曹建華，劉倩如，程明剛，蔡朝民，葉國強(qiáng)

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬深圳寶安醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518101)

近年來有關(guān)干、濕化學(xué)法測定生化項(xiàng)目結(jié)果比對的研究較多［1－3］，所采取的研究方法不一，部分研究存在相互沖突的結(jié)果。兩法檢驗(yàn)相同項(xiàng)目結(jié)果的偏倚是否會給臨床診斷、病情分析帶來誤導(dǎo)，臨床醫(yī)生和患者是否可以接受，值得研究。因較多研究［1－3］采用配對t檢驗(yàn)和相關(guān)性分析儀去判斷兩法測定結(jié)果的差異，而未對兩法測定結(jié)果的偏倚進(jìn)行臨床可接受性評價，為此我們回顧性分析了2006年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心干、濕化學(xué)室間質(zhì)評的回報結(jié)果并對其進(jìn)行比較和偏倚評估，報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料:我室2006年參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心干(Vitros 250生化分析儀)、濕(Olympus AU2700生化分析儀)化學(xué)室間質(zhì)評的回報結(jié)果。選取其中鉀(K+)、鈉(Na+)、氯(Cl－)、鈣(Ca2+)、血糖(Glu)、尿素氮(Bun)、肌酐(Cr)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和淀粉酶(AMY)的結(jié)果。

1.2 方法:①線性回歸方程:以濕化學(xué)回報結(jié)果的靶值作為比較方法(X)的實(shí)測值、干化學(xué)回報結(jié)果的靶值作為實(shí)驗(yàn)方法(Y)的實(shí)測值，計(jì)算兩法各項(xiàng)目測定結(jié)果的線性回歸方程(Y=bX+a)和相關(guān)系數(shù)(r);②臨床可接受性判斷:根據(jù)臨床使用要求，將各項(xiàng)目給定的醫(yī)學(xué)決定水平Xc代入各自的線性回歸方程，計(jì)算實(shí)驗(yàn)方法(Y)與對比方法(X)之間的預(yù)期偏倚(Bc):Bc=Yc－Xc，相對偏倚(SE%):SE%=|Yc－Xc|/Xc×100%。以CLIA'88的允許誤差為判斷依據(jù)，Bc或SE% ≤1/2 CLIA'88屬臨床可接受水平，即不同方法間的測定結(jié)果具有可比性。對臨床不可接受的項(xiàng)目采用兩法的線性回歸方程進(jìn)行校正，并對校正后的結(jié)果進(jìn)行臨床可接受性評價。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用Microsoft Office Excel軟件計(jì)算兩法的相關(guān)系數(shù)(r)、回歸方程、醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)處的偏倚。

2 結(jié)果

表1 兩法測定結(jié)果校正前后的相關(guān)性

表2 兩法校正前后的臨床可接受性評價

2.1 干、濕化學(xué)法測定結(jié)果校正前后的相關(guān)性:兩法的校正前結(jié)果，除Ca2+和CK外，其余項(xiàng)目線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù) r均 ＞0.975;因 r≥0.975，故可認(rèn)為濕化學(xué)法X的取值范圍合適，直線回歸方程計(jì)算的斜率b、截距a可靠(Ca2+和CK除外);依據(jù)兩法的線性回歸方程:Bun的校正方法是“實(shí)測值 +0.65mmol/L”，Cr、AST、LDH和AMY的校正方法是“實(shí)測值 ×校正系數(shù)”，干化學(xué)法5個項(xiàng)目校正后的結(jié)果與濕化學(xué)法的相關(guān)性良好(r均 ＞0.975)，見表1。

2.2 干、濕化學(xué)法測定結(jié)果校正前后的臨床可接受性評價:兩法校正前測定K+、Cl－、Ca2+、Glu的結(jié)果偏倚臨床可接受，Na+、Cr、AST、CK的結(jié)果偏倚部分臨床可接受，Bun、LDH和AMY的結(jié)果偏倚臨床完全不接受;5個項(xiàng)目 Bun、Cr、AST、LDH和 AMY校正后的結(jié)果偏倚，除了Cr低水平和AST高水平以外，其它的結(jié)果偏倚均臨床可以接受，而且校正后二者BUN、LDH、AMY的結(jié)果經(jīng)配對的t檢驗(yàn)差異無顯著性(P＞0.05)。結(jié)果見表2。

