刁騁

(沈陽醫(yī)學院基礎醫(yī)學院免疫學教研室，遼寧 沈陽 110034)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡 (systemic lupus erythematosus，SLE)是一種以B細胞高度活化增殖、多種自身抗體生成為特征的多系統(tǒng)損害的自身免疫性疾病，發(fā)病機制尚不明確，目前認為發(fā)病與遺傳因素、感染因素、自身免疫和其他發(fā)病因素有關。此外，一些藥物也可引起本病，如青霉素、磺胺類、異煙肼、對氨基水楊酸、普魯卡因酰胺等。又稱類狼瘡綜合征，停藥后癥狀可消失。目前認為本病系由上述諸因素誘發(fā)的自身免疫性疾病。各種自身抗體與相應的抗原結合形成可溶性免疫復合物，在補體參與下，沉積于靶器官，從而產(chǎn)生全身血管及相應組織器官的炎性反應，造成組織病理損害。目前認為是通過多種途徑使體內自身反應性T，B細胞異常激活所致，白細胞介素-10(interleukin-10，IL-10)是一種重要的免疫調節(jié)因子，國外研究發(fā)現(xiàn)，連續(xù)注射IL-10可顯著加速狼瘡鼠發(fā)病，使蛋白尿和腎小球腎炎提前出現(xiàn)，而抗IL-10單抗可明顯抑制抗ds-DNA抗體產(chǎn)生，提高狼瘡鼠存活率。國外研究發(fā)現(xiàn)SLE患者外周血單核細胞中分泌IL-10細胞數(shù)目較正常人增多。國內也有研究證明狼瘡腎炎患者血清中IL-10水平顯著高于正常人群組，且隨著病情的好轉，其水平下降，治療反應較好組其水平下降的程度較治療反應差組下降程度更為顯著［1］。新近研究提示具有特定IL-10基因的人SLE發(fā)病風險高于正常人40倍。表明IL-10在SLE發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用［2］。

1 白介素-10(IL-10)

IL-10是由T細胞、B細胞、單核巨噬細胞和角質形成細胞產(chǎn)生的一種細胞因子［3-4］。編碼人類IL-10基因位于1q31-q32，全長4 892bp，包括5個外顯子，已經(jīng)被定位SLE的易感基因。編碼小鼠IL-10基因位于1號染色體，全長5 124bp，包括5個外顯子。IL-10首先是作為一種抑制性細胞因子為人所知的，它可以由Th2細胞產(chǎn)生來抑制Th1細胞的發(fā)育。IL-10可以通過抑制單核巨噬細胞的抗原提呈作用和表達協(xié)同刺激分子，來間接抑制T細胞和NK細胞的產(chǎn)生細胞因子和發(fā)揮相應免疫效應。許多研究也提示，IL-10對活化后的單核巨噬細胞的眾多功能可以產(chǎn)生抑制作用，例如抑制單核因子，NO的產(chǎn)生，協(xié)同刺激分子的表達，MHC-Ⅱ類分子的表達等。在IL-10缺陷小鼠身上表現(xiàn)出過度的炎癥性反應引起的疾病，提示IL-10具有抑制炎癥的作用。除了抑制作用，IL-10還具有刺激人B細胞、小鼠淋巴細胞和肥大細胞增殖分化，上調B細胞MHC-Ⅱ分子表達，在體外延長肥大細胞系、小鼠B細胞和人類T細胞生存時間的作用。IL-10還與EB病毒蛋白BCRF1具有同源性［5］，BCRF1可以抑制部分IL-10的生物學功能。

2 白介素-10受體 (IL-10R)

與其他細胞因子一樣IL-10要與細胞膜表面的IL-10受體結合才能發(fā)揮作用。人類和小鼠的IL-10受體由兩個亞單位組成――IL-10R1和IL-10R2，屬于干擾素受體家族成員。人類IL-10R1是由位于11q23基因編碼一種糖蛋白，IL-10R1是IL-10受體中與IL-10結合的亞單位，小鼠IL-10R1受體可以與小鼠IL-10和人類IL-10發(fā)生結合，而人類IL-10R1只能與人類IL-10發(fā)生結合，而不與小鼠IL-10發(fā)生結合。目前還未見發(fā)現(xiàn)體內可溶性IL-10R1的報道，但是體外實驗提示可溶性IL-10R1可以明顯拮抗IL-10活性［6］。IL-10R1主要表達在造血細胞表面，但是表達水平不高，活化后的T細胞IL-10R1表達水平有所下調，相反活化后的單核細胞表達水平上調，這與IL-10作為抑制性細胞因子起免疫抑制作用一致［7］。IL-10R2早先被認為是干擾素受體 (interferon receptor，IFNR)的組成部分，人類IL-10R2由11號染色體基因編碼，IL-10R2不與IL-10發(fā)生結合，在IL-10R復合物中IL-10R2只起到激發(fā)細胞內轉導信號的作用，有實驗表明IL-10R2基因敲掉鼠與IL-10基因敲掉鼠引起的癥狀相似［8］。IL-10R2在大多數(shù)組織和細胞中都有表達，且IL-10R2在免疫細胞表面的表達不受活化的調節(jié)。因此任何能夠改變IL-10R1表達的調節(jié)就能夠影響該細胞對IL-10的反應。

