楊杰

厚樸為木蘭科植物厚樸或凹葉厚樸的干燥干皮、根皮及枝皮。文獻(xiàn)報(bào)道，主要化學(xué)成分厚樸酚與和厚樸酚中樞松弛和光譜抗菌作用［1］。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用反相高效液相色譜法測定厚樸提取液中厚樸酚與和厚樸酚的含量［1］，為最大程度提取厚樸中的有效成分提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 儀器與藥品 1100型高效液相色譜儀(美國Agilent);紫外檢測器;電子天平(上海方瑞儀器有限公司);JP300G型超聲提取儀(武漢嘉鵬電子有限公司)。厚樸酚(對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號(hào):0729-200107)、和厚樸酚(對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號(hào):0730-9204)，甲醇(色譜純，天津市西華特種試劑廠)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 提取條件:①提取溶劑:取同一批號(hào)樣品4.0 g，分別用超聲提取和熱浸回流法提取相同的時(shí)間，提取液用高效液相色譜法測定峰面積。分別用純水、30%甲醇、50%甲醇、70%甲醇和100%甲醇用最佳提取方式提取相同時(shí)間，提取液用液相法測定峰面積，確定出最佳提取溶劑濃度。②提取時(shí)間:取同一批號(hào)樣品4.0 g，用最佳提取方式和最佳提取溶劑分別提取30、40、50、60 min，提取液用液相法測定峰面積，確定出最佳提取時(shí)間。

1.2.2 線性關(guān)系:精密稱取對照品厚樸酚及和厚樸酚各4.8、4.0 mg，分別置10 m l量瓶中，甲醇溶解并補(bǔ)至刻度線混勻，分別吸取此溶液 0.125、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 ml置10 ml量瓶中，甲醇溶解并補(bǔ)至刻度線混勻，分別精密吸取原液及稀釋液各10μl，用液相法測定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行回歸。

1.2.3 精密度:精密吸取厚樸酚、和厚樸酚對照品溶液(濃度分別為35.84、34.36μg/m l)10.0μl，重復(fù)進(jìn)樣6次，按上述色譜條件測定厚樸酚、和厚樸酚峰面積。厚樸酚RSD=1.34%，和厚樸酚RSD=1.24%。

1.2.4 穩(wěn)定性:精密稱取同一批號(hào)下的樣品4.0 g，置50 ml容量瓶中，加入甲醇，超聲處理50 min，放冷，定容，搖勻，過濾，即得。每隔2 h進(jìn)樣1次。

1.2.5 回收率:取同一批樣品6份，分為2組，按高、低2種劑量，分別加入50 ml不同濃度的厚樸酚及和厚樸酚對照品甲醇溶液，按照樣本制備方法制備待測液，測定并計(jì)算回收率。

2 結(jié)果

2.1 提取條件的選擇 最佳提取方式為超聲提取，溶劑為100%甲醇，時(shí)間50 min。

2.2 線性關(guān)系 厚樸酚:回歸方程為Y=8 109.6X+16 033，r=0.9998，和厚樸酚:Y=9412.1X-11 900，r=0.9990。厚樸酚在6.000～480μg/ml，和厚樸酚在5.00～400μg/ml與峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.3 精密度和穩(wěn)定性 厚樸酚RSD=1.34%，和厚樸酚RSD=1.24%，精密度較好，方法可行。和厚樸酚與厚樸酚峰面積RSD分別為1.45%和1.06%，表明提取物測定液中厚樸酚、和厚樸酚在12 h內(nèi)穩(wěn)定，重復(fù)性好。

2.4 加樣回收率 厚樸酚平均回收率為100.2%，RSD=1.93%(n=6);和厚樸酚平均回收率為98.8%，RSD=1.87%(n=6)。見表1。

表1 回收率實(shí)驗(yàn)測得結(jié)果 n=6

3 討論

本文采用高效液相色譜法，對提取厚樸中厚樸酚、和厚樸酚的提取條件作了篩選，分別考察精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和加樣回收率，得到了較好的結(jié)果，證明此法能最大程度提取厚樸中有效成分。

1 胡旭佳，郭毅新，何紅.HPLC測定順氣胃康膠囊中和厚樸酚與厚樸酚的含量.中國中藥雜志，2002，27:467-469.