董 艷

(安徽省淮北礦工總醫(yī)院，安徽 淮北 235000)

鞣柳硼三酸散為復(fù)方制劑，其組分為鞣酸、水楊酸、硼酸，用于治療手、足癬[1]。復(fù)方制劑中鞣酸的含量測定方法目前已報(bào)道的有皮粉法(藥典法)[2]、絡(luò)合量法[3]等。筆者采用絡(luò)合滴定法測定鞣柳硼三酸散中鞣酸的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

AE-240型電子分析天平(0.01 mg/0.1 mg，Mettler);UW4200H型電子托盤天平(0.01 g，日本島津);10 mL堿式滴定管。鞣柳硼三酸散(貴州金橋藥業(yè)有限公司，批號分別為080802，081013，081027);鞣酸(分析純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所);氯化銨(分析純，開封化學(xué)試劑總廠);氨水(分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);鉻黑T(分析純，廣州偉伯化工有限公司);鋅滴定液(0.05000 mol/L);乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)滴定液(0.05164 mol/L)。

2 方法與結(jié)果

2.1 測定方法

稱取樣品適量(約相當(dāng)于50 mg鞣酸)，精密稱定，分別置100 mL量瓶中，精密移取0.05 mol/L的鋅滴定液10 mL，量取氨-氯化銨緩沖溶液(pH=10)10 mL，加入100 mL量瓶中，以蒸餾水定容至100 mL，振搖(超聲3 min)，待沉淀穩(wěn)定后過濾，棄去初濾液，精密吸取續(xù)濾液10 mL，置錐形瓶中，加氨-氯化銨緩沖溶液(pH=10)10 mL、鉻黑T指示劑適量，用0.05 mol/L的EDTA-Na2滴定液滴定至溶液顯藍(lán)綠色，即為終點(diǎn)。每1 mL鋅滴定液(0.05 mol/L)相當(dāng)于8.5059 mg鞣酸。

2.2 原料藥含量測定

稱取5份鞣酸原料藥各50 mg，依法測定。結(jié)果見表1。

表1 原料藥中鞣酸含量測定結(jié)果

2.3 精密度試驗(yàn)

稱取樣品(批號為080802)適量(約相當(dāng)于鞣酸50 mg)，共5份，依法測定，同時(shí)作空白對照試驗(yàn)。結(jié)果鞣酸平均含量為25.10%，RSD為0.34%(n=5)。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

稱取樣品(批號為080802)適量(約相當(dāng)于鞣酸50 mg)，依法配制溶液，分別于配制后 2，4，6，8，24 h時(shí)依法測定。結(jié)果見表2，可見鞣酸含量未見明顯變化。

表2 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.5 回收率試驗(yàn)

精密稱定250 mg鞣酸原料藥共3份，分別置50 mL量瓶中，加水振搖(超聲3 min)使溶解，以水定容，使成5 g/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密稱定空白基質(zhì)即水楊酸和硼酸適量(約相當(dāng)于鞣酸50 mg)，置100 mL量瓶中，精密移取10 mL鞣酸原料藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，依法測定含量，每份平行操作3次，并作空白對照試驗(yàn)，計(jì)算回收率。結(jié)果見表3。

表3 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

2.6 樣品含量測定

稱取3批樣品各適量(約相當(dāng)于鞣酸50 mg)，依法測定含量，每批樣品平行操作2次，同時(shí)作空白對照試驗(yàn)，結(jié)果見表4。

3 討論

林秀英等[4]根據(jù)鞣酸具有多酚性化合物結(jié)構(gòu)，對紫外光有吸收(用水作溶劑時(shí)的最大吸收在276 nm波長處)，采用紫外分光光度法測定藥用鞣酸及其制劑的含量，該法較文獻(xiàn)報(bào)道的其他方法簡便、省時(shí)、準(zhǔn)確，但用于鞣柳硼三酸散中鞣酸的含量測定時(shí)有干擾，選擇性差。沈特龐等[5]采用絡(luò)合滴定法測定了鞣酸魚肝油軟膏中鞣酸的含量，其原理是鞣質(zhì)和非鞣質(zhì)都能與多種金屬離子(如鉛、銅、鉍等)生成沉淀(為多元酚與金屬離子形成的多核絡(luò)合物)，其中鋅離子對鞣酸具有較高選擇性，能與鞣質(zhì)1∶1生成沉淀，且鋅和鞣酸極易溶于水，故可以水為溶出介質(zhì)，鋅滴定液為沉淀劑，過量的鋅離子用EDTA-Na2作絡(luò)合劑滴定，以鉻黑T作指示劑，采用間接絡(luò)合滴定法測定鞣酸含量。鞣柳硼三酸散中水楊酸和硼酸難溶于水，均不與沉淀劑、絡(luò)合劑發(fā)生反應(yīng)，筆者采用水溶解后絡(luò)合滴定的方法測定鞣酸含量，操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確。

表4 樣品含量測定結(jié)果

鞣酸是多元酚，故應(yīng)在堿性條件下進(jìn)行沉淀反應(yīng)，而鋅與EDTA-Na2絡(luò)合反應(yīng)也應(yīng)在堿性條件下進(jìn)行。在絡(luò)合滴定過程中，隨著滴定劑與金屬離子反應(yīng)生成相應(yīng)的絡(luò)合物，溶液的酸度會逐漸增高，溶液pH的改變可能導(dǎo)致酸效應(yīng)，影響主反應(yīng)的進(jìn)程;而絡(luò)合滴定中使用的金屬指示劑的顏色變化也受溶液pH的影響，因此絡(luò)合滴定中常加入緩沖溶液，以維持滴定體系酸度基本不變。本試驗(yàn)采用pH為10的氯化銨-氨水溶液緩沖體系控制酸度，沉淀穩(wěn)定，絡(luò)合完全。

除一價(jià)的堿金屬離子外，乙二胺四乙酸(EDTA)能與絕大多數(shù)金屬離子形成穩(wěn)定的絡(luò)合物。由于多數(shù)金屬離子的配位數(shù)為4和6，在一般情況下，EDTA與金屬離子幾乎都能形成1∶1的絡(luò)合物。本試驗(yàn)中鞣酸與鋅離子也發(fā)生1∶1沉淀，鞣酸分子式是C76H52O46，相對分子質(zhì)量為1701.23，因此0.05 mol/L的鋅滴定液對鞣酸的滴定度為8.5059 g/L。由于EDTA與金屬離子可形成具有多個(gè)五元環(huán)的螯合物，螯合物的穩(wěn)定性高，從而保證了滴定反應(yīng)很完全，而且絡(luò)合反應(yīng)的速率快，除Al，Cr，Ti等金屬離子外，一般都能迅速完成。

[1]WS-10001-(HD-1007)-2002，國家藥品標(biāo)準(zhǔn)·化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)(第十冊)[S].

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2000:附錄63.

[3]張百舜，張潤珍，李 川.絡(luò)合量法測定鎖陽鞣質(zhì)含量[J].中草藥，1992，23(11):577.

[4]林秀英，楊 釗，程秀民，等.紫外分光光度法測定藥用鞣酸及其制劑中的含量[J].山東醫(yī)藥工業(yè)，1994，13(4):18.

[5]沈特龐，姚水寶，黃小華.絡(luò)合滴定法測定鞣酸魚肝油軟膏中的鞣酸含量[J]. 藥學(xué)實(shí)踐雜志，2006，24(2):100.