范 珍

安慶醫(yī)藥高等專科學校 安徽安慶 246000

實驗室中折光法快速測定展開劑展開效果

范 珍

安慶醫(yī)藥高等?？茖W校 安徽安慶 246000

在薄層層析實驗中，用阿貝折射儀通過折射率測定各種展開劑成份比例，與延長時間變化的問題，基于折射率的結果，實驗者可以調節(jié)展開劑的折光率獲得高品質的試驗結果。本文提供了一個快速，可信的方法來衡量和調整每個組件的比例，以滿足學生薄層色譜實驗的需求。

展開劑；折射率；阿貝折射儀；薄層色譜法試驗

目前高校實驗室中，學生所做的薄層色譜法、紙色譜法試驗中，其中定性參數(shù)比移值Rf和相對比移值Rr是否符合目標要求，亦即意味著實驗成敗與否。在影響Rf值和Rr值的諸多因素中，展開劑的影響最大。學生實驗因為平行班級多，延續(xù)時間長且相互間隔時間不定，所用展開劑配制量大，由于大多展開劑以有機易揮發(fā)成分為主，隨著時間的推移及環(huán)境溫度的變化，展開劑中各組分比率會發(fā)生相應的變化，這種變化勢必影響到Rf值和Rr值的測定。本文利用阿貝折光計快速測定學生實驗維生素E性質測定實驗中展開劑效果，根據(jù)折光率的變化調整展開劑的組分比例，獲得滿意的實驗效果，從而提供了一種簡單可行的展開劑測定方法。

一、儀器與藥物

1.儀器

阿貝折光計2WAJ，上海光學儀器廠生產(chǎn)。

2.藥物與試劑

環(huán)己烷(AR)(上海試劑一廠)、乙醚(AR)(上海試劑一廠)、維生素E膠囊(廈門魚肝油廠)、0.5%羧甲基纖維素鈉硅膠G薄板(青島海洋化工廠，自制)。

二、維生素E的薄層色譜分析

1.實驗方法

(1)不同比例展開劑折光率測定

選取展開劑環(huán)己烷、乙醚不同的配置比例(見表1)，實驗進行前使用阿貝折光計于室溫28℃下，等待阿貝折光計的棱鏡組在清潔、干燥后合上，從棱鏡組右邊側小孔滴加待測溶劑2～3滴，快速測定，分別測得其各自折光率。

表1 折光率檢測結果

n乙醚=1.3598，n環(huán)己烷=1.4182

n(環(huán)己烷:乙醚，4:1)=1.4043，1.4032，1.4038，1.4035

n(環(huán)己烷:乙醚，5:1)=1.4056，1.4067，1.4055，1.4062

n(環(huán)己烷:乙醚，6:1)=1.4062，1.4082，1.4075，1.4088

n(環(huán)己烷:乙醚，7:1)=1.4088，1.4090，1.4104，1.4104

n(環(huán)己烷:乙醚，8:1)=1.4105，1.4103，1.4104，1.4104

n(環(huán)己烷:乙醚，10:1)=1.4108，1.4121，1.4111，1.4117

(2)不同時間段，展開劑折光率變化測定

選取學生實驗大綱要求的展開劑比例，即環(huán)己烷:乙醚=4:1，室溫28℃下，依據(jù)學生實驗課程每課時45分鐘，課間休息15分鐘，間隔60分鐘采樣，使用阿貝折光計測定其折光率變化(見表2)：

表2

下干燥，置烤箱105℃活化30min后，取出放冷，沿一端1.5cm處用鉛筆輕劃一條起始線，用管口平整的毛細管于線上點樣，晾干。取6只層析缸，分別加入不同比例展開劑，放入點好樣的薄板，蒸氣飽和5min，薄板下端浸入展開劑約1cm處，蓋上缸蓋，上行展開至展開前沿距起始線15cm處，取出，劃下展開前沿位置?？諝庵凶匀涣栏?，噴濃硫酸溶液顯色，測量原點至各斑點中心及展開劑前沿的距離，計算比移值(Rf)，結果見表3：

表3

2.校正實驗

另取環(huán)己烷:乙醚為6:1、7:1、8:1混合液各500ml，分別加入乙醚約25ml、46.5ml、55.5ml攪勻，分別調整其折光率至1.4040，放入層析缸，測得Rf(α-生育酚醋酸酯、α-生育酚、α-生育酚對苯醌)值為0.5:0.7:0.9。

3.實驗結果分析

從上述結果看來，達到實驗分離效果的展開劑，折光率不大于1.4060，也就是環(huán)己烷:乙醚的比例不超過5:1；當展開劑折光率大于1.4060時，各組分的Rf值變小，且間距縮??；當展開劑折光率大于1.4104時，各組分無法分離；同時隨著時間的變化，原先配制的展開劑折光率發(fā)生變化，RF值逐漸發(fā)生漂移，最終不符合實驗目的要求。

基于折光率的變化，對展開劑適量補充相應組分，調整其折光率值至與正確比例展開劑相近時，實驗結果達到實驗要求。

4.討論

20世紀初，俄國植物學家茨維特建立了柱色譜法，20世紀20年代、30年代又相繼出現(xiàn)了薄層色譜法和紙色譜法。在此基礎上，經(jīng)過一個世紀的發(fā)展色譜法已成為一種分析速度快，靈敏度高，分離效果好，應用范圍廣泛的重要分析方法。正因為色譜法有著如此多的優(yōu)點，在醫(yī)藥、衛(wèi)生、食品和化工等行業(yè)應用越來越廣泛。在高校的實驗室里，它也正式成為有機分析及藥品分析實驗中越來越重要的實驗內(nèi)容之一。

折光率(n)是液體和透明半透明固體的物理性質之一。液態(tài)單質標準條件下有其固定折光率，同密度、熔點、沸點一樣，可視為常數(shù)。折光率也用于確定液體混合物的組成，當組分的結構相似和極性小時，混合物的折光率和濃度之間常呈線性關系。溶液中，溶質含量的不同，相應產(chǎn)生的折光率也不同。上述實驗中,展開劑的組分簡單,僅兩種成分,當他們按一定比例混合后,相應產(chǎn)生不同折光率。通過建立工作表,即可快速判斷展開劑的效果,是否適用于實驗。

三、結束語

由本文的實驗數(shù)據(jù)可看出，在大批量，長時間的學生實驗中，用折光率快速判定展開劑組分能滿足展開要求，簡單、方便、準確，同時在實驗中，我們還可以根據(jù)折光率的數(shù)值變化，相應補充某一組分，使其達到實驗目的，這樣可以達到提高試劑利用率，減低實驗成本，減少試劑對環(huán)境影響的目的。因此用阿貝折光計快速測定展開劑的折光率來判斷其展開效果，不失為一條簡單可行之路。

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Fast tracing the result of developing agent by refractive index could improve the quality of student’s TLC experiment

Fan Zhen
Journal of Anqing medical and pharmaceutical college, Anqing, 246000, China

In order to solve the problem that the ratio of each component of the developing agent in TLC experiment will be changed with the time extended, this paper check refractive index to do fast tracing of the change of components’ by Abbe refractometer. Based on the result of refractive index, experimenter could adjust the developing agent to get high quality experiment result. This paper provides one fast and believable method to measure and adjust the ratio of each component to meet the demand of student’s TLC experiment.

developing agent; refractive index; Abbe refractometer; TLC experiment

2010-04-15

范珍，本科，實驗師。