孫曼春，方世平，王智勇，吳建元，袁嫻芬

（武漢大學(xué)中南醫(yī)院，湖北 武漢 430071）

鹽酸左氧氟沙星為氧氟沙星的左旋活性體，是第3代喹諾酮類抗菌藥物，通過抑制細(xì)菌DNA回旋酶、破壞細(xì)菌DNA代謝而發(fā)揮作用。鹽酸左氧氟沙星具有抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)的特點(diǎn)，臨床廣泛用于治療呼吸道、泌尿道、腸道及皮膚軟組織等多種系統(tǒng)感染[1]。筆者采用高效液相色譜（HPLC）法對(duì)鹽酸左氧氟沙星在健康受試者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究[2-6]，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

LC-90A型液相色譜儀（日本島津），包括SPD-10A型紫外檢測器、LC-10AD泵、千譜HW信號(hào)處理系統(tǒng)；XK-96A型旋渦混合器；Beckman GS-15R型高速冷凍離心機(jī)；AP-9901型真空泵；BF-2000型氮?dú)獯蹈蓛x；FA2004型電子分析天平（上海恒平科學(xué)儀器有限公司）。鹽酸左氧氟沙星對(duì)照品（含量為97.2%，中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為30455-200202）；鹽酸左氧氟沙星片（商品名彼妥，廣東彼迪藥業(yè)有限公司，規(guī)格為每片100 mg，批號(hào)為20030512）；乙腈、二氯甲烷為色譜純，磷酸、三乙胺、異丙醇為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈 -0.04 mol/L 磷酸 -三乙胺（2 ∶8 ∶0.02）；流速：1.0 mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：298 nm。

2.2 受試者選擇

選擇無心、肝、腎、代謝異常等病史，無吸煙、飲酒等不良嗜好，無藥物過敏史，試驗(yàn)前接受全面體格檢查，且血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能、心率、血壓、心電圖等均正常的健康男性志愿者20例，平均年齡（21.6±1.8）歲，平均身高（171.00±3.17）cm，平均體重（62.25±4.04）kg。試驗(yàn)方案與知情同意書經(jīng)武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，受試者均簽署知情同意書。

2.3 給藥及樣本采集方法

本研究為單劑量給藥試驗(yàn)，受試者試驗(yàn)前1個(gè)月至試驗(yàn)期間不使用任何藥物，于試驗(yàn)前1 d晚餐后開始禁食，試驗(yàn)當(dāng)天晨間空腹口服試驗(yàn)藥鹽酸左氧氟沙星片200 mg，用200 mL溫開水送服。服藥2 h后方可飲水，4 h后統(tǒng)一進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)低脂飲食。試驗(yàn)期間忌煙、酒，禁飲含咖啡因類成分的飲料，避免劇烈活動(dòng)和長時(shí)間臥床。服藥前（0 h）及服藥后 0.25，0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，12，24 h 時(shí)采集上肢靜脈血5 mL至肝素抗凝試管中，離心分離血漿，置-30℃避光冷凍貯存待分析。

2.4 血漿樣品處理

取血漿0.5 mL，加pH為6.8的磷酸鹽緩沖液0.2 mL，混勻，加入二氯甲烷-異丙醇（9∶1）5 mL，旋渦混勻，3000 r/min離心20 min，吸取有機(jī)相4 mL置清潔試管中，50℃水浴氮?dú)饬飨麓蹈?，?100 μL 流動(dòng)相溶解殘?jiān)?0 μL 進(jìn)樣。

2.5 血藥濃度測定方法評(píng)價(jià)

