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        乙肝ELISA檢測(cè)中HBeAg和抗-HBe雙陽(yáng)性原因分析

        2011-03-31 15:12:11張建強(qiáng)
        當(dāng)代臨床醫(yī)刊 2011年6期
        關(guān)鍵詞:雙陽(yáng)血塊初篩

        張建強(qiáng)

        (江蘇省金壇市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 213200)

        乙型肝炎病毒HBeAg陽(yáng)性,表明病毒復(fù)制活躍、 傳染性強(qiáng),與HBsAg同時(shí)陽(yáng)性發(fā)生肝癌的危險(xiǎn)系數(shù)增加60倍,抗-HBe陽(yáng)性說(shuō)明病毒復(fù)制減少,傳染性弱。近年來(lái),普遍使用ELISA一步法,在工作中遇到HBeAg和抗-HBe雙陽(yáng)性的少見(jiàn)模式,為了分析這一現(xiàn)象,筆者進(jìn)行了研究,現(xiàn)報(bào)告如下。

        1 材料與方法

        1.1 標(biāo)本來(lái)源 本院門(mén)診和住院患者887例,其中36例初篩模式為 HBsAg、HBeAg、抗 -HBe、抗 -HBc4項(xiàng)陽(yáng)性。

        1.2 試劑和儀器(1)HBeAg和抗-HBe為中山達(dá)安生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品,批號(hào)分別為:20100316、20100516,HBeAg 樣品吸光度值/臨界值(S/N)≥2.1判陽(yáng)性,抗-HBe以抑制率>50%判陽(yáng)性。

        1.3 方法(1)初篩:一步法,嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作,每加5份血消加入酶標(biāo)抗體。分別檢測(cè)HBeAg、抗-HBe。(2)復(fù)核:溶血標(biāo)本重抽血,脂法患者禁脂3天后抽血;血塊收縮不良,分離不完全標(biāo)本,經(jīng)3000r/minl0~15min的離心。

        2 結(jié)果

        初篩36份HBeAg和抗-HBe雙陽(yáng)血清。經(jīng)復(fù)核:8份 HBeAg陰性,抗 -HBe仍陽(yáng)性,20份HBe陰性,HBeAg仍陽(yáng)性,8份 HBeAg和 HBeAg仍為雙陽(yáng)。

        3 討論

        有學(xué)者提出 HBeAg和抗 -HBe雙陽(yáng)是HBeAg向抗HBe轉(zhuǎn)化的過(guò)渡階段[1]。本次試驗(yàn)與以上理論不完全相符,雙陽(yáng)性結(jié)果是假陽(yáng)性所致,可能的原因?yàn)?溶血標(biāo)本釋放大量過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,產(chǎn)生干擾。血塊收縮不良,分離不徹底,血清中混有過(guò)氧化物酶成分,對(duì)HBeAg產(chǎn)生正干擾[2]。脂濁致抗-HBe干擾主要考慮乳糜微粒引起,它造成血清黏度增大的運(yùn)動(dòng)速度減慢或產(chǎn)生屏蔽效應(yīng),抗原抗體結(jié)合幾率下降,最終顯色降低,產(chǎn)生假陽(yáng)性。一步法對(duì)抗-HBe易產(chǎn)生前帶現(xiàn)象,若血清中有大量HBeAg,使固相HBeAb-HBeAg-HBeAh-HRP生成減少,顯色下降產(chǎn)生假陽(yáng)性。一步法若加入血清放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),再加酶標(biāo)抗體也會(huì)產(chǎn)生抗-HBe假陽(yáng)性[3]。另仍然有8份標(biāo)本為雙陽(yáng)性,推測(cè)可能是由于方法方面的因素導(dǎo)致,由于條件所限未能進(jìn)一步確證。

        綜上所述,HBeAg和抗一HBe雙陽(yáng)多為操作不規(guī)范和標(biāo)本影響因素造成。工作中嚴(yán)格按照SOP操作,對(duì)于溶血,脂血等不合格標(biāo)本應(yīng)予退回或重新抽血復(fù)查。

        [1]朱忠勇.實(shí)用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué).北京:人民軍醫(yī)出版社,1992,900 -901.

        [2]趙友云,劉光中,馬煜南.酶免疫檢測(cè)HBeAg假陽(yáng)性原因分析.臨床檢驗(yàn)雜忐,2000,18:263.

        [3]騰龍,陳鋼,洪加林.酶免疫競(jìng)爭(zhēng)一步法檢測(cè)乙型肝炎病毒抗-HBe影響因素探討.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2003,26:111.

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