林 麗 李 碩 晉 玲 杜 弢 尤淑霞 高素芳
甘肅中醫(yī)學(xué)院,甘肅 蘭州 730000
線葉龍膽Gentiana farreri Balf.f.為龍膽科龍膽屬植物,以全草入藥,稱高山龍膽。性味苦寒,入肝膽經(jīng),具有清熱燥濕,清火定驚之功,用于濕熱黃疸、喉痛、眼睛赤目,陰囊腫痛,膽囊炎等證。目前商品流通均為野生品,無栽培品種。市場上多以三江源土特產(chǎn)銷售,商品名:玉美人。廣泛分布于青甘藏高原,生于高山草甸、山谷草灘,海拔3050-4800米。主要產(chǎn)于青海玉樹、剛察、瑪多、瑪沁、澤庫、河南、湟源、互助、祁連、門源;四川阿壩;西藏靈芝、類烏齊縣、八宿、當(dāng)雄;甘肅夏河、甘南、瑪曲、馬銜山等地,在甘南當(dāng)?shù)厝藗兎Q其為龍膽草,喇叭花。目前,對該藥的生藥學(xué)研究較少,為了對龍膽科植物進一步開發(fā)利用,本文對線葉龍膽的莖、葉、花從性狀特征、顯微特征和理化鑒定方面進行了研究,為線葉龍膽的生藥鑒別與開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
1.1 材料與儀器 線葉龍膽采自甘肅馬銜山,并經(jīng)鑒定為龍膽科龍膽屬植物線葉龍膽Gentiana farreri Balf.f.的干燥全草。WFH-2018型紫外透射反射儀 (上海精科實業(yè)有限公司);BS 224 S型電子天平 (北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);CHK2-F-GS型光學(xué)顯微鏡 (Olympus);顯微成像系統(tǒng) (尼康80i,Basic Research軟件);Power shot650型數(shù)碼相機 (佳能)。
1.2 方法 對所采集的線葉龍膽進行植物形態(tài)觀察,用數(shù)碼相機拍攝,并對其器官形態(tài)特征進行描述;取線葉龍膽的干燥莖、葉,用水浸泡,待軟化后做徒手切片及葉的表皮制片,另取干燥的莖、葉、花分別研粉,按生藥學(xué)常規(guī)方法制成線葉龍膽莖、葉、花的橫切片以及粉末片。將制備好的切片置顯微鏡下觀察,并用顯微成像系統(tǒng)拍攝。
2.1 原植物鑒定[1-2]
對采集樣品原植物形態(tài)進行觀察,并參考相關(guān)資料與文獻,經(jīng)鑒定為龍膽科龍膽屬植物線葉龍膽Gentiana farreri Balf.f.,對線葉龍膽原植物用數(shù)碼相機拍攝,如圖1。
圖1 線葉龍膽Gentiana farreri Balf.f.(甘肅馬銜山)
2.2 性狀特征 對所采集線葉龍膽樣品的性狀進行觀察,器官形態(tài)特征見表1。
圖2 線葉龍膽莖粉末特征圖
表1 線葉龍膽植物器官形態(tài)特征
圖3 線葉龍膽葉粉末特征圖
圖4 線葉龍膽花粉末特征圖
2.3 顯微特征
對線葉龍膽的干燥莖、葉、花進行粉末制片并進行觀察,粉末特征見圖2~4;對線葉龍膽的莖、葉組織橫切片及葉的表皮制片進行觀察,顯微特征見圖5~7,顯微結(jié)構(gòu)特征總結(jié)如表2。
圖5 線葉龍膽葉組織橫切面簡圖
圖6 線葉龍膽莖組織橫切面詳圖
圖7 線葉龍膽葉表皮顯微特征圖
表2 線葉龍膽顯微結(jié)構(gòu)特征
2.4 薄層色譜鑒別[3-5]
供試品溶液的制備:線葉龍膽、秦艽、關(guān)龍膽三種藥材分別粉碎,取粉末0.5g,加甲醇15ml,回流30min,過濾蒸干,用甲醇轉(zhuǎn)移,定容于1m l容量瓶中,供點樣用,對照品龍膽苦苷濃度為0.376mg/ml。
展開:采用GF254-CMC-Na板,分別取甲醇提取液及對照品溶液點樣,展開劑為氯仿:甲醇:水 (13:3:0.2),揮干溶劑,置紫外燈下觀察。見圖8。
圖8 硅膠薄層色譜 (GF254)
計算Rf值:Rf(對照品) =0.341,Rf(線葉龍膽)=0.325,Rf(關(guān)龍膽) =0.318,Rf(秦艽) =0.334。三種藥材及對照品Rf值相近,且斑點在紫外分光儀下顯同一種顏色—黃棕色,說明三種藥材均含有龍膽苦苷,另外,線葉龍膽中還有一棕色斑點,即有未知成分存在,其Rf值=0.208,極性大于龍膽苦苷的極性。對該藥材中存在的有效化學(xué)成分的定量分析,有待于進一步研究。
3.1 線葉龍膽藥材粉末特征為念珠狀增厚表皮細胞、非腺毛、花瓣乳頭狀細胞和花柱碎片;薄層色譜中,供試品與對照品相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點,重現(xiàn)性好線葉龍膽中還有一棕色斑點,即有未知成分存在,其Rf值=0.208,極性大于龍膽苦苷的極性。對該藥材中存在的有效化學(xué)成分的定量分析,有待于進一步研究。
3.2 我國龍膽屬植物資源十分豐富,分布面積廣,許多植物在民間都作為藥用,從當(dāng)?shù)匾吧闹参镔Y源中篩選一些具有較高藥用價值的種類,有針對性地進行人工栽培馴化和開發(fā)利用試驗,在取得成熟技術(shù)后,再建立繁育基地和大面積推廣[6]是緩解野生藥用資源匱乏和擴大新藥源的有效途徑;線葉龍膽在西藏、甘肅資源較為豐富,有一定的藥用價值,對線葉龍膽的有效化學(xué)成分及藥理作用的進一步研究,將為我國龍膽屬植物資源的進一步開發(fā)利用提供思路。
[1]姚振生.藥用植物學(xué)[M].中國中醫(yī)藥出版社.2003年1月.
[2]禹信哲.植物學(xué) (形態(tài)解剖部分) [M].人民教育出版社.1978年3月.
[3]王寧,周樂.龍膽屬植物化學(xué)成分研究概況.陜西林業(yè)科技[J].N0.3,2001.pp.71 -78.
[4]曹雯.秦艽的薄層色譜分析.時珍國醫(yī)國藥 [J].2003年第 12期.74.
[5]劉濤,付玉芹,才謙,楊松松,韓立偉,黃學(xué)石.龍膽總裂環(huán)環(huán)烯醚帖苷質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報[J].2006年第2期.25.
[6]林玲,羅建.西藏色季拉山龍膽屬植物種植資源及其開發(fā)利用.林業(yè)科技[J].第27卷,第6期.2002年11月.