康德新 張偉輝

(1.大慶油田總醫(yī)院 黑龍江大慶 163000;2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 黑龍江哈爾濱 150086)

重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是臨床常見的危重病,大量研究證實(shí),在急性胰腺炎發(fā)病早期即存在腸道屏障損傷、細(xì)菌易位、炎性細(xì)胞因子過(guò)度釋放,導(dǎo)致急性胰腺炎病情加重及誘發(fā)SIRS和MODS,成為SAP死亡的主要原因。所以防止SAP患者腸道屏障損傷、從而降低細(xì)菌易位炎性細(xì)胞過(guò)度釋放對(duì)SAP的治療及降低患者的死亡率有重要意義。靈芝草是我國(guó)傳統(tǒng)草藥中的一枝瑰寶,它能“益精氣,治虛勞”,隨著對(duì)靈芝孢子藥理研究不斷深入,其臨床應(yīng)用也日益廣泛。

1 臨床資料

(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠84只由佳木斯大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室提供,雌雄均可。體重250～300g。(2)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組:按照隨機(jī)化原則將大鼠分成4組:A對(duì)照組(n=12);B模型組(n=24);C西醫(yī)治療組(n=24);D中西醫(yī)聯(lián)合治療組(n=24)。(3)模型制備:B、C、D組:參照文獻(xiàn)應(yīng)用胰膽管注射牛磺膽酸鈉方法制做大鼠急性胰腺炎模型,A組:過(guò)程同上,只向胰膽管內(nèi)注入等量生理鹽水。(4)治療:C組造模成功后腹腔注射生長(zhǎng)抑素,(0.01U/kg),6h1次,并用2mL生理鹽水灌胃,D組造模成功后腹腔注射生長(zhǎng)抑素,(0.01U/kg),并將靈芝孢子粉50mg/kg溶于2mL生理鹽水灌胃,6h1次,A、B2組均以2mL生理鹽水灌胃,6h1次。(5)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)采集時(shí)間:造模成功后每組大鼠于12、24、48h各時(shí)間點(diǎn)取頸靜脈測(cè)內(nèi)毒素及TNF-α、血清淀粉酶;48h取胰腺組織標(biāo)本。(6)造模成功后48h計(jì)算各組大鼠生存率:(7)造模成功后48h各組大鼠處死后取胰腺標(biāo)本,制作普通石蠟切片(切片厚度5mm),HE染色后至于光學(xué)顯微鏡下觀察。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:SSPS 10.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P＜0.05為有顯著差異。

表1 各組大鼠血清淀粉酶水平變化情況(U/L、±s)

表1 各組大鼠血清淀粉酶水平變化情況(U/L、±s)

注:與模型組比較▲P＜0.05,與西醫(yī)組比較▲P＜0.05,與中西醫(yī)聯(lián)合治療組比較▲P＜0.05,48h西醫(yī)組與中西醫(yī)聯(lián)合治療組比較P＜0.05

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表2 各組大鼠血漿內(nèi)毒素水平測(cè)定結(jié)果(Eu/mL、±s)

表2 各組大鼠血漿內(nèi)毒素水平測(cè)定結(jié)果(Eu/mL、±s)

注:與西醫(yī)組比較*P＜0.05,與模型組比較*P＜0.05,與對(duì)照組比較*P＜0.05與模型組比較▲P＜0.05,對(duì)照組比較▲P＜0.05,與對(duì)照組比較●P＜0.05。各時(shí)相治療組、模型組、西醫(yī)組、中西醫(yī)聯(lián)合治療組間均有顯著差異P＜0.05

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2 結(jié)果

2.1 胰腺組織觀察

(1)A組:向胰膽管內(nèi)注入生理鹽水后,胰腺未見明顯改變;(2)B、C、D組向胰膽管內(nèi)注入?；悄懰徕c后,大鼠胰腺出現(xiàn)彌散性出血。

2.2 各組大鼠血清淀粉酶水平變化情況(表1)

2.3 各組大鼠血漿內(nèi)毒素水平測(cè)定結(jié)果(表2)

2.4 各組大鼠不同時(shí)相血漿TNF-α水平測(cè)定結(jié)果(表3)

2.5 各組大鼠不同時(shí)相生存率(表4)

2.6 胰腺病理檢查

A組:與正常胰腺組織無(wú)明顯差異。B組:間質(zhì)顯著增寬,小葉間間隔及腺泡間隔擴(kuò)張腺葉結(jié)構(gòu)破壞,片狀出血、壞死明顯;間質(zhì)、腺體間和血管周圍有多量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。C組:間質(zhì)增寬,小葉間間隔及腺泡間隔擴(kuò)張腺葉結(jié)構(gòu)破壞,片狀出血,可見壞死病灶,間質(zhì)、腺體間和血管周圍有炎細(xì)胞浸潤(rùn)。D組:間質(zhì)略增寬,小葉結(jié)構(gòu)完整,有少量出血、壞死改變,無(wú)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。

