余良芳

(三峽大學第一臨床醫(yī)學院、宜昌市中心人民醫(yī)院檢驗科,湖北宜昌443003)

血尿的鑒別在臨床上具有十分重要的意義,血尿來源不同,治療原則亦不同[1,2]。腎小球性與非腎小球性血尿鑒別除常規(guī)的病史、免疫學、影像學及腎穿刺活檢外,尿紅細胞的檢測是最簡單易行的有效方法。目前,實驗室尿紅細胞主要通過光學顯微鏡、尿液流式細胞儀進行檢測,用UF-100尿沉渣儀與相差顯微鏡對190例血尿標本進行了檢測比較。

1 材料和方法

1.1 標本來源 來自本院腎病內(nèi)科及泌尿外科住院患者190例,均有鏡檢血尿或肉眼血尿,男性85例,女性105例,年齡 43.8±20.7歲,根據(jù)病史、影像學及腎活檢檢查將患者分為腎小球疾病88例(36例為系膜增殖性腎小球腎炎,12例為紫癜性腎小球腎炎,10例為局灶節(jié)段硬化性腎小球腎,9例為新月牙腎小球腎炎,8例為IgA腎病,8例為狼瘡性腎炎,5例為膜性腎小球腎炎);非腎小球疾病102例(泌尿系結(jié)石34例,腎盂腎炎20例,尿道炎16例,前列腺增生14例,膀胱炎10例,膀胱癌8例)。

1.2 儀器和試劑 SYSMEXUF-100尿沉渣儀及OLYMPUS相差顯微鏡

1.3 方法

1.3.1 UF-100尿液沉渣分析儀檢查 取住院病人新鮮中段尿液10ml于專用測定管內(nèi),按儀器操作程序進行測定,在測定前使用專用質(zhì)控液檢測儀器狀態(tài)為在控。

1.3.2 相差顯微鏡檢查 標本做UF-100尿液沉渣檢查時,取尿10ml離心,棄去上清液,留 0.5ml混勻直接涂片,檢查10個視野,100個紅細胞,觀察紅細胞的形態(tài)。

1.3.3 血尿來源判定標準 UF-100尿液沉渣分析儀為儀器自動提示;相差顯微鏡判定標準為多形紅細胞＞80%即為腎小球性血尿,多形紅細胞＜20%為非腎小球性血尿,多形紅細胞占紅細胞總數(shù)20%以上但小于80%為混和性血尿[3]。

1.4 統(tǒng)計分析 實驗數(shù)據(jù)用x—±s表示,組間均數(shù)比較采用t檢驗,UF-100尿液沉渣分析儀與相差顯微鏡檢查兩種方法之間敏感性與特異性的比較采用卡方檢驗,P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。所有數(shù)據(jù)的錄入及統(tǒng)計分析均采用統(tǒng)計軟件SPSS10.0進行。

2 結(jié)果

2.1 腎小球性血尿的RBC-MFsc、RBC-P70-Fsc均值分別為59.6±11.67ch、67.49±13.71ch,均明顯低于非腎小球性血尿的119.69±18.49ch、131.00±18.03ch,反映了前者尿液紅細胞的整體體積比后者明顯為小,而腎小球性血尿的RBC-Fsc-DW均值為39.65±10.98,卻明顯高于非腎小球性血尿的20.14±11.55,表明前者尿液紅細胞形態(tài)大小存在著明顯差異見表1。

表1 UF-100尿沉渣儀二組紅細胞參數(shù)檢測結(jié)果比較(x—±s,ch)

2.2 在鑒別血尿來源方面,UF-100檢測的敏感性(94.3%),高于相差顯微鏡(90.9%);而相差顯微鏡的特異性(84.3%),高于UF-100(79.4%),見表2。二種方法對血尿來源檢測的敏感性和特異性均無顯著性差異(P＞0.05)。

