張 琳

(鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,河南鄭州450052)

乙型肝炎是一種嚴(yán)重危害我國(guó)人們健康的傳染病。以往臨床上往往通過乙型肝炎病毒標(biāo)志物(HBV M)和HBV DNA的檢測(cè)結(jié)果來指導(dǎo)診斷和治療。近年來研究發(fā)現(xiàn)HBV外膜蛋白前S1抗原(Pre-S1Ag)、前S2抗原(Pre-S2Ag)對(duì)乙肝臨床診斷具有一定的臨床意義。本文通過對(duì)300例乙肝患者血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag、HBV DNA及肝功能的檢測(cè),并將結(jié)果進(jìn)行比較和分析,來探討聯(lián)合檢測(cè)Pre-S1Ag、Pre-S2Ag在乙肝的感染、復(fù)制以及對(duì)肝功能的影響的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床樣本 300例乙型肝炎患者均來自我院2008年5月至2009年5月門診和住院患者,其中男性179例,女性121例,年齡8-72歲,平均年齡42.3歲。診斷均符合2005年修訂的《慢性乙型肝炎診治指南》的標(biāo)準(zhǔn)[1]。

1.2 試劑 HBsAg檢測(cè)試劑購(gòu)自上?？迫A生物技術(shù)有限公司;HBV DNA試劑由中山大學(xué)達(dá)安基因診斷中心提供;HBV-S1Ag檢測(cè)試劑購(gòu)自中科院上海阿爾法生物技術(shù)有限公司;HBV-S2Ag檢測(cè)試劑購(gòu)自北京醫(yī)科大學(xué)肝病研究所;ALT檢測(cè)試劑購(gòu)自美國(guó)Beckman公司。

1.3 儀器 采用的儀器有:芬蘭MK-3型酶標(biāo)儀;Line-gene實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀;美國(guó)Beckman CX9全自動(dòng)生化分析儀。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法 ①乙肝病毒血清 HBsAg、HBVS1Ag、HBV-S2Ag采用ELISA 法測(cè)定;②HBV DNA采用熒光定量PCR技術(shù);③ALT檢測(cè)采用速率法。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0 for windows軟件進(jìn)行分析,樣本率比較采用 χ2檢驗(yàn)。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 乙肝患者Pre-S1Ag、Pre-S2Ag與HBV DNA的檢測(cè)結(jié)果(見表1)由檢測(cè)結(jié)果可見,300例乙肝患者Pre-S1Ag陽性組、Pre-S2Ag陽性組與Pre-S1Ag+Pre-S2Ag陽性組的例數(shù)與HBV DNA陽性組相比較沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＞0.05)。

表1 乙肝患者血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag、HBeAg及HBV DNA的檢測(cè)結(jié)果

2.2 乙肝病毒 Pre-S1Ag、Pre-S2Ag陽性患者中HBV DNA陽性的比例分析(見表2)通過檢測(cè)結(jié)果可知,Pre-S1Ag+Pre-S2Ag陽性組中HBV DNA陽性的比例顯著高于Pre-S1Ag陽性組(P=0.008)和Pre-S2Ag陽性組(P=0.002)。

表2 Pre-S1Ag、Pre-S2Ag陽性的乙肝患者中HBV DNA的檢測(cè)結(jié)果

2.3 乙肝患者Pre-S1Ag、Pre-S2Ag陽性患者中ALT的檢測(cè)結(jié)果分析(見表3)通過檢測(cè)結(jié)果可知,Pre-S1Ag+Pre-S2Ag陽性組中ALT異常例數(shù)的比例顯著高于Pre-S1Ag陽性組(P=0.008)和Pre-S2Ag陽性組(P=0.017)。

