黃克江，楊立偉

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150001)

生肌膏由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院制劑室制備，應(yīng)用于臨床數(shù)十年，主要成分為當(dāng)歸、紫草、白芷、輕粉、血竭、松香、甘草、川大黃等，具有清熱解毒、生肌斂瘡之功效，應(yīng)用于臨床外科疾病的潰瘍收口期、創(chuàng)面愈合期，療效顯著。本實(shí)驗(yàn)對(duì)生肌膏的生肌、抗炎、鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究，為使之成為理想的創(chuàng)面用藥提供依據(jù)，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥物 生肌膏(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院制劑室制備并提供);馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏(武漢馬應(yīng)龍藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批號(hào):060305);白凡士林(哈爾濱青云石化有限公司生產(chǎn)，哈爾濱天鵝藥業(yè)有限公司分裝，原批號(hào):20060704，分裝批號(hào):20060340);二甲苯(GP，大慶有機(jī)合成化工廠，批號(hào):040518)。

1.2 儀器 電熱恒溫水浴箱(上?？档厢t(yī)療器械廠);梅特勒AL-204電子天平(梅特勒托利多(上海)儀器有限公司);美國斯密爾系統(tǒng)(Semile ASP200脫水機(jī)、Semile RM3255切片機(jī)、Semile HI1210攤片機(jī)、Semile HI1220烤片機(jī)、Semile ST5020染色機(jī)、Semile CV5030蓋片機(jī)、Semile DM60000B顯微鏡，Nussloch Comble公司生產(chǎn))。

1.3 動(dòng)物 昆明種小鼠、SD大鼠(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào):SCXH(黑)2006-0006);鼠用全價(jià)飼料(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào):SCXH(黑)2006-0008);黑龍江省藥物研究所動(dòng)物使用許可證號(hào):SCXH(黑)2006-0002。

2 方法

2.1 大鼠塑料環(huán)肉芽腫實(shí)驗(yàn)［1，2］取SD大鼠30只，隨機(jī)分為3組:空白對(duì)照組(空白組)、馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏組和生肌膏組(陽性藥組)各10只。麻醉、備皮、消毒，將聚乙烯塑料環(huán)埋入大鼠背部皮下，縫合。術(shù)后第2天分組給藥，每天向各組大鼠塑料環(huán)涂相應(yīng)藥物1次，10天后斷頭處死大鼠，取下塑料環(huán)，剝離肉芽組織，用電子天平稱重。之后將肉芽組織作病理組織學(xué)檢查，常規(guī)HE染色，觀察毛細(xì)血管數(shù)、纖維結(jié)締組織增生情況。

2.2 小鼠鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)(熱板法)［3］實(shí)驗(yàn)前對(duì)雌性小鼠進(jìn)行篩選，取合格小鼠26只，隨機(jī)分為3組:空白對(duì)照組和馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏組各8只，生肌膏組10只。各組均在給藥前痛閾值測(cè)完后左右后肢均涂敷給藥2次，間隔20min，末次給藥20、40、60min后分別測(cè)小鼠痛閾值1次。

2.3 小鼠耳廓急性炎癥實(shí)驗(yàn)(二甲苯致小鼠耳廓腫脹法)［1］取體重18～23g雄性小鼠30只，隨機(jī)分為3組:空白對(duì)照組、馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏組和生肌膏組各10只，連續(xù)鼠耳兩面涂藥，給藥3天。第3天給藥后30min，以二甲苯0.05mL涂于小鼠右耳兩面致炎，30min后再次給藥，30min后將小鼠脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，再用打孔器打耳片，電子天平稱重。以每鼠右耳片重量減去左耳片重量為腫脹程度，計(jì)算腫脹抑制率。

3 結(jié)果

3.1 生肌膏的生肌作用 見表1～2。

表1 生肌膏對(duì)大鼠塑料環(huán)肉芽腫的影響

表2 各組肉芽組織毛細(xì)血管和成纖維細(xì)胞數(shù)的比較(±s)

表2 各組肉芽組織毛細(xì)血管和成纖維細(xì)胞數(shù)的比較(±s)

注:與空白組比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01，***P ＜0.001。

5 3.4±0.55 7.6±1.81陽性組 5 6.6±1.52** 23.2±2.17***生肌膏組 5 7.6±2.88* 25.4±5.81毛細(xì)血管 成纖維細(xì)胞空白組組別 視野數(shù)(n)***

3.2 生肌膏的鎮(zhèn)痛作用 見表3。

表3 生肌膏對(duì)小鼠痛閾值的影響(±s)

表3 生肌膏對(duì)小鼠痛閾值的影響(±s)

注:與自身給藥前比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01，***P ＜0.001。

組別 n給藥前痛閾值(s)給藥后痛閾值20min 40min 60min空白組8 22.6±3.2 17.0±5.1 21.3±5.9 26.1±4.5陽性組 8 23.8±4.5 28.0±9.2* 40.1±12.5** 37.6±13.2*生肌膏組 10 25.4±5.4 24.8±13.6 35.2±8.4***34.7±12.9

3.3 生肌膏的抗炎作用 見表4。

表4 生肌膏對(duì)小鼠二甲苯耳廓腫脹的影響(±s，mg)

表4 生肌膏對(duì)小鼠二甲苯耳廓腫脹的影響(±s，mg)

組別 動(dòng)物數(shù)(n) 腫脹度 腫脹抑制率(%)空白組10 20.0±1.5-陽性藥組 10 15.1±5.3 24.5生肌膏組10 17.4±3.1 13.0

4 討論

本實(shí)驗(yàn)研究證明，生肌膏能顯著促進(jìn)肉芽組織增生，肉芽病理組織學(xué)檢查也證實(shí)該藥能顯著增加視野內(nèi)毛細(xì)血管和成纖維細(xì)胞數(shù);成纖維細(xì)胞主要功能是合成膠原，膠原是創(chuàng)口愈合過程中細(xì)胞外的最主要基質(zhì)，并能增加纖維結(jié)締組織增生，從而有利于創(chuàng)傷和潰瘍的修復(fù)。生肌膏能顯著提高小鼠熱板法痛閾值，抑制小鼠二甲苯致耳廓腫脹。實(shí)驗(yàn)研究表明，生肌膏在生肌、抗炎、鎮(zhèn)痛方面具有顯著性作用，佐證了生肌膏的臨床療效，且為臨床應(yīng)用提供了必要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

［1］ 陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1994:377，367.

［2］ 張亞西，曾亞男.單氏丁桂散促進(jìn)創(chuàng)瘍愈合的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2002，8(6):431.

［3］ 文莉，舒成仁.寧血消痔栓鎮(zhèn)痛作用的研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2005，16(1):4.