢資料,現(xiàn)報道如下。

        1 臨床資料

        1.1 設(shè)備與試劑

        本實驗室所用儀器為GEB-600自動尿液分析儀 (廣州市花都高爾寶生物技術(shù)有限公司),及配套的試紙條GEB-11(100人份/筒);尿液質(zhì)控品 (上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司生產(chǎn));鏡檢用雙目顯微鏡(日本產(chǎn)奧林巴斯公司);10ml定量吸管;牛鮑氏計數(shù)板;低速自動平衡離心機 (4000r/min)。

        1.2 標本來源

        隨機選取我院門診干化學(xué)尿糖≥2.8mmol/L為陽性的尿液標本200例,其中男50例,女150例,年齡18~65歲。

        1.3 檢測方法及結(jié)果

        1.3.1 尿液分析儀檢測尿糖 用定量吸管吸取混勻的10ml新鮮尿液于玻璃試管中,將尿試紙條浸入1s后取出,試紙帶由藍色→棕色的顏色變化來指示,藍色為無尿糖,用 “-”表示,棕色越深,“+”越多,尿糖越高。結(jié)果報告為±、+、2+、3+、4+。檢測結(jié)果見表1。

        表1 尿液檢測結(jié)果

        1.3.2 鏡檢 取尿液10ml于試管中,以2000r/min離心5min,棄去上清液,留沉淀0.2ml。充分混勻后,取出約20μl滴于載玻片上,加蓋玻片,然后用較弱的光線先以低倍鏡觀察全貌,再用高倍鏡辨認細胞。為避免尿液中有形成分的破壞,所有檢測均在取樣后1h內(nèi)完成。尿液干化學(xué)質(zhì)控參照叢玉隆[1]報道的方法。尿沉渣鏡檢判讀標準:以白細胞≥14×106個/L為陽性[2]。

        2 討 論

        尿液干化學(xué)分析儀是測定尿中某些化學(xué)及有形成分的自動化儀器,它無論是在哪一級醫(yī)院里都是非常普通但又是非常重要的自動化檢測設(shè)備,這種儀器具有體積小、操作簡單、快速等優(yōu)點。但是在使用中有許多因素都有可能影響該儀器檢測結(jié)果的準確性,不僅會引起實驗結(jié)果的偏差,而且耽誤了臨床醫(yī)生的診斷。因此,除了要求操作者熟練掌握尿液分析儀的原理、使用方法、注意事項及影響因素等方面之外,還要定期對其進行保養(yǎng) (如日、周、月、年保養(yǎng)等),這樣才能確保尿液分析儀處在一個最佳狀態(tài),從而讓它所檢測的結(jié)果更準確。

        尿液干化學(xué)分析儀各測試項目的主要檢測原理是依據(jù)多聯(lián)試紙帶上各自對應(yīng)模塊化學(xué)反應(yīng)后顏色變化的深淺來確定尿液中的含量,其測試原理的本質(zhì)是光的吸收和反射,試劑塊顏色的深淺對光的吸收、反射是不一樣的,光值量越小,反射光量值越大,反射率也越大。換言之,特定試劑塊顏色的深淺與尿液中特定化學(xué)成分濃度成正比,因此任何外源性物質(zhì)或人為因素對尿液標本對多聯(lián)試紙帶模塊的干擾,均可引起檢測結(jié)果的誤差。我科采用的與儀器配套的GEB11型尿試紙條檢測白細胞模塊的原理則是白細胞酯酶法,因為單核細胞、淋巴細胞無這種酯酶,只有中性粒細胞內(nèi)含有酯酶,這種酶能水解一種3-羥基吲哚酚酯類底物,釋放出酚從而與重氮試劑反應(yīng)生成紫紅色化合物,所以干化學(xué)法白細胞檢測方法只對粒細胞敏感。另外,如果白細胞被破壞后,酯酶釋放到尿液中,其干化學(xué)結(jié)果為陽性,而沉渣結(jié)果為陰性,在實際操作中應(yīng)注意。尿糖測定的原理則是基于葡萄糖氧化酶的酶促反應(yīng),只與葡萄糖發(fā)生反應(yīng),當葡萄糖氧化酶特異性氧化β-D-葡萄糖醛縮合過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶的作用下,使指示劑氧化而呈現(xiàn)出棕色,試紙后一步反應(yīng)為氧化還原反應(yīng),當尿液中含有比色素還原能力更強的物質(zhì)時,可使尿糖結(jié)果偏低,甚至可以出現(xiàn)假陰性;如尿液中含有維生素C,可使尿糖結(jié)果偏低,可出現(xiàn)假陰性[3],當尿糖陽性即尿糖≥2.8mmol/L時,干化學(xué)法檢測白細胞的結(jié)果的假陰性率達35%~85%,尿糖對于化學(xué)法測定白細胞的干擾程度隨著尿糖含量的增加而升高。

        3 體 會

        ①尿干化學(xué)分析須使用新鮮尿液標本,標本量應(yīng)該在10ml以上。②在使用任何一種尿試紙前,首先應(yīng)該認真閱讀使用說明書,并嚴格按照它的要求和操作方法執(zhí)行。試紙應(yīng)該在有效期內(nèi)使用,禁止用手觸摸試紙上的試劑反應(yīng)區(qū)。每次取出試帶后應(yīng)立即蓋緊蓋子,將余下的試帶儲藏在避光、干燥的試帶瓶內(nèi),室溫條件下保存。③各廠家生產(chǎn)的尿試紙,其反應(yīng)原理和項目排列方式都有不同,反應(yīng)時間、顏色變化、靈敏度等各有不同,選用的測定單位也不一致,因此,不能混合使用或用不同的比色板比色。④試紙浸入尿液的時間不要太長,嚴格掌握比色時間,在規(guī)定時間時完成比色。某些反應(yīng)如葡萄糖、酮體、潛血試驗等會因比色時間延長而使得結(jié)果偏高。⑤由于干化學(xué)法是依靠顏色變化來反映檢測結(jié)果的,因此人眼睛對顏色的識別和判斷非常重要。但是目測法因人與人之間對顏色的辨別能力不同,會出現(xiàn)判別誤差,因此在有條件的情況下盡量使用半自動或全自動尿液分析儀。⑥干化學(xué)儀器法檢查白細胞只能作為一種篩選試驗,絕不能代替顯微鏡檢查。

        [1]叢玉隆 .尿液常規(guī)分析質(zhì)量控制及臨床應(yīng)用體會 [J].臨床檢驗雜志,2001,19(4):241-243.

        [2]李小龍,郭仁勇,陳曉東.Diasys尿沉渣測定方法的參考值確定 [J].臨床檢驗雜志,2003,21(1):46-47.

        [3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子喻 .全國臨床檢驗操作規(guī)程 [M].3版 .南京:東南大學(xué)出版社,2006:284-285.

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