袁銘銘，張文，熊曉麗，鐘瑞建，吳良發(fā)

1.江西省藥品檢驗檢測研究院，國家藥品監(jiān)督管理局中成藥質(zhì)量評價重點實驗室，江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心，江西 南昌 330029；2.江西省知識產(chǎn)權(quán)保護中心，江西 南昌 330029

大青葉為十字花科菘藍屬植物菘藍（Isatis indigoticaFort.）的干燥葉，具有清熱解毒，涼血消斑之功效。用于溫病高熱，神魂，發(fā)斑發(fā)疹，痄腮，喉痹，丹毒，癰腫［1］?，F(xiàn)代化學(xué)成分及藥理研究表明，其化學(xué)成分主要為生物堿類、有機酸類和黃酮類以及其他類。具有抗菌、抗內(nèi)毒素、抗炎、抗癌等藥理活性。本文對近年來國內(nèi)外大青葉化學(xué)成分、藥理作用進行綜述，從而更好地開發(fā)利用該藥用資源。

1 大青葉化學(xué)成分研究進展

迄今為止的化學(xué)研究結(jié)果表明，大青葉的化學(xué)成分主要為生物堿類，黃酮類、酚酸類以及其他類成分等。

1.1 生物堿類

大青葉中分離得到的生物堿主要為吲哚類生物堿和喹唑酮類生物堿。李薇等［2］從大青葉中分離得到5-羥基-2-吲哚酮。劉瑞等［3］使用HPLC-MS-MS鑒定出大青葉中含有黃嘌呤、次黃嘌呤。阮金蘭等［4］首次從大青葉中分離得到色胺酮。柳繼峰等［5-6］從大青葉中首次分離得到10H-indolo［3,2-b］quinoline、(E)-3-(3＇，5＇-dimethoxy-4＇-hydroxybenzylidene)-2-indolinone，2007 年分離得到兩個新生物堿類化合物9α，13α-Dihydroxylisopropylidenylisatisine A、Isatisine A。鄧湘昱等［7］從大青葉70%乙醇提取液中分離得到靛藍、青黛酮、脫氧鴨嘴花酮堿。姬志強等［8］從大青葉乙酸乙酯部位中分離得到靛玉紅和4(3H)-喹唑酮。李大偉等［9］從大青葉的水提取物中分離鑒定得到三個吲哚類生物堿indole-3-acetonitrile-4-methoxy-2-S-β-D-glucopyranoside、indole-3-acetonitrile-4-methoxy-2-S-β-D-Glucopyranoside、cappariloside A。Liu 等［10］從大青葉中分離得到6個新化合物和一個已知化合物，分別是Indiforine A、Indiforine B、Indiforine C、Indiforine D、Indiforine E、Indiforine F、methyl 2-(4-oxoquinazolin-3 (4H)-yl)benzoate。Liu 等［11］從大青葉中分離鑒定得到8 個有生物活性的對映體3S，2＇S，7″R，8″S-Isatindigotindoline A、3R，2＇R，7″S，8″R-Isatindigotindoline A、3S，2＇S，7″S，8″R-Isatindigotindoline B、3R,2＇R,7″R,8″SIsatindigotindoline B、3R，2＇S,3″S，1＇＇＇S-Isatindigotindoline C、3S，2＇R,3″R,1＇＇＇R-Isatindigotindoline C、3R,2＇S,2″Risatindigotindoline D、3S，2＇R，2″R-Isatindigotindoline D。Xi 等［12］從大青葉分離鑒定得到7 個新的鄰氨基苯甲酸衍生物，Isatiscaloids A、Isatiscaloids B、Isatiscaloids C、(+)-(2＇R)-isatiscaloids D、(-)-(2＇S)-isatiscaloids D、(-)-(2＇S)-isatiscaloids E、(+)-(2＇R)-isatiscaloids E?！吨胁菟帉W(xué)》中記載，大青葉中含有芥苷、新芥苷、菘藍苷［13］。鄭虎占等［14］在《中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用》中記載，大青葉中含有腺苷。劉瑞等［3］使用HPLC-MS2 鑒定出大青葉中含有胞苷、尿苷、鳥苷。

