孟連柱 高 愛武 韓 麗娟 邊 劍飛 楊勝芬

病毒性肝炎的發(fā)病機制至今尚未完全明了，很多研究證明氧化應激(oxidative stress，OS)是很重要的影響因素，病毒性肝炎患者體內存在嚴重的氧化/抗氧化失衡狀態(tài)［1］。硝基酪氨酸(NT)常在病理狀態(tài)下伴隨活性氧和活性氮的增加而產生，NT作為一種蛋白質翻譯后修飾，可反映蛋白質硝基化程度。本研究通過檢測慢性乙型病毒性肝炎不同程度肝損害患者血清NT水平，探討慢性乙型病毒性肝炎病情進展中的氧化損傷。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇慢性乙型病毒性肝炎患者40例，其中男27例，女13例，符合中華醫(yī)學會肝病學分會及中華醫(yī)學會感染病學分會2000年聯合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》［2］的診斷標準。其中病毒性肝炎乙型慢性重度組(慢重肝)20例，男15例，女5例;年齡13～45歲，平均年齡(30±10)歲。病毒性肝炎乙型慢性輕度組(慢輕肝)20例，男16例，女4例;年齡15～46歲，平均年齡(26±10)歲，無其他因素導致肝損害因素。正常對照組20例，男13例，女7例;年齡14～44歲，平均年齡(27±10)歲。所有患者均除外甲肝病毒(HAV)、丙肝病毒(HCV)、丁肝病毒(HDV)及戊肝病毒(HEV)的混合或重疊感染及免疫性疾病，入選前半年內未使用過抗病毒藥物及免疫抑制劑，健康對照組HAV、HCV、HDV及HEV檢測均為陰性。3組年齡等一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

1.2 標本采集及測定 所有研究對象均于晨醒5 min內抽取肘靜脈血3 ml，混勻，4℃，3 000 r/min離心15 min，分離血清－70℃保存待測血清NT。所有標本一批次由同一人、同一時間檢測。NT應用酶聯免疫吸附法測定，試劑盒由上海西唐生物科技有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計學分析應用SAS 8.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，采用因素與差分析，兩兩比較采用q檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

正常對照組、慢重肝、慢輕肝患者血清NT水平分別為(2.3±1.5)、(3.8 ±2.6)和(5.4 ±3.3)ng/ml，慢輕肝患者與對照組相比，慢重肝與慢輕肝患者組相比血清NT濃度均升高(P＜0.05)，慢重肝與對照組比升高更顯著(P ＜0.01)。

3 討論

蛋白質硝基化一般是指蛋白質中的酪氨酸硝化成NT。NT的產生可引起細胞內蛋白質及酶變性、DNA損害，最后導致細胞死亡或凋亡。常在病理狀態(tài)下伴隨活性氧和活性氮的增加而產生，在氧化應激存在條件下，明顯升高［3，4］，并且隨著病情的加重而升高，通過檢測血清NT水平可以預測肝損傷的程度，從而間接反映OS的程度［5］。林亞杰等［6］對慢乙肝氧化損傷研究指標丙二醛(MDA)結果提示隨著病情的加重，MDA是增高的，重癥患者氧化損傷重于輕癥患者。

本研究將研究對象分為3組，即正常對照組、慢輕肝及慢重肝，3組平均年齡差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，除外其他致NT升高的疾病，除外吸煙、飲酒、藥物等諸多因素的干擾，結果發(fā)現血清NT水平在慢輕肝患者組比正常對照組明顯升高，慢重肝患者組進一步升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。表明慢輕肝患者有著較高水平的蛋白質硝基化標志物產生，提示慢輕肝患者存在OS，慢重肝患者比慢輕肝患者有著更高水平NT，表明慢重肝患者存在更強的OS，我們的研究顯示無論是病毒性肝炎乙型慢性輕度組(慢輕肝)患者還是病毒性肝炎乙型慢性輕度組(慢重肝)患者機體內均存在氧化損傷改變。這與馬邵等［5］研究結果亦有相似之處。

1 吳娜，蔡光明，何群.氧化應激與肝臟損傷.世界華人消化雜志，2008，16:3310-3315.

2 中華醫(yī)學會傳染病與寄生蟲學分會/肝病學分會.病毒性肝炎防治方案.中華肝臟病雜志，2000，8:324-329.

3 Pacher P，Beckman JS，Liaudet M，et al.Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease.Physiol Rev，2007，87:315-424.

4 池泉，黃開勛.蛋白質酪氨酸硝化研究.化學進展，2006，18:315-424.

5 馬邵，葉青，郭帥.檢測肝損傷患者的血清3-硝基酪氨酸的臨床意義.新醫(yī)學，2009，40:381-382.

6 林亞杰，肖偉玲.慢性乙型肝炎患者氧化損傷的檢測及臨床意義.山東大學學報(醫(yī)學版)，2006，44:706-709.