許艷茹

血液細(xì)菌培養(yǎng)是對菌血癥和敗血癥診斷和治療的依據(jù)，為了解我院住院兒童使用雙相血培養(yǎng)瓶做血培養(yǎng)的結(jié)果及病原菌種類，對我院2008年8月至2010年2月330例臨床疑似菌血癥和敗血癥的住院患兒采用法國生物-梅里埃公司生產(chǎn)的需氧雙相血培養(yǎng)瓶進(jìn)行血液培養(yǎng)。結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 330例血培養(yǎng)標(biāo)本均來自本院住院患兒，其中150例患者在不同時間內(nèi)取靜脈血2次，180例患者取一次靜脈血。

1.2 儀器與材料 雙相血培養(yǎng)瓶、ATB Expression自動細(xì)菌鑒定儀及細(xì)菌鑒定和藥敏卡條均為法國-梅里埃公司生產(chǎn);分離用培養(yǎng)基為鄭州貝瑞特公司生產(chǎn);腸道菌因子血清、沙門菌屬和志賀菌屬多價及單價血清購自衛(wèi)生部蘭州生物品研究所。

1.3 質(zhì)量控制菌株 大腸埃希菌ATCC25922，金黃色葡萄球菌ATCC25923，銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.4 方法 無菌手續(xù)取靜脈血5 ml注入雙相血培養(yǎng)瓶，搖勻、35℃每隔24 h觀察肉湯中和瓊脂上有無細(xì)菌生長。對有細(xì)菌生長者，均采用法國生物-梅里埃公司生產(chǎn)的ATB Expression系統(tǒng)進(jìn)行鑒定及藥敏試驗(yàn)。觀察7 d無細(xì)菌生長則報告陰性。

2 結(jié)果

2.1 330例患兒中共分離出細(xì)菌40株，總陽性率12.12%，其中革蘭陽性菌27例占67.5%，革蘭陰性菌13例占32.5%，各病原菌種類分離率見表1。

表1 40株病原菌各菌種的分離率(%)

2.2 兩次血培養(yǎng)的150例患兒中有22例有細(xì)菌生長，占14.67%，其中兩瓶均有細(xì)菌生長的20例，一瓶有細(xì)菌生長的2例，做一次血培養(yǎng)的180例患兒中有細(xì)菌生長者18例，占10.0%。

3 討論

330例患兒中分離出40株致病菌，陽性分離率12.12%，其中葡萄球菌屬比例最高，占所分離病原菌的55.0%，占革蘭陽性菌的81.5%，以金黃色葡萄球菌22.5%，表皮葡萄球菌20.0%為主;陰性菌以大腸埃希菌17.5%為主。不同地區(qū)病原種類略有差異，我院住院兒童血液感染主要以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希菌為主，這可能與我院病原種類有關(guān)，這些血培養(yǎng)標(biāo)本主要來自有臍炎、膿皰疹、燒傷等皮膚感染發(fā)熱引起的菌血癥、敗血癥患兒。革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌占總分離菌的比率與有關(guān)報道［1］大致相同。

150例做兩次血培養(yǎng)的患者中有22例細(xì)菌生長，其中兩瓶均生長的20例，一瓶生長的2例;另外兩次抽血比一次培養(yǎng)陽性率高4.67%。可見血培養(yǎng)1次抽血易漏檢。在檢出細(xì)菌的40例患兒中，有2例為復(fù)數(shù)菌感染(大腸埃希菌和表皮葡萄球菌)其中1例兩次抽血均為復(fù)數(shù)菌，1例第二次抽血時為大腸埃希菌，故血培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)兩種或兩種以上細(xì)菌時，兩次抽血可證實(shí)是致病菌或污染菌。

菌血癥患者中有5% ～10%［2］是多菌性菌血癥，進(jìn)行次代培養(yǎng)，應(yīng)提供適用于腸道的、非發(fā)酵菌、需氧性、厭氧性和苛氧性細(xì)菌生長的培養(yǎng)基，以及其培養(yǎng)條件，以免遺漏。我們用雙相血培養(yǎng)瓶做了330例血液需氧菌培養(yǎng)，但不能排除厭氧菌感染的可能。為提高檢出率，建議有條件時應(yīng)同時做需氧及厭氧兩種血培養(yǎng)。

［1］許淑珍，張淑蘭，陳力.Bactec 9120血培養(yǎng)系統(tǒng)檢測細(xì)菌影響因素的探討.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1997，20:272-274.

［2］葉應(yīng)嫵，王毓三，主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社，2006:741.