1.2 有機酸類

李薇等［2］從大青葉中分離鑒定得到煙酸和琥珀酸。阮金蘭等［4］從大青葉中首次分離得到焦谷氨酸。柳繼峰等［5］從大青葉中分離得到苯甲酸、鄰氨基苯甲酸。鄧湘昱等［7］從大青葉70%乙醇提取液中首次分離得到焦脫鎂葉綠酸a 甲酯、焦脫鎂葉綠酸a 乙酯。李雪虎等［15］從大青葉95%乙醇提取液中分離得到亞油酸-1-單甘油酯、水楊酸、丁香酸。姬志強等［8］從大青葉石油醚部位分離得到十八酸、亞油酸。鄭虎占等［14］從大青葉中分離得到棕櫚酸。李大偉等［9,16］從大青葉水提取物中分離得到3 個新化合物，2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)succinic acid、(E)-3-(4-(1-carboxy-2-hydroxyethoxy)-3,5-dimethoxyphenyl) acrylic acid、3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl) pentanedioic acid。

1.3 黃酮類

柳繼峰等［5］從大青葉中首次分離得到6-β-D-glucopyranosyldiosmetin。鄧湘昱等［7］從大青葉中首次分離得到異牡荊素-6＇-O-吡喃葡萄糖苷、異葒草苷、異葒草苷-3＇-O-吡喃葡萄糖苷、肥皂草苷。姬志強等［8］從大青葉中分離鑒定得到異牡荊素。

1.4 其他類

姬志強等［8］從大青葉中分離得到β-谷甾醇。柳繼鋒等［5］從大青葉中首次分離得到落葉松脂素、(+)-異落葉松樹脂醇。李雪虎等［15］首次從大青葉中分離鑒定得到香草醛。此外，大青葉中還含有萜類化合物。鄧湘昱等［7］從大青葉中首次分離得到單帖類化合物loliolide。李大偉等［9］從大青葉中首次分離得到4 個倍半萜類化合物5β,6α-dihydroxy-3β-(β-D-glucoyranosyloxy)-7-megastigmen-9-one、(6R,9S)-3-oxo-α-ionol-β-D-glucopyranoside、(6R,9R)-3-oxo-α-ionol-β-Dglucopyranoside、saussureoside B 和一個苷類化合物丁香苷。

2 大青葉藥理作用研究進展

2.1 抗菌作用

胡永金等［16］為研究大青葉提取物的抗菌效果，所采取的方式為濾紙片擴散法。實驗結(jié)果顯示，在含量約為百分之四到百分之七時，對金黃色葡萄球菌的抑制作用最大，其后分別為：沙門菌、李斯特菌、炭疽桿菌、豬糞鏈球菌、大腸桿菌。包俊［17］用經(jīng)改進的藥基法，測定了大青葉甲醇提取物的抗菌活性。結(jié)果顯示，大青葉對金黃色葡萄球菌的抑制作用較強，然后依次是腸炎沙門菌耐藥株＞大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)珠＞酵母菌耐藥株＞肺炎克雷伯菌耐藥株＞白念珠菌耐藥株，且革蘭陽性菌＞革蘭陰性菌。陳言峰、鄒記興［18］研究發(fā)現(xiàn)，大青葉提取液對遲緩愛德華氏菌有明顯的抑菌作用。劉富康等［19］通過分光光度法,檢測了大青葉醇提物中粗黃酮提取量的濃度，將其進行了抑菌圈實驗，結(jié)果表明大青葉的粗黃酮萃取率具有顯著抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和李斯特菌生長的效果。

