吳線玲,謝軍燕
(浙江省龍泉市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,浙江 龍泉 323700)
胎膜早破是威脅母嬰健康的產(chǎn)科常見并發(fā)癥,發(fā)病率為30.6% ~21.9%[1]。其發(fā)病的原因是多方面的,感染是主要原因之一,解脲支原體(UU)和人巨細(xì)胞病毒(HCMV)主要寄居在泌尿生殖道,是宮內(nèi)感染最常見的病原體,感染后常無明顯臨床癥狀,潛伏期長(zhǎng)而不易被早期診斷。筆者應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù),對(duì)胎膜早破孕婦和正常孕婦的宮頸分泌物進(jìn)行了UU-DNA和HCMV-DNA檢測(cè),以探討UU及HCMV感染與胎膜早破的相關(guān)性?,F(xiàn)報(bào)道如下。
選擇2007年5月至2008年6月在我院婦產(chǎn)科住院孕婦188例,以正常孕婦61例作為對(duì)照組,妊娠38~41周,無胎膜早破;胎膜早破孕婦127例為觀察組,妊娠30~40周,臨產(chǎn)前胎膜已破,有羊水流出,陰道分泌物pH>8.0,鏡下可見到羊齒狀結(jié)晶,破膜到臨產(chǎn)時(shí)間5~53 h,平均20.5 h。
常規(guī)外陰消毒,暴露宮頸,將無菌棉拭子插入宮頸,停止10 s后,旋轉(zhuǎn)拭子采樣,將棉拭子放入1.5 mL生理鹽水中浸泡,以15 000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min,棄上清液,留沉渣備檢。在沉淀中加入50 μL裂解液,混勻后加蛋白酶K 2 μL,置45℃水浴1 h,再煮沸10 min,以15 000 r/min轉(zhuǎn)速離心,取上清液提取UU或HCMVDNA模板。取 UU或 HCMV-DNA PCR反應(yīng)液 18 μL,Taq-DNA聚合酶1 U,樣品模板10 μL,混勻后離心片刻,置MJPTC-100型擴(kuò)增儀(PCR試劑盒由廈門長(zhǎng)城生物試劑公司提供,美國MJ公司生產(chǎn))中,在 92 ℃預(yù)變性 4 min,進(jìn)入 92 ℃、30 s,58 ℃、30 s,72 ℃、60 s反復(fù)循環(huán)35周期,再以72℃延伸5 min,取15 μL擴(kuò)增產(chǎn)物+2 μL載樣液混勻,用1.5%瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,紫外檢測(cè)儀下觀察。UU-DNA擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)429 bp熒光帶即為UU-DNA陽性,HCMV-DNA擴(kuò)增產(chǎn)物電泳后出現(xiàn)240 bp熒光帶則為HCMV-DNA陽性。
采用 χ2檢驗(yàn)。
結(jié)果見表1-2??梢娪^察組UU和HCMV感染率與對(duì)照組比較明顯增高,差異有非常顯著性(P<0.01)。觀察組宮頸UU和HCMV雙重感染率為16.67%,雖然比單項(xiàng)感染率低,但與對(duì)照組比較差異有顯著性(P<0.01)。
表1 兩組UU-DNA和HCMV-DNA陽性率比較[例(%)]
表2 觀察組UU和HCMV雙重感染率[例(%)]
導(dǎo)致胎膜早破的因素很多,常見病因有頭盆不稱、羊水過多、胎位異常,但約有80%的胎膜早破病因不明。子宮頸是性傳播疾病的主要感染部位,常見病原體有UU和HCMV、人乳頭瘤病毒(HPV)、人皰疹病毒(HSV)。
UU是介于細(xì)菌和病毒之間的無細(xì)胞壁、能獨(dú)立生存的最小微生物。感染人類的支原體有12~14種,其中以女性生殖道分離出人型支原體(MH)及UU最常見,且80%以上感染者無臨床癥狀[2]。孕婦是UU感染的特殊人群。妊娠期UU感染可在妊娠16~20周侵襲羊膜、損傷胎盤造成絨毛膜炎,導(dǎo)致晚期流產(chǎn)、胎膜早破、早產(chǎn)。本研究結(jié)果表明,宮頸UU感染與胎膜早破的發(fā)生密切相關(guān)。這可能是因?yàn)椋瑢m頸UU感染處于活動(dòng)期,病原體上行性傳播,侵犯胎膜,產(chǎn)生一種蛋白水解酶,水解胎膜的細(xì)胞外物質(zhì),降低組織的張力強(qiáng)度,使胎膜抵抗力減弱,結(jié)果是膠原纖維Ⅲ減少,膜的脆性增加;另外,UU感染時(shí)除有淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)外,還可誘導(dǎo)產(chǎn)生前列腺素的磷酯酶Ⅱ增加,分解胎膜中的花生四烯酸而產(chǎn)生前列腺素,促進(jìn)炎性反應(yīng)及子宮收縮,導(dǎo)致胎膜早破[3]。
HCMV屬皰疹病毒科,是引起宮內(nèi)感染最常見的病毒,由雙鏈DNA分子組成,人是其唯一宿主,孕婦宮頸HCMV感染率為2.48% ~3.50%[4]。HCMV感染途徑主要以性交感染為主,是圍產(chǎn)期感染的重要病原體。本研究結(jié)果表明,胎膜早破與宮頸HCMV感染有關(guān),這可能是因?yàn)椋袐D體內(nèi)激素變化加重了HCMV感染,潛伏病毒被激活,上行傳播造成胎膜細(xì)胞損傷或病毒DNA插入宿主DNA序列,在其中復(fù)制、增殖過程中損傷細(xì)胞,導(dǎo)致絨毛膜、羊膜炎,使胎膜受損而發(fā)生破裂。
綜上所述,應(yīng)提倡孕婦加強(qiáng)產(chǎn)前保健,對(duì)UU或HCMV-DNA陽性者給予必要的治療[5],從而降低胎膜早破、早產(chǎn)、母嬰病的發(fā)生率。
[1]侯紅英,李小毛,尹玉竹,等.宮頸感染解脲支原體與不良妊娠結(jié)局的關(guān)系[J]. 中國優(yōu)生優(yōu)生與遺傳雜志,2000,8(2):7 577.
[2]楊賓烈,羅桂香.稽留流產(chǎn)絨毛組織解脲脲原體和沙眼衣原體感染及其臨床意義[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,1998,14:95.
[3]曹澤毅,朗景和.中華婦產(chǎn)科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:345.
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[5]Hay PE,Morgan DJ,Ison CA,et al.A longitudinal study of bacterial vaginosis during pregnancy[J].Br J Obstet Gynaecol,1994,101:1048-1053.