李 軍 ，張 輝 ，李建文 ，白紅娟 ，楊官娥

1.山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，山西太原 030001；2.中北大學(xué)化工與環(huán)境學(xué)院，山西太原 030051

光合細(xì)菌菌劑是一種生物肥料[1-3]，它是以自配培養(yǎng)基為原料、活性光合細(xì)菌為菌種，經(jīng)現(xiàn)代生物工程技術(shù)研制而成的一種復(fù)合性生物肥料。具有生物固氮，分解硫化物、農(nóng)藥、化肥等多種有毒有害物質(zhì)的能力[4]，可有效降解土壤中的農(nóng)藥殘留、H2S、過(guò)剩氨氮等，無(wú)污染無(wú)公害，凈化土壤，促進(jìn)根系發(fā)育，是良好的土壤調(diào)節(jié)劑[5]。多年在農(nóng)作物上的應(yīng)用表明，光合細(xì)菌菌劑對(duì)于促進(jìn)農(nóng)作物的生長(zhǎng)發(fā)育、提高產(chǎn)量、防治病蟲(chóng)害、改善品質(zhì)、降低硝酸鹽含量等都有明顯的功效。

本文將光合細(xì)菌菌劑用于板藍(lán)根的種植。以大青葉中靛玉紅的含量和板藍(lán)根中醇溶性浸出物的含量來(lái)考察光合細(xì)菌菌劑對(duì)提高板藍(lán)根品質(zhì)的影響[6-8]。為光合細(xì)菌菌劑在中草藥種植中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 儀器

SHZ-III電熱恒溫水浴鍋 （上海賀德實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；AR1140電子分析天平 （奧豪斯國(guó)際貿(mào)易有限公司）；RE52-98型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；DHG202型電熱干燥箱（山東淮坊醫(yī)療器械廠）；LC-10ATvp高效液相色譜儀（日本島津）。

1.2 試劑與藥材

1.2.1 試劑 靛玉紅對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)717-200204）、氯仿（分析純，天津市化學(xué)試劑一廠）、甲醇（分析純，天津市化學(xué)試劑一廠；批號(hào)：990120）、無(wú)水乙醇（天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司，分析純；批號(hào)：20101208）。

1.2.2 藥材 沒(méi)有使用光合細(xì)菌菌劑的板藍(lán)根、大青葉藥材，使用1：1稀釋光合細(xì)菌菌劑培育的板藍(lán)根、大青葉藥材；藥材產(chǎn)地：山西陵川，經(jīng)山西醫(yī)科大學(xué)中藥學(xué)教研室白云娥副教授鑒定為十字花科植物菘藍(lán)的地上和地下部分，即大青葉（Folium Isatidis）和板藍(lán)根（Radix Isatidis）。

1.3 方法

1.3.1 大青葉中靛玉紅的含量測(cè)定 ①供試品溶液的配制：取大青葉的細(xì)粉0.25 g，精密稱定，置索氏提取器中，加氯仿浸泡15 h，加熱回流提取至提取液無(wú)色?；厥杖軇┲粮桑瑲?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至100 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液即得[9]。②對(duì)照品溶液的配制：精密稱取靛玉紅對(duì)照品0.002 1 g，加甲醇制成每1 ml含2.1 μg的溶液。③測(cè)定方法：分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20 μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。[色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（75∶25）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為289 nm。理論板數(shù)按靛玉紅峰計(jì)算，應(yīng)不低于4 000]。

1.3.2 板藍(lán)根浸出物含量測(cè)定 按照2010年版《中國(guó)藥典》一部醇溶性浸出物測(cè)定法 （附錄XA）項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定，用45%乙醇做溶劑。方法：取供試品2～4 g，精密稱定，置100～250 ml的錐形瓶中，精密加45%乙醇50～100 ml，密塞，稱定重量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用45%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過(guò)，精密量取濾液25 ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品計(jì)算供試品中醇溶性浸出物的含量（%）（此處方法后的內(nèi)容為新加內(nèi)容，在實(shí)驗(yàn)中精密加45%乙醇60 ml）。

2 結(jié)果

2.1 大青葉中靛玉紅的含量測(cè)定

通過(guò)3批樣品的測(cè)定表明，未使用光合細(xì)菌菌劑的大青葉中靛玉紅的含量為0.11 mg/g，使用光合細(xì)菌菌劑的大青葉中靛玉紅的含量為0.26 mg/g，增加了136.4%。對(duì)照品及樣品HPLC圖譜見(jiàn)圖1～3。

2.2 板藍(lán)根浸出物含量測(cè)定

由表1可知，板藍(lán)根中醇溶性浸出物含量由42.2%增加為47.2%，提高了11.8%。

表1 板藍(lán)根中醇溶性浸出物含量測(cè)量結(jié)果

3 討論

按照2010年版《中國(guó)藥典》一部規(guī)定，大青葉中靛玉紅含量不少于0.2 mg/g。本文中未使用光合細(xì)菌菌劑的藥材靛玉紅含量只有0.11 mg/g，通過(guò)應(yīng)用光合細(xì)菌菌劑使大青葉中靛玉紅含量增加為0.26 mg/g，增加了136.4%。說(shuō)明光合細(xì)菌菌劑可以提高大青葉的品質(zhì)。按照2010年版《中國(guó)藥典》一部規(guī)定，板藍(lán)根中浸出物的含量不少于25.0%。通過(guò)應(yīng)用光合細(xì)菌菌劑使板藍(lán)根中浸出物含量提高了11.8%，說(shuō)明光合細(xì)菌菌劑可以提高板藍(lán)根的品質(zhì)。

本研究為進(jìn)一步研究光合細(xì)菌菌劑對(duì)板藍(lán)根品質(zhì)的提升提供了理論依據(jù)，為光合細(xì)菌菌劑在其他中草藥種植中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。

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