表2 UF-100提示紅細胞信息與相差顯微鏡檢測結(jié)果比較

2.3 腎小球源性血尿標本紅細胞前向散射光強度直方圖表現(xiàn)為曲線呈不規(guī)則或不對稱分布,曲線多為鋸齒狀,峰位于100 ch左側(cè),最高峰常在70 ch處,非腎小球源性血尿紅細胞前向散射光強度直方圖曲線兩側(cè)基本對稱且較規(guī)則,曲線多為單峰位于100 ch右側(cè),最高峰常在110 ch處,混合性血尿標本紅細胞前向散射光強度直方圖曲線呈鋸齒狀、多波峰,常位于50-120 ch之間。

3 討論

歐洲臨床實驗室委員會尿液分析組(ECLM)建議用活體染色或相差顯微鏡檢查[4],相差顯微鏡是利用光的衍射和干涉現(xiàn)象照射標本,產(chǎn)生明暗不同的反差識別,有助于增強透明與半透明的有形成分的輪廓,尤其是不典型紅細胞的識別,因此在區(qū)分血尿來源時,常用相差顯微鏡觀察紅細胞形態(tài)。UF-100尿沉渣分析儀應用氬激光流式細胞和電阻抗分析的原理,尿液中紅細胞等有形成份經(jīng)過熒光素染色后,在鞘流液的作用下形成單個縱列細胞流通過氬激光檢測區(qū),產(chǎn)生散射光、熒光和電阻抗改變,然后轉(zhuǎn)化為一系列信號,通過對信號進行分析得出多項紅細胞檢測參數(shù),并將紅細胞粒子分布繪制成直方圖并提示紅細胞形態(tài)信息:均一性、非均一性或混合性。其顯示的紅細胞前向散射光強度直方圖直觀,可根據(jù)曲線波峰的位相判斷尿液紅細胞形態(tài)大小,初步鑒別腎小球性血尿或非腎小球性血尿。

本組資料表明,UF-100沉渣儀紅細胞提示信息為非均一性或混合性診斷腎小球性血尿敏感性為略高于相差顯微鏡,表明尿沉渣分析儀對判斷腎小球來源血尿具有較高的敏感性和臨床符合率;而以儀器紅細胞提示信息為均一性以排除腎小球血尿的特異性較相差顯微鏡檢查方法略低,但二者無顯著統(tǒng)計學差異,說明尿沉渣分析儀在臨床上可作為血尿來源的過篩檢測。實驗發(fā)現(xiàn),當血尿標本中出現(xiàn)草酸鈣、尿酸結(jié)晶和真菌時,UF-100易將這些熒光強度和散射光低、體積與紅細胞大小差不多的有形成份錯判為紅細胞,提示為混合性血尿,而相差顯微鏡很易區(qū)分;本組資料中有3例狼瘡性腎炎患者UF-100提示為混合性血尿,可能因為狼瘡性腎炎多伴有腎小管間質(zhì)損傷,尿紅細胞也表現(xiàn)為混合性,與有關(guān)文獻報告一致[5]。

用UF-100尿沉渣分析儀鑒別血尿來源,方法簡便、快速,不受主觀因素干擾,結(jié)果敏感性高,是一種有價值的過篩試驗,但由于尿液有形成份復雜且不穩(wěn)定,又受到儀器檢測方法學的局限,相差顯微鏡仍需作為必不可少的確認手段,在血尿來源的篩選與鑒別上二者應互相結(jié)合補充。

[1]孫雪峰,葉任高.尿紅細胞形態(tài)及其臨床意義[J].中國實用內(nèi)科雜志,2002,22(1):19.

[2]陳巧林,顧可梁,胡嘉波.用尿紅細胞前向散射光(FSC)綜合指標鑒別血尿來源[J].微循環(huán)學雜志,2002,12(3):52.

[3]鄭善鑾,鐘麗輝,楊麥貴,等.UF2100尿沉渣分析儀鑒別血尿來源[J].檢驗醫(yī)學,2004,19(4):285.

[4]KouriTT,Gant VA,FogazziGB.Towards European urinalysis guidelines:Introduction of a project under European Confederation of Laboratory Medicine[J].lin Chim Acta,2000,297(1-2):305.

[5]婁永新,李志碧.尿中紅細胞形態(tài)診斷腎內(nèi)外血尿及其進展[J].臨床檢驗雜志,1998,16(6)∶376.