孫黎明

遼寧鞍山市藥品檢驗(yàn)所，遼寧 鞍山 114006

1 樣品的預(yù)處理與供試液制備

在基層的一些檢驗(yàn)人員認(rèn)為薄層的固定項(xiàng)可即用即棄，不怕供試液中雜質(zhì)的污染，因而樣品無需精制、凈化，就縮短或簡化提取過程，而實(shí)際工作中由于中成藥成分極為復(fù)雜，未知成分多，常相互干擾或背景污染難以得到滿意的分離效果。

2 薄層色譜的點(diǎn)樣

點(diǎn)樣是出現(xiàn)問題較多的一個(gè)環(huán)節(jié)，它是薄層色譜分析的第一部，也是極為關(guān)鍵的一步，因?yàn)椴涣嫉狞c(diǎn)樣技術(shù)是最主要的誤差來源。

2.1 上樣超負(fù)荷問題較普遍

這個(gè)問題有一定客觀因素，因?yàn)榻陙硪恍┧帍S在投料時(shí)采取低限投料、及低級別原料藥投料，導(dǎo)致檢驗(yàn)難度增大，一些檢驗(yàn)人員為得到較好的檢驗(yàn)結(jié)果加大點(diǎn)樣量，導(dǎo)致上樣容積過大，這是他們對于上樣容積超負(fù)荷嚴(yán)重后果的認(rèn)識不足。因?yàn)樯蠘恿坎贿m當(dāng)?shù)募哟蟛⒉粫?huì)提高斑點(diǎn)分辨率，相反由于樣品濃度過大產(chǎn)生拖尾效應(yīng)，嚴(yán)重的干擾檢驗(yàn)結(jié)果。

2.2 薄層板點(diǎn)樣原點(diǎn)過大

A樣的同時(shí)樣品在原點(diǎn)位置已呈環(huán)形展開，即所謂上樣環(huán)效應(yīng)，如樣品在溶劑中溶解度很大，原點(diǎn)心將變成空心環(huán)，這種效應(yīng)對隨后的線形展開、定量測定會(huì)造成很不利的影響。

2.3 薄層板原點(diǎn)的機(jī)械損傷

在工作中一些檢驗(yàn)人員常在點(diǎn)樣過程中點(diǎn)破薄層板，而點(diǎn)樣器對薄層板表面的機(jī)械損傷對色譜質(zhì)量尤其是定量分析將造成災(zāi)難性影響。

3 吸附劑與展開劑對薄層色譜的影響

吸附劑活性是由其表面擁有眾多的硅醇基活潑性及游離型硅醇基決定硅膠的活性（1）硅醇基為親水性集團(tuán)，易吸附水而成為水合硅醇基。自制薄層板在105℃烘干，就是使水合硅醇基而活化；而一些實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)過程中不活化或活化板暴露空氣中時(shí)間過長（一般不超過10分鐘）從而使活化硅膠吸附空氣中水蒸氣分子降低活性，導(dǎo)致分離度下降，使樣品檢識度降低，甚至難于辨認(rèn)。

薄層色譜實(shí)際上是一個(gè)三維的層析過程，溶劑蒸氣在展開箱中參與色譜展開，并起著重要作用。常規(guī)薄層色譜中，常用多組分溶劑展開，不同溶劑分子在吸附區(qū)相互競爭，產(chǎn)生取代效應(yīng)。如硅膠是親水性吸附，它首先對溶劑中極性大的分子有更大親和力，所以被吸附的各組分濃度與氣體空間和溶劑液相組成差別很大，如不控制，情況會(huì)很復(fù)雜。換言之，薄層板沒有預(yù)吸附，混合溶劑系統(tǒng)中一部分溶劑分子有選擇的吸附在薄層板上形成因定相，同時(shí)在板上形成溶劑梯度而直接形象層析過程，如藥典收載的人參薄層鑒別，在展開箱中預(yù)平衡15分鐘比未預(yù)平衡直接展開多得的色譜分離度明顯提高，且重現(xiàn)性好。

4 影響薄層色譜的其他因素

除上述影響因素外，溫度、操作熟練程度及器材、試劑均對薄層色譜有影響。溫度影響首先在于展開劑中有了溶劑因沸點(diǎn)、蒸氣壓、相對密度不同，而蒸發(fā)程度各異，因而展開箱中展開劑、蒸發(fā)比例也發(fā)生變化，必然直接影響層析結(jié)果，另外含水的展開劑在放置分層或展開時(shí)有機(jī)相中水的比例也不同，從而不同程度的改變了展開劑極性影響分離度。如果用了不合格的薄層板，所得的薄層色譜是一個(gè)難以辨認(rèn)的、扭曲的圖譜，此外在調(diào)研中還發(fā)現(xiàn)一些單位的所用的部分試劑過于陳舊，這將直接影響薄層色譜的分離能力，如甲酸乙酯，在多次開瓶后因吸收空氣中水分而水解，在大黃的薄層色譜中如用這樣的甲酸乙酯做展開劑，那么色譜的分離度將明顯下降。

討論：我們應(yīng)在環(huán)境、技術(shù)、器材及試劑等各個(gè)環(huán)節(jié)上加以重視、研究，進(jìn)一步規(guī)范操作，才能得到滿意的分析結(jié)果。

[1]周同惠等.紙色譜和薄層色譜[M].北京：科技出版社，1989，(1)7.