3 討論

隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，同一實(shí)驗(yàn)室對相同生化檢驗(yàn)項(xiàng)目可由不同或相同品牌的檢測系統(tǒng)來測定，各系統(tǒng)檢測同一患者樣本的結(jié)果是否一致、其差異是否在臨床可接收范圍內(nèi)，是值得研究的熱點(diǎn)。生化項(xiàng)目檢測臨床上最常用的是濕化學(xué)分析法，也有采用干化學(xué)分析方法，后者是近年出現(xiàn)的一種新的分析方法，有其自身的優(yōu)點(diǎn)，其獨(dú)特的多涂層膜技術(shù)，不僅能掩蓋待測物的有色物質(zhì)，并提供背景，選擇性地阻留或去除干擾物質(zhì)，而且還將等同于濕化學(xué)反應(yīng)原理的各種物理、化學(xué)反應(yīng)在各分層中進(jìn)行，使某一層產(chǎn)物又可進(jìn)入另一層中進(jìn)行反應(yīng)，從而引導(dǎo)反應(yīng)序列，其各層可以給出一種特定的環(huán)境用以控制反應(yīng)序列和反應(yīng)時間［4］;但是我們在實(shí)際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)Vitros 250干化學(xué)分析儀LDH檢測采用丙酮酸和NADH在LDH作用下生成乳酸和NAD+(LDH－P法)與Olympus AU2700濕生化分析儀采用乳酸和NAD+在LDH作用下生成丙酮酸和NADH(LDH－L法)相反，另外2儀器的電解質(zhì)分析方法雖然都采用離子選擇性電極法，但前者是直接法，后者是間接法，因此干、濕化學(xué)法分析原理和方法學(xué)有差異，有必要對二者測定結(jié)果進(jìn)行比對和偏倚分析，以保障二者結(jié)果的一致性。

本研究選取我室2006年參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心干、濕化學(xué)室間質(zhì)評的回報結(jié)果進(jìn)行兩法測定結(jié)果的可比性研究，是建立在已確定二者室間質(zhì)評的15份標(biāo)本完全相同的前提下以保證研究結(jié)果的可靠性(我室在測定二者各自的質(zhì)評標(biāo)本時，會在Olympus AU2700生化分析儀上進(jìn)行結(jié)果的比較，并發(fā)現(xiàn)15份標(biāo)本各項(xiàng)目的結(jié)果無差異，而且對我室兩儀器上報衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心的結(jié)果進(jìn)行比對時也得到與本文相似的結(jié)果)。我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):兩法校正前除Ca、CK外的其余項(xiàng)目線性關(guān)系良好(r均＞0.975)，兩法校正前測定K+、Cl－、Ca2+、Glu的結(jié)果偏倚臨床可接受，這與文獻(xiàn)報道一致［5］，與文獻(xiàn)［5］報道不同的是兩法Na+的高水平、CK的高水平和Bun測定結(jié)果不一致。干化學(xué)法5個項(xiàng)目Bun、Cr、AST、LDH和AMY校正后的結(jié)果與濕化學(xué)法的相關(guān)性良好(r均＞0.975)，且校正后的結(jié)果偏倚，除了Cr低水平和AST高水平以外，其它的結(jié)果偏倚均臨床可以接受，但是兩法Na+和CK的高水平、AST和Cr的低水平的結(jié)果偏倚無法通過校正消除，這也說明干、濕化學(xué)法因分析原理的不同、試劑的加入方式不同、所使用校準(zhǔn)品不統(tǒng)一等，部分項(xiàng)目結(jié)果很難達(dá)到一致。

總之，本研究參考美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)EP9－A文件［6］中的評判標(biāo)準(zhǔn)，雖未采用臨床新鮮標(biāo)本對兩方法進(jìn)行比對研究，但是研究結(jié)果仍有借鑒價值。由于干、濕化學(xué)法檢測某些生化項(xiàng)目的結(jié)果存在較大偏倚，雖然部分結(jié)果可以通過比對試驗(yàn)得到的回歸方程進(jìn)行校正，但是同一實(shí)驗(yàn)室同時應(yīng)用干、濕化學(xué)分析儀時，要保證二者結(jié)果的可比性，必須進(jìn)行結(jié)果比對和校正。

［1］信朝霞，李君.奧林巴斯AU5400和強(qiáng)生Vitros 511FS生化分析儀檢測結(jié)果可比性分析［J］.河北北方醫(yī)學(xué)院學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2009，26(5):30－34.

［2］鮑瀛，段櫻，譚兵，等.干化學(xué)法與濕化學(xué)法測定結(jié)果的比較［J］.哈爾濱醫(yī)藥，2008，28(5):6－7.

［3］楊萍.干、濕化學(xué)檢測部分生化項(xiàng)目結(jié)果比較［J］.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2006，31(1):83－84.

［4］Curme H，Rand RN.Early history of eastman kodak ektachem slides and instrumentation［J］.Clin Chem，1997，43(9):1647－1652.

［5］楊天平.常規(guī)急診項(xiàng)目的干化、濕化測定結(jié)果分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2009，24(1):79－80.

［6］The National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples［M］.Approved Guideline，Second Edition，2002.EP9－A2.