3 細胞內轉導信號

在IL-10引發(fā)的眾多轉導信號中，JAK/STAT信號途徑是最受關注的。IL-10與IL-10R結合后會激活JAK1和Tyk2。激活后的JAK家族的酪氨酸激酶，JAK1和Tyk2，可繼續(xù)激活轉錄因子stat3、stat1，在非巨噬細胞中還可激活stat5［9-12］。研究發(fā)現(xiàn)［13］，在JAK1基因敲除小鼠體內對IL-10沒有反應，提示JAK1在IL-10產(chǎn)生的細胞內信號中具有重要的作用。STAT3也是IL-10信號中一個重要成分，在IL-10與IL-10R1結合后，IL-10R1細胞漿段兩個酪氨酸位點磷酸化，STAT3被直接從胞漿募集。激活后的STAT3可以通過增強細胞周期抑制蛋白p19INK4D和p21的表達來抑制巨噬細胞的增殖［14］。但是在STAT3敲除小鼠中不能減弱IL-10抑制單核細胞產(chǎn)生單核細胞因子，這個發(fā)現(xiàn)提示IL-10抑制單核細胞增殖與單核細胞因子產(chǎn)生是通過兩個不同的途徑［15］。相對于 STAT3，STAT1和STAT5的生物學和細胞信號轉導途徑還不清楚，STAT1和STAT5可能不與IL-10和IL-10R復合體直接接觸，沉默STAT1和STAT5也不會阻斷IL-10對巨噬細胞的影響。目前對與IL-10信號轉導大部分都集中于在單核巨噬細胞、T細胞和B細胞中，在其他細胞中知之甚少。

除了JAK/STAT信號途徑，IL-10還可以激活其他信號轉導途徑。IL-10可以抑制NFκB活化來抑制單核巨噬細胞增殖，從而抑制了CD4+T淋巴細胞的活化。IL-10至少通過兩個機制抑制NFκB活化，一個是抑制IκB激酶活化［16］，另一個是抑制NFκB的DNA結合部位的活性［17］。然而還有報道指出，在CD8+T細胞中IL-10可以激活AP-1和NFκB，從而刺激 CD8+T細胞增殖分化［18］。可見IL-10在對CD4+T細胞和CD8+T細胞的作用截然不同。IL-10還可以誘導CD34+祖細胞和生發(fā)中心B細胞 Bcl-2表達，具有類似生長因子的作用［19-20］。有報道還指出 IL-10可以抑制 raf/ras/MAP激酶級聯(lián)反應的激活［21］。有人指出，IL-10本身并不能長期維持細胞增殖，而是表現(xiàn)為增殖增強作用或者生長輔助因子的作用［22］。

4 IL-10，IL-10R與SLE的關系

IL-10可以增強小鼠初始B淋巴細胞MHC-Ⅱ分子的表達和存活［23］，抑制B1細胞的活性和對胸腺非依賴抗原 (thymus independent antigen，TIAg)的反應。而且有報道指出IL-10單克隆抗體可以延遲NZW型小鼠狼瘡發(fā)病時間［24］，但是機制尚不清楚。IL-10在誘導B淋巴細胞分泌的抗體發(fā)生類型轉換時也起到重要作用。目前利用IL-10對B細胞的影響來治療疾病主要體現(xiàn)在兩個方面。(1)利用IL-10可以促進B淋巴細胞增殖和發(fā)生抗體的類型轉換，來治療免疫缺陷病。(2)IL-10的拮抗劑可以用來治療自身免疫病，例如SLE。已經(jīng)證實，SLE患者血清IL-10水平與疾病的嚴重程度呈正相關，IL-10的量與B細胞產(chǎn)生的自身抗體的量也呈正相關。目前在IL-10處找到治療突破點，利用IL-10單克隆抗體等拮抗劑治療SLE已經(jīng)成為世界關注的焦點。

目前IL-10基因作為SLE遺傳候選基因，成為研究的熱點。有實驗已證實-1082G、-819C、-592C單倍型與抗Ro抗體及狼瘡腎炎相關［25］。在研究IL-10基因本身和其調控序列的同時，還有人發(fā)現(xiàn)小鼠IL-10對小鼠B淋巴細胞產(chǎn)生的功能，在小鼠IL-10R1分子胞漿區(qū)呈區(qū)段分布，且靠近細胞膜的一段區(qū)域與抑制性調節(jié)有關［26］。有人對NZW狼瘡小鼠的IL-10R1基因進行的研究指出，NZW小鼠的IL-10R1基因在此區(qū)段具有突變，并且導致編碼氨基酸發(fā)生改變，這有可能使IL-10的免疫抑制功能受到影響，成為狼瘡發(fā)病的原因［27］。體內實驗指出，在狼瘡模型小鼠中巨噬細胞在IL-10的刺激下增殖加強，部分前炎癥因子分泌增加，而TNF-α分泌減少，胞漿內與IL-10信號轉到有關的蛋白磷酸化水平下降［28］。有報道指出在多發(fā)性硬化患者體內IL-10對Tr1細胞的負向調節(jié)作用減弱［29］，也有報道指出SLE患者中Treg存在功能異常［30］，單核細胞表面 IL-10R 表達減少［31］。綜上所述，IL-10在SLE發(fā)病過程中起重要作用，發(fā)病的原因可能與IL-10本身或者IL-10R發(fā)生了改變，造成IL-10的免疫抑制功能受到影響，導致體內免疫耐受和免疫調節(jié)機制受損有關。

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