鄧懷峰，郭仁貴，何章勇

（湖南省郴州市第一人民醫(yī)院，湖南郴州 423000）

微柱凝膠技術(shù)在產(chǎn)前檢查中的應(yīng)用體會

鄧懷峰，郭仁貴，何章勇

（湖南省郴州市第一人民醫(yī)院，湖南郴州 423000）

目的：探討微柱凝膠技術(shù)在產(chǎn)前檢查中診斷和預(yù)防新生兒溶血病臨床應(yīng)用價值。方法：本院于2008年6月～2009年12月對180例門診和住院O型待產(chǎn)孕婦采取微柱凝膠法檢測血型抗體IgG。并觀察其檢測結(jié)果。結(jié)果：180例受檢孕婦中，抗A抗體效價正常者59例（32.8%），抗B抗體效價正常者68例（37.8%），兩者合計為127例，占70.6%；抗A抗體效價≥64者32例（17.8%），抗B抗體效價≥64者21例（11.7%），兩者合計為53例，占29.4%。結(jié)論：微柱凝膠法檢測靈敏度高，對檢驗(yàn)孕婦產(chǎn)前IgG抗體效價具有較高的臨床應(yīng)用價值，值得臨床推廣。

微柱凝膠；產(chǎn)前檢查；新生兒溶血病

本院于2008年6月～2009年12月對180例門診和住院O型待產(chǎn)孕婦采取微柱凝膠法檢測血型抗體IgG。并觀察其檢測結(jié)果，報道如下：

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

2008年6 月～2009年12月在本院門診做產(chǎn)前檢查或住院待產(chǎn)的O型孕婦（丈夫是非O型)，共180例。

1.2 儀器與試劑

儀器采用瑞士達(dá)亞美微柱凝膠檢測系統(tǒng)（包括定速離心機(jī)、判讀儀、恒溫孵育器、Coombs卡等），37℃水浴箱。試劑采用5%標(biāo)準(zhǔn)A、B型紅細(xì)胞懸液、0.2 mol/L 2-巰基乙醇（2-Me）（由長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供）。

1.3 檢測方法

取待檢孕婦血清和同體積的0.2 mol/L 2-巰基乙醇混勻后，置37℃水浴箱孵育30 min，將血清中免疫球蛋白(IgM)破壞。 用卡標(biāo)記好稀釋的位數(shù)，在試管中按 1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512 倍比稀釋經(jīng) 2-巰基乙醇處理好的孕婦血清,依次將倍比稀釋血清50 μl分別加入標(biāo)記卡中；在所有孔中加入50 μl 5%A型或B型紅細(xì)胞懸液（與丈夫血型相同的紅細(xì)胞懸液）。置37℃水浴箱孵育15 min，用離心機(jī)離心900 r/min 2 min。

2 結(jié)果

結(jié)果判定，以反應(yīng)程度達(dá)到1+的最大稀釋倍數(shù)定為某抗體的效價值?？贵w效價值≥64者為異常。180例受檢孕婦中，抗A抗體效價正常者59例（32.8%），抗B抗體效價正常者68例（37.8%），兩者合計為127例，占70.6%；抗A抗體效價≥64者32例（17.8%），抗B抗體效價≥64者21例（11.7%），兩者合計為53例，占29.4%。見表1。

表1 180例孕婦血清抗體效價測定結(jié)果（n）

3 討論

新生兒溶血病(HDN)是新生兒期常見疾病之一，嚴(yán)重時可導(dǎo)致死胎，新生兒重度貧血、黃疸甚至死亡[1]。ABO系統(tǒng)引起的HDN是由于母親體內(nèi)存在著與胎兒不相配合的IgG性質(zhì)血型抗體引起的。其中母親是O型，胎兒為A型或B型是引起HDN的最主要原因。隨著孕婦血清IgG抗A（B）抗體效價的增高，HDN發(fā)生率也隨著增加。產(chǎn)前血清學(xué)檢查結(jié)果以抗體效價64為臨界值，當(dāng)母親血清中抗體效價≥64時，胎兒及嬰兒有受害的機(jī)會；當(dāng)效價≥128時，新生兒很可能受害，當(dāng)抗體效價≥512時，幾乎100%受害，必須進(jìn)行預(yù)防性治療[2]，可考慮應(yīng)用血漿置換降低抗體水平[3-4]。

因此，應(yīng)用科學(xué)的方法，準(zhǔn)確測定孕婦血清IgG抗A（B）抗體效價，可為產(chǎn)前診斷和預(yù)防ABO-HDN提供依據(jù)，是預(yù)防HDN的重要措施。微柱凝膠技術(shù)（microcolumn gel Immunoassay，MGI）是建立在傳統(tǒng)血型血清學(xué)基礎(chǔ)上的一項(xiàng)免疫學(xué)檢測技術(shù)，其設(shè)計理論先進(jìn)，操作簡單迅速，靈敏度高[5-6]，結(jié)果準(zhǔn)確直觀，具有很好的臨床檢測效果，可檢測到微弱的滴度變化，其靈敏度高于試管法，它對臨床某種疾病或臨床異常情況的診斷、病程監(jiān)測、療效評估、疾病預(yù)后判斷的能力較強(qiáng)，能夠更好地提示臨床醫(yī)生做好預(yù)防工作，對預(yù)防新生兒溶血病有很好的指導(dǎo)作用。此外，微柱凝膠實(shí)驗(yàn)的密度梯度液層可洗滌紅細(xì)胞，防止雜蛋白混入，易于暴露出靶抗原，微小的玻璃層使凝集的紅細(xì)胞更加便于判斷[7-8]。同時，微柱凝膠法與傳統(tǒng)試管法相比，具有操作簡便、敏感、易于標(biāo)準(zhǔn)化、影響因素少、重復(fù)性好、結(jié)果可保存等優(yōu)點(diǎn)，適用于大批量標(biāo)本的檢測。

綜上所述，應(yīng)用微柱凝膠技術(shù)測定孕婦血清IgG，抗體效價，具有靈敏度高、重復(fù)性好、實(shí)驗(yàn)結(jié)果能長期保持、隨時可復(fù)查等優(yōu)點(diǎn)，能夠使實(shí)驗(yàn)方法簡單化，操作標(biāo)準(zhǔn)化，用于常規(guī)性產(chǎn)前檢測，值得推廣應(yīng)用。

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