3 討論

SAP時(shí),大量促炎性細(xì)胞因子的過(guò)度釋放引起過(guò)度的全身性炎癥反應(yīng),造成MODS,是SAP導(dǎo)致死亡的重要原因之一。所以促炎性細(xì)胞因子的過(guò)度釋放是SAP的核心問題。目前對(duì)SAP的治療主要為禁食、胃腸減壓、抑制胰腺分泌藥物等使胰腺休息,并輔助抗生素的應(yīng)用,但目前尚無(wú)有效保護(hù)腸道屏障功能,阻止細(xì)菌易位方法,本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),造模成功后12、24、48h中西醫(yī)結(jié)合治療組大鼠血漿TNF-α水平比西醫(yī)治療組大鼠血漿TNF-α水平顯著降低,且P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其機(jī)制可能是靈芝孢子粉能夠抑制巨噬細(xì)胞合成分泌IL-12、還能明顯減少LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌IL-I2及IFN-γ,增加巨噬細(xì)胞分泌IL-4,促進(jìn)CD4+T淋巴細(xì)胞Th1向Th2的分化,減少促炎因子的釋放。這不僅從免疫方面調(diào)整了Th1/Th2的比例,減少了TNF-α的產(chǎn)生,避免了SIRS的發(fā)生,而且減少了IFN-γ的生成,降底了TNF-α對(duì)機(jī)體造成的損害。另外靈芝孢子粉還能明顯降低血清中內(nèi)毒素含量,實(shí)驗(yàn)中造模成功后12、24、48h中西醫(yī)結(jié)合治療組大鼠血漿內(nèi)毒素水平比西醫(yī)治療組大鼠血漿內(nèi)毒素水平顯著降低,且P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。重癥胰腺炎時(shí),腸麻痹、腸脹氣和胰酶的作用使組織胺5羥色胺等物質(zhì)釋放,影響腸壁的血管通透性,而且打破了正常菌群與致病菌群間的平衡,削弱了正常菌群與黏膜表面的粘蛋白構(gòu)成的腸道的黏膜屏障系統(tǒng),使內(nèi)毒素吸收增加。靈芝孢子粉作為一種傳統(tǒng)的治療消化道感染的藥物,其不僅具有廣譜抗病原菌作用,如對(duì)腸道內(nèi)多種致病菌有抑制或殺滅作用,而且能夠增強(qiáng)單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)對(duì)異物或細(xì)菌的吞噬功能[5],這不僅防止AP發(fā)病過(guò)程中內(nèi)毒素大量入血直接造成的機(jī)體損害而且減少了由內(nèi)毒素直接誘導(dǎo)巨嗜細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α,防止了SIRS的發(fā)生。

靈芝孢子粉通過(guò)降低血漿LPS及TNF-α可明顯減輕SAP大鼠胰腺損傷。從大鼠胰腺病理圖片來(lái)看,中西醫(yī)結(jié)合治療組:間質(zhì)略增寬,小葉結(jié)構(gòu)完整,有少量出血、壞死改變,無(wú)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。西醫(yī)治療組:間質(zhì)顯著增寬,小葉間間隔及腺泡間隔擴(kuò)張腺葉結(jié)構(gòu)破壞,片狀出血、壞死明顯;間質(zhì)、腺體間和血管周圍有多量炎細(xì)胞浸潤(rùn);而且造模后48h中西醫(yī)結(jié)合治療組大鼠血清淀粉酶下降速度明顯快于西醫(yī)治療組大鼠(P＜0.05),這些都說(shuō)明治療組胰腺細(xì)胞損傷減輕。由于胰腺損傷減輕,控制了全身炎癥反應(yīng)向SIRS發(fā)展,這就會(huì)增加SAP大鼠生存率。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)造模后48h中西醫(yī)聯(lián)合治療組、西醫(yī)組生存率分別為75%、46%,即中西醫(yī)聯(lián)合治療組在48h生存率明顯高于西醫(yī)組(P＜0.05)。

表3 各組大鼠不同時(shí)相血漿TNF-α水平測(cè)定結(jié)果(ng/mL、±s)

表3 各組大鼠不同時(shí)相血漿TNF-α水平測(cè)定結(jié)果(ng/mL、±s)

注:與西醫(yī)組比較*P＜0.05,與模型組比較*P＜0.05,與對(duì)照組比較*P＜0.05與模型組比較▲P＜0.05,與對(duì)照組比較▲P＜0.05,與對(duì)照組比較●P＜0.05,各時(shí)相治療組、模型組、西醫(yī)組、中西醫(yī)聯(lián)合治療組間均有顯著差異P＜0.05

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表4 各組大鼠不同時(shí)相生存率(%)

以上這說(shuō)明靈芝孢子粉通過(guò)降低SAP大鼠LPS和TNF-α水平,防止了過(guò)度的全身炎癥反應(yīng),使胰腺病理改變明顯減輕,增加SAP大鼠生存率,對(duì)SAP有治療作用。

[1]張群華,倪泉興,蔡端,等.急性胰腺炎和全身炎癥反應(yīng)綜合征的關(guān)系[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)雜志,2000,3:105～106.