王 宇,肖英紅,何成彥,王 楠,馮學超*

(1.東北師范大學膜通道實驗室吉林長春130024;2.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院,吉林長春130033)

纖溶酶原激活物抑制劑-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)是組織型纖溶酶原激活物(tissuetype plasminogen activator,tPA)和尿激酶型纖溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)主要的抑制因子,是纖溶酶原活化系統(tǒng)(plasminogen activator system,PAs)的特異、快速的抑制物[1]。PAI-1具有多種生物學功能,參與細胞的遷移、黏附及侵襲過程,有研究在細胞水平及小鼠體內均證明PAI-1與腫瘤尤其是惡性腫瘤的生長、浸潤及轉移等生物學行為密切相關:在胃癌及直腸癌組織中PAI-1的濃度明顯高于癌旁及正常組織[2];PAI-1抗原水平在原發(fā)及轉移乳腺癌患者中明顯高于良性腫瘤患者且當PAI-1濃度到一定水平時,癌癥患者臨床復發(fā)和死亡機率均明顯升高[3];頭頸鱗狀細胞癌患者血清中PAI-1濃度顯著高于正常人群[4],另外,Eva Angenete等證明腫瘤轉移患者血漿中PAI-1濃度也顯著升高,因此,我們推測血漿中PAI-1的濃度變化在腫瘤的診斷中具有重要意義,PAI-1可能成為腫瘤尤其是惡性腫瘤治療理想靶標。

本研究擬在以上研究基礎上,測定多種惡性腫瘤患者血漿中PAI-1的濃度變化情況,進一步證明其濃度變化在腫瘤尤其是惡性診斷中的價值以及以PAI-1為靶位腫瘤治療的可能性。

1 材料與方法

1.1 實驗樣本及預處理 在當事人知情下收集乳腺癌、肺癌及喉癌患者和正常人血液標本各40份,男女各半。標本采集及處理方法:空腹靜脈抽取血液5ml于抗凝采血管中,37℃靜止10分鐘,2 000 r/min離心10分鐘,抽取收集上層液(血漿,盡可能去除血小板),于-80℃保存,等樣本收集完畢,一并用于PAI-1濃度測定。

1.2 實驗分組 乳腺癌組:40例,男女各20例,平均年齡56.6±9.5歲。肺癌組:40例,男女各20例,平均年齡58.4±6.9歲。喉癌組:40例,男女各20例,平均年齡57.4±7.9歲。正常對照組:40例,男女各20例,平均年齡58.1±5.9歲。

1.3 主要儀器及試劑 multiskan ascent多功能酶標儀(Thermo,美國),人纖溶酶原激活劑物抑制因子PAI-1ELISA檢測試劑盒(R&D SYSTEMS,美國)

1.4 實驗方法 本研究利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定血漿中PAI-1濃度,首先采用試劑盒提供的方法建立PAI-1濃度標準曲線,根據(jù)標準曲線確定樣本血漿中PAI-1濃度,具體實驗步驟按試劑盒說明書進行。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理 采用curveExpert 1.3建立標準曲線,采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件,實驗數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準差(±s)表示,癌癥組與正常組間比較采用兩獨立樣本t檢驗。

2 結果

統(tǒng)計結果顯示:與正常對照組(9.84±4.66 ng/ml)相比,乳腺癌(21.49±10.54 ng/ml),肺癌(15.10±8.55 ng/ml),喉癌(14.03±7.14 ng/ml)患者血漿中PAI-1含量均明顯升高(P＜0.05),其中乳腺癌組差異極為顯著(P＜0.01)(表1)。

表1 癌癥患者血漿PAI-1水平比較(±s)

表1 癌癥患者血漿PAI-1水平比較(±s)

與對照組比較,**P＜0.01,*P＜0.05

組別 例數(shù) PAI-1(ng/ml)P值乳腺癌組 40 21.49±10.54 0.000 032**肺癌組 40 15.10±8.55 0.02*喉癌組 40 14.03±7.14 0.045*正常對照組 40 9.84±4.66

3 討論

PAI-1變化與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉移之間關系是PAI-1生物學功能研究領域廣為關注的熱點問題之一,本研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌、肺癌及喉癌患者血漿PAI-1濃度明顯高于正常對照組,結果與以往的研究相類似,進一步說明血漿PAI-1濃度變化在腫瘤診斷及治療的潛在價值。由于表達PAI-1除腫瘤細胞外,還包括肝細胞、肌纖維母細胞、血管內皮細胞、白細胞等正常細胞,近來研究還證明PAI-1濃度升高可能與炎癥、冠心病、動脈硬化等疾病有密切關系,另外PAI-1發(fā)揮生物學功能還與其濃度高低有直接關系[5,6,7],所以,血漿中PAI-1濃度變化只能作為腫瘤診斷輔助指標之一,還需參考其他指標對患者進行綜合診斷。

纖溶系統(tǒng)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉移等復雜過程起重要作用,纖溶系統(tǒng)中的纖溶酶可直接降解細胞外間質使瘤細胞向周圍浸蝕,其還可激活膠原酶及間質溶酶使腫瘤細胞能穿過血管壁的基底膜進入血管內,實現(xiàn)腫瘤的轉移。抑制纖溶系統(tǒng)可有效抑制腫瘤生長、浸潤及轉移[8]。而腫瘤患者血漿中PAI-1濃度較正常人群升高的事實說明,PAI-1在通過非酶解統(tǒng)途徑參與腫瘤生物學過程。事實上,有研究證明PAI-1主要是通過與細胞表面分子相互作用而實現(xiàn)其生物學功能的[9,10]。

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