葉丙霖,鄭 烈,王想福
(1.甘肅省中醫(yī)藥研究院,甘肅 蘭州 730050;2.甘肅省中醫(yī)院,甘肅 蘭州 730050)
關(guān)節(jié)炎丸對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量的影響
葉丙霖1,鄭 烈2,王想福2
(1.甘肅省中醫(yī)藥研究院,甘肅 蘭州 730050;2.甘肅省中醫(yī)院,甘肅 蘭州 730050)
目的 探討關(guān)節(jié)炎丸對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量的影響。方法 建立類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠模型,用放射免疫法檢測大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α的含量。結(jié)果 與空白組比較,模型組各指標(biāo)含量均增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,關(guān)節(jié)炎丸大、小劑量組及雷公藤陽性對(duì)照組各指標(biāo)含量均有不同程度下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與雷公藤陽性對(duì)照組比較,關(guān)節(jié)炎丸大、小劑量組各指標(biāo)含量下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論關(guān)節(jié)炎丸能控制類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α等炎性細(xì)胞因子的活性,對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有很好的治療作用。
關(guān)節(jié)炎丸;類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎;血清含量
類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種以關(guān)節(jié)滑膜慢性炎癥病變?yōu)橹饕卣鞯娜硇宰陨砻庖咝约膊?,其臨床表現(xiàn)為對(duì)稱性、慢性、進(jìn)行性多關(guān)節(jié)炎并伴有全身多系統(tǒng)受累。屬祖國醫(yī)學(xué)痹癥之“頑痹”“白虎歷節(jié)”“骨痹”“歷節(jié)風(fēng)”等范疇?!秲?nèi)經(jīng)》云:“粗理而肉不堅(jiān)者,善病痹”;“風(fēng)寒濕三氣雜至,合而為痹”,指出痹證的發(fā)生與人體正氣虧虛、外感風(fēng)寒濕邪有關(guān)。歷代醫(yī)家認(rèn)為正氣虧虛與肝、脾、腎虧虛有密切的關(guān)系。因此,筆者在諸醫(yī)家治療的基礎(chǔ)上,結(jié)合現(xiàn)代中藥藥理學(xué)研究成果及臨床實(shí)踐,用關(guān)節(jié)炎丸來治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎獲得良好療效。為進(jìn)一步探討關(guān)節(jié)炎丸治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)理,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),我們進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),現(xiàn)報(bào)告如下。
成年 SPF 級(jí) Wistar大鼠 50只,雌雄各半,體重(200±20)g。購于甘肅中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心 [實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證編號(hào):SCXK(H)2004-0006-0000005],動(dòng)物飼料由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供。
關(guān)節(jié)炎丸由制附片、制川烏、細(xì)辛、白芍、桂枝、黃芪、甘草等藥物組成。為棕褐色顆粒,由甘肅中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院制劑室提供。雷公藤多甙片(湖南協(xié)力藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號(hào):Z43020138)。弗氏完全佐劑由美國Sigma公司生產(chǎn)。IL-1、IL-6試劑盒由北京華英生物技術(shù)研究所提供。TNF-α試劑盒由北京科美東雅生物技術(shù)有限公司提供。
除正常組大鼠外,其余組大鼠用75%酒精對(duì)其右后跖進(jìn)行消毒后,將弗氏完全佐劑(0.1毫升/只)注射于足跖皮下。
將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為5組,每組10只,雌雄各半。即空白組、模型組、雷公藤陽性對(duì)照組、關(guān)節(jié)炎丸小劑量組、關(guān)節(jié)炎丸大劑量組。
根據(jù)人和動(dòng)物間體表面積的換算方法,取關(guān)節(jié)炎丸濃煎液,按生藥量計(jì)算為7.2g/ml,每天關(guān)節(jié)炎丸大劑量組每只給予3ml,關(guān)節(jié)炎丸小劑量組每只給予1.5ml,空白組和模型組每只給予等量生理鹽水,雷公藤陽性對(duì)照組每只給予6.3mg/kg。給藥至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
根據(jù)試劑盒說明用放射免疫法檢測大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量。