表3 Pre-S1Ag、Pre-S2Ag陽性的乙肝患者中ALT的檢測(cè)結(jié)果

3 討論

長(zhǎng)期以來,臨床一直是以HBeAg和HBV DNA的檢測(cè)作為診斷和治療的金標(biāo)準(zhǔn)[2]。但是約有30%的患者在HBeAg轉(zhuǎn)陰后,病毒仍在體內(nèi)復(fù)制,其中部分可以發(fā)展為肝硬化或肝癌[3]。大量的研究認(rèn)為HBeAg轉(zhuǎn)陰并不能表明HBV從體內(nèi)清除或復(fù)制水平的降低,因?yàn)橐坏〩BV基因的前C區(qū)發(fā)生變異可導(dǎo)致HBeAg表達(dá)受限,而病毒本身復(fù)制并不受影響[4]。因此臨床上不能單靠HBeAg是否陽性來判斷病毒復(fù)制情況。而PCR方法測(cè)定HBV DNA易出現(xiàn)假陽性,且成本高,不易推廣。研究表明,乙肝病毒前S1抗原介導(dǎo)HBV病毒進(jìn)入肝細(xì)胞,可作為HBV傳染性的指標(biāo)[5],前S2抗原具有間接介導(dǎo)HBV對(duì)肝細(xì)胞吸附的作用,與病毒的活動(dòng)性增殖有密切關(guān)系[6]。本文通過檢測(cè)乙肝患者血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag、HBV DNA及谷丙轉(zhuǎn)氨酶,來探討乙肝病毒Pre-S1Ag、Pre-S2Ag對(duì)于評(píng)價(jià)乙肝病毒的感染、復(fù)制及對(duì)肝功能影響的臨床意義。

我們的結(jié)果顯示,HBsAg陽性的乙肝患者中,其血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag的檢出率與HBV DNA的檢出率相比較沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,因此可以證明血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag是反映乙肝病毒復(fù)制的良好指標(biāo)。在Pre-S1Ag、Pre-S2Ag雙陽性的患者中,其 HBV DNA的陽性率較高,且顯著高于單純的Pre-S1Ag陽性或Pre-S2Ag陽性患者。由此可見,聯(lián)合檢測(cè)Pre-S1Ag和Pre-S2Ag更有助于了解HBV病毒在體內(nèi)的感染及復(fù)制的情況。對(duì)ALT的檢測(cè)中發(fā)現(xiàn),Pre-S1Ag、Pre-S2Ag雙陽性的患者中,其ALT的水平較高,且顯著高于單純的Pre-S1Ag陽性或Pre-S2Ag陽性患者,因此表明Pre-S1Ag、Pre-S2Ag雙陽性時(shí)患者肝功能損傷較單純Pre-S1Ag陽性或Pre-S2Ag陽性患者嚴(yán)重,聯(lián)合檢測(cè)Pre-S1Ag和Pre-S2Ag對(duì)于評(píng)價(jià)乙肝患者的肝功能損傷具有重要的臨床意義。通過本文的研究我們得出,聯(lián)合檢測(cè)Pre-S1Ag和Pre-S2Ag對(duì)HBV感染的早期診斷、了解HBV的復(fù)制以及檢測(cè)患者的肝功能具有重要的臨床意義,且檢測(cè)不需特殊儀器設(shè)備,操作簡(jiǎn)單,故Pre-S1Ag、Pre-S2Ag是傳統(tǒng)乙肝病毒血清標(biāo)志物有益的必要補(bǔ)充。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南[J].實(shí)用肝臟病雜志,2006,11(1):8.

[2]程 鋼,何蘊(yùn)韻,周新宇.熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)乙型肝炎病毒[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22:135.

[3]Peng XM,Huang GM,Li JG,et al.High level of hepatitis B virus DNA afterHbeAg to anti-Hbeseroconversion is related to coexistence of mutations in its precore and basal core promoter[J].World J Gastroenterol,2005,11(20):3131.

[4]鐘 磊,袁樹人,孫錦榮.乙型肝炎病毒前S1蛋白及其抗體與HBV血清標(biāo)志物的相關(guān)性[J].臨床檢驗(yàn)雜志,1999,6(17):371.

[5]王家銀,關(guān)向宏.對(duì)乙型肝炎患者HBV Pre S1Ag、HBV DNA及生化指標(biāo)的綜合分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2005,15:3340.

[6]李琪玲.前S2蛋白與乙型肝炎病毒復(fù)制的關(guān)系[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2005,14:3035.