在上述色譜條件下，色譜峰與血漿雜質(zhì)峰分離良好，無干擾峰出現(xiàn)，鹽酸左氧氟沙星保留時(shí)間約為5.7 min。取加入標(biāo)準(zhǔn)品的空白血漿 0.051，0.101，0.202，0.505，1.011，1.516，2.022，4.044 μg/mL，按上述血漿樣品處理法處理，依法測定，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程 A=63.9257 C-1.18496，r=0.9993（ n=8）。結(jié)果表明鹽酸左氧氟沙星血漿質(zhì)量濃度在0.051～4.044 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。取鹽酸左氧氟沙星低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度（分別為0.051，0.505，2.022 μg/mL）的溶液進(jìn)行回收率和日內(nèi)、日間精密度考察，結(jié)果見表1。

表1 鹽酸左氧氟沙星回收率及精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.6 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

用DAS 1.0程序分別計(jì)算各受試者的有關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，受試藥藥 -時(shí)曲線下面積（AUCT）按梯形面積法計(jì)算，峰濃度（Cmax）和達(dá)峰時(shí)間（Tmax）均為實(shí)測值。20例健康受試者口服鹽酸左氧氟沙星片后的血藥濃度分別經(jīng)DAS 1.0程序處理后，各主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表2。

表2 主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)（）

表2 主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)（）

參數(shù)吸收相半衰期（t1/2ka，h）消除相半衰期（t1/2β，h）分布相半衰期（t1/2α，h）表觀分布容積（V d，L）0 ～24 h 藥-時(shí)曲線下面積[AUC0→24，mg/（L·h）]0 ～ ∞ 藥 - 時(shí)曲線下面積[AUC0→∞，mg/（L·h）]數(shù)值0.233±0.0609.628±5.2131.188±0.7261.795±0.91824.385±3.22229.866±3.892

2.7 血藥濃度-時(shí)間曲線

20例健康受試者單劑量口服鹽酸左氧氟沙星片200 mg后的平均血藥濃度-時(shí)間曲線見圖1。

圖1 20例健康受試者平均血藥濃度-時(shí)間曲線圖

3 討論

本試驗(yàn)采用HPLC法測定鹽酸左氧氟沙星濃度，方法專屬性高，線性范圍包括了所有體內(nèi)血藥濃度實(shí)測數(shù)據(jù)點(diǎn)，高、中、低3個(gè)質(zhì)量濃度水平的回收率均大于80%，日內(nèi)及日間變異均小于10%，達(dá)到了生物樣品測定的要求。

在確定色譜分離條件時(shí)，經(jīng)系統(tǒng)比較，選用乙腈-0.04 mol/L磷酸-三乙胺（2∶8∶0.02，V/V）作流動(dòng)相，鹽酸左氧氟沙星與其他雜質(zhì)峰分離良好。在樣品預(yù)處理時(shí)，加入pH為6.8的磷酸鹽緩沖液混勻后再加入二氯甲烷-異丙醇（9∶1）提取，選用的方法提取效果好，簡便、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。

試驗(yàn)全過程在醫(yī)生、護(hù)士的監(jiān)護(hù)下進(jìn)行，受試者均未見明顯不良反應(yīng)。

[1]Davis R，Bryson HN.Levofloxacin：a review of its antibacterial activity，pharmacokinetics and therapeutic efficacy[J].Drugs，1994，47（4）：677-700.

[2]張 靜，施裕珍，王海燕.左旋氧氟沙星血藥濃度測定及藥物動(dòng)力學(xué)[J]. 中國臨床藥學(xué)雜志，1999，8（3）：155-157.

[3]周 文，李朝武，薛玉英，等.國產(chǎn)鹽酸左旋氧氟沙星分散片藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度研究[J]. 中國藥房，2000，11（4）：173-174.

[4]雷嘉川，羅順德，張如洪.左旋氧氟沙星在開顱手術(shù)病人中的藥代動(dòng)力學(xué)[J]. 中國藥學(xué)雜志，2000，34（11）：761-763.

[5]馬越鳴，曾照宏，陳 波.鹽酸左旋氧氟沙星膠囊人體生物利用度[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2000，5（4）：333-335.

[6]張宏文，邵志高.反相高效液相色譜法測定左旋氧氟沙星血藥濃度[J].中國藥房，1998，9（1）：28-29.