2.2 抗病毒作用

許濤等［20］研究發(fā)現(xiàn)，4(3H)-喹唑酮通過阻止H1N1 型流感病毒的吸附、增殖而發(fā)揮作用。喻淑慶等［21］采用MTT 比色法，發(fā)現(xiàn)大青葉提取物可以抑制已經(jīng)進入細(xì)胞中的單純皰疹病毒Ⅱ型的復(fù)制和增殖。劉釗等［22］研究發(fā)現(xiàn)，大青葉單體能夠抑制呼吸道合胞病毒和柯薩奇病毒B3 在Hep-2 細(xì)胞中的增殖，但是沒有直接滅活作用，對病毒的吸附也不起作用。高博等［23］應(yīng)用CPE 法、MTT 法和實時熒光RT-PCR 法發(fā)現(xiàn)，大青葉水溶性提取物對登革熱病毒具有體外抑制作用，且其細(xì)胞毒性小，半數(shù)毒性濃度為 4.68 mg/mL。羅芬［24］發(fā)現(xiàn)大青葉水提物可能通過提高人體免疫力而達到抗甲型流感病毒的作用。

2.3 抗氧化

崔旭、李會端［25］研究表明，大青葉總黃酮對羥基自由基（·OH）有較強的清除率。

Yu 等［26］采用脫機DPPH 自由基清除法測定大青葉乙醇提取液的抗氧化活性，并采用PLS 模型簡單地探討其指紋圖譜效價關(guān)系。結(jié)果表明，大青葉乙醇提取液具有抗氧化活性。朱俊杰、徐靜［27］的實驗結(jié)果表明，大青葉不同功能部分均可提高HepG2 細(xì)胞的抗氧化能力,其中乙酸乙酸部位效果最大，對其他部分的抑制能力為水部位，醇提取物，正丁醇部位。閆俊等［28］采用鐵離子還原能力法（FRAP）測定大青葉中不同化學(xué)組成的抗氧化能力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以乙酸丙烯相的抗氧化活性為最高。

2.4 抗內(nèi)毒素

方建國等［29］對大青葉抗內(nèi)毒素活性部位進行篩選，發(fā)現(xiàn)正丁醇相的體內(nèi)外抗內(nèi)毒素活性均最強，體外實驗中其余部位抗內(nèi)毒素活性乙酸乙酯相＞氯仿相＞水相＞石油醚相，體內(nèi)實驗中水相＞乙酸乙酯相＞氯仿相＞石油醚相。黃繼全［30］對大青葉氯仿提取物進行體內(nèi)外抗內(nèi)毒素實驗，發(fā)現(xiàn)其可以抗大腸桿菌O111B4 內(nèi)毒素。

2.5 抗腫瘤

Nam 等［31］發(fā)現(xiàn)大青葉中的化學(xué)成分靛玉紅是慢性粒細(xì)胞白血病的有效治療藥物。夏小艷等［32］利用兩個模型（斑馬魚藥物篩選模型，雞胚絨毛尿囊膜模型）檢測靛玉紅的抑制血管生成作用。結(jié)果表明，靛玉紅具有顯著的抗血管生成活性。簡曉順等［33］采用血清藥理學(xué)方法，發(fā)現(xiàn)大青葉乙醇提取液能抑制腫瘤細(xì)胞株K562 和S180 的生長和增殖。

2.6 其他藥理作用

趙紅等［34］研究發(fā)現(xiàn)，大青葉的水煎液可以使小鼠的免疫功能上調(diào)，其機制可能是促進淋巴細(xì)胞IL-2 的分泌。Poudel 等［35］通過細(xì)胞實驗研究發(fā)現(xiàn)，異金雀花素可抑制脂肪生成轉(zhuǎn)錄因子，從而抑制脂肪細(xì)胞分化和脂肪代謝相關(guān)的基因的表達水平，這可能是通過上調(diào)insig-1 和2 來實現(xiàn)。

研究表明，大青葉醇沉物質(zhì)和總有機酸萃取物質(zhì)，都對由二甲苯類引起的老鼠耳腫有顯著的抑制作用，且對干酵母引起的高熱有顯著降溫效果。結(jié)果顯示，大青葉醇沉物和總有機酸提取液有解熱、抗炎效果［36-37］。

3 結(jié)語

大青葉作為一個具有確切療效的傳統(tǒng)中藥，近年來國內(nèi)外學(xué)者雖對大青葉的化學(xué)成分和藥理作用有所研究，但總體上研究較少。因此，需要繼續(xù)對其活性物質(zhì)進行研究，對化學(xué)成分與藥理作用之間的關(guān)系進行更深入系統(tǒng)的研究，明確其物效基礎(chǔ)。