表1 各組大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α 含量比較(±s)
表1 各組大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α 含量比較(±s)
注:與空白組比較,※P<0.01;與模型組比較,△P<0.05;與雷公藤陽性對(duì)照組比較,aP<0.05
組別 n空白組模型組雷公藤陽性對(duì)照組關(guān)節(jié)炎丸小劑量組關(guān)節(jié)炎丸大劑量組IL-1(ng/ml) IL-6(pg/ml) TNF-α(ng/ml)10101010 100.031±0.0110.074±0.014※0.039±0.013△0.038±0.012△a0.035±0.011△a50.230±9.62369.297±9.149※59.218±11.077△51.706±5.859△a51.282±5.066△a0.706±0.1421.056±0.191※0.786±0.131△0.767±0.166△a0.720±0.128△a
與空白組比較,模型組各指標(biāo)含量均增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與模型組比較,關(guān)節(jié)炎丸大劑量組、小劑量組(P<0.05)及雷公藤陽性對(duì)照組各指標(biāo)含量均有不同程度下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與雷公藤對(duì)照組比較,關(guān)節(jié)炎丸大劑量組、小劑量組各指標(biāo)含量下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
細(xì)胞因子在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中發(fā)揮著重要作用。目前認(rèn)為IL-1、IL-6是參與進(jìn)展期關(guān)節(jié)破壞的典型炎性細(xì)胞因子,而TNF-α在炎癥反應(yīng)過程中具有關(guān)鍵作用。本研究通過雷公藤陽性對(duì)照組及關(guān)節(jié)炎丸大、小劑量組對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠治療前后的細(xì)胞因子進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)模型組大鼠血清炎性細(xì)胞因子IL-1、IL-6和TNF-α含量明顯高于空白組(P<0.01),用關(guān)節(jié)炎丸治療后血清炎性細(xì)胞因子水平低于模型組,說明中藥關(guān)節(jié)炎丸大、小劑量均具有降低大鼠血清炎性細(xì)胞因子的作用,與雷公藤陽性對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由此說明關(guān)節(jié)炎丸對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療作用可能是通過降低炎性細(xì)胞因子,從而消除滑膜細(xì)胞炎癥而實(shí)現(xiàn)的。俞小芬等[1]研究表明,關(guān)節(jié)炎丸可通過抑制細(xì)胞因子的釋放,從而改善關(guān)節(jié)紅腫、疼痛癥狀。
現(xiàn)代藥理學(xué)研究證實(shí),制附片具有促進(jìn)吞噬細(xì)胞的吞噬功能和抗炎作用,附子抗炎作用與興奮腎上腺皮質(zhì)功能有關(guān)。鹿角霜有直接抗炎鎮(zhèn)痛的作用,與興奮腎上腺皮質(zhì)功能有關(guān)[2]。防風(fēng)有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎作用,并對(duì)大鼠類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有一定的抑制作用。桂枝具有解熱、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗過敏、抗炎作用。黨參對(duì)損傷具有一定的保護(hù)作用。血管內(nèi)皮生長因子及IL-6、成纖維細(xì)胞生長因子和TNF-α等炎性細(xì)胞因子均被證明能刺激和參與血管新生過程,而川芎能夠改善微循環(huán),使血流速度加快,流態(tài)改善,毛細(xì)血管內(nèi)或小靜脈內(nèi)血栓溶解,毛細(xì)血管網(wǎng)開放數(shù)增加[3]。黃芪皂甙能抑制血小板聚集而發(fā)揮抗血栓形成、延長動(dòng)脈血栓形成時(shí)間的作用[4]。該方諸藥合用聯(lián)合治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,其抗炎鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞和改善微循環(huán)等作用,對(duì)修復(fù)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者已被侵襲和破壞的關(guān)節(jié)軟骨和骨質(zhì),改善關(guān)節(jié)功能,阻止骨質(zhì)破壞有非常重要的意義,從而達(dá)到緩解癥狀、防止病情進(jìn)展的目的。
[1]俞小芬,薛盟舉,鄭烈.關(guān)節(jié)炎丸對(duì)大鼠類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].世界中醫(yī)藥,2008,3(2):113.
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[3]張義洪.RΑ發(fā)病機(jī)制及其治療方法研究進(jìn)展[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2005,21:88.
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R285.5
B
1671-1246(2010)13-0084-02