汲宏磊,孔 儉,陳海燕,王 威,?？∑?/p>

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院,吉林 長(zhǎng)春130021)

血清C反應(yīng)蛋白(c reactive protein,CRP)除用于急性感染或炎癥的診斷評(píng)估及其活動(dòng)性的監(jiān)測(cè)外,與高血壓、冠心病、糖尿病、腦梗塞等疾病相關(guān)[1]。CRP可通過誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂和凋亡直接參與動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程,是高血壓病患者發(fā)生心腦血管疾病的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子[2]。研究證明低中強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后CRP水平下降[3],但對(duì)于高血壓患者低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)在降低血壓的同時(shí)對(duì)C反應(yīng)蛋白有何影響尚未見報(bào)道。本文選取自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR),進(jìn)行低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后,檢測(cè)血壓變化及CRP水平,觀察低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)SHR的CRP的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性SHR大鼠24只,8周齡,隨機(jī)分為2組:對(duì)照組12只和運(yùn)動(dòng)組12只。分籠(6只/籠)飼養(yǎng),標(biāo)準(zhǔn)固定混合飼料喂養(yǎng),自由飲水進(jìn)食。運(yùn)動(dòng)組SHR進(jìn)行無負(fù)重游泳,每次 60 min,每周5次,持續(xù)10周。水深 60 cm左右,泳池內(nèi)壁光滑,水溫30℃-32℃。

1.2 血壓測(cè)定 實(shí)驗(yàn)大鼠在清醒狀態(tài)下,采用無創(chuàng)傷尾部袖帶法,于實(shí)驗(yàn)前測(cè)定大鼠基礎(chǔ)血壓,實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)開始后每周測(cè)定大鼠安靜狀態(tài)下尾動(dòng)脈血壓。每次測(cè)量3次,取平均值。采用北京中日友好醫(yī)院生產(chǎn)的RBT-1型大鼠血壓測(cè)定儀。具體方法嚴(yán)格按照大鼠血壓儀測(cè)量定步驟進(jìn)行。

1.3 血樣制備 于實(shí)驗(yàn)結(jié)束游泳訓(xùn)練結(jié)束24 h后,將兩組大鼠依次用戊巴比妥腹腔注射(50 mg/kg)麻醉,腹主動(dòng)脈取血。離心 10 min(3 000 r/min)。-80℃保存。

1.4 CRP測(cè)定 采用雙抗夾心ELISA法。用純化的大鼠CRP單抗包被微孔板,制成固相抗體,加入樣品及標(biāo)準(zhǔn)品,依次加入生物素化的抗大鼠CRP抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色,用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)。

2 結(jié)果

各組大鼠飲食、飲水,日常活動(dòng)及皮毛狀態(tài)正常,實(shí)驗(yàn)過程中無大鼠意外死亡。大鼠血壓測(cè)量結(jié)果(見表1);大鼠C反應(yīng)蛋白檢測(cè)結(jié)果(見表2)。

表1 大鼠血壓測(cè)量結(jié)果(±s,mmHg)

表1 大鼠血壓測(cè)量結(jié)果(±s,mmHg)

*P＜0.05

分組 運(yùn)動(dòng)前 運(yùn)動(dòng)5w后 運(yùn)動(dòng)10w后SHR對(duì)照組 138±7 160±5 190±6 SHR運(yùn)動(dòng)組 143±5 156±4 165±5*

表2 大鼠C反應(yīng)蛋白檢測(cè)結(jié)果(±s)

表2 大鼠C反應(yīng)蛋白檢測(cè)結(jié)果(±s)

*P＜0.05

分組 C反應(yīng)蛋白檢測(cè)結(jié)果SHR對(duì)照組 40.78±3.27 SHR運(yùn)動(dòng)組 31.56±5.13*

3 討論

運(yùn)動(dòng)鍛煉對(duì)血壓有一定影響,而且不同運(yùn)動(dòng)量對(duì)血壓影響不同。Veras-Silva AS[4]先測(cè)出SHR大鼠的最大氧耗量(VO2max),然后將SHR分成兩組,分別按55%VO2max的運(yùn)動(dòng)量和85%VO2max的運(yùn)動(dòng)量進(jìn)行運(yùn)動(dòng)鍛煉18周,結(jié)果顯示,低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組的大鼠血壓下降,而高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組大鼠的血壓則沒有明顯變化。蔡恒[5]等選取10只WKY大鼠為正常對(duì)照組 ,另30只SHR隨機(jī)分為3組,分別為高血壓組、高血壓 +輕量運(yùn)動(dòng)組(每天間歇游泳訓(xùn)練30分鐘)、高血壓 +力竭性運(yùn)動(dòng)組(每天持續(xù)游泳訓(xùn)練12 0分鐘)。8周后測(cè)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)、心肌細(xì)胞凋亡率、左心室質(zhì)量指數(shù)、心肌間質(zhì)纖維化程度,并進(jìn)行掃描電鏡觀察。結(jié)果顯示輕度運(yùn)動(dòng)組左室舒張功能明顯改善,而力竭運(yùn)動(dòng)組的各項(xiàng)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)都產(chǎn)生惡化。SHR的心肌細(xì)胞凋亡率高于WKY大鼠,輕度運(yùn)動(dòng)可降低SHR的心肌細(xì)胞凋亡率,而力竭性運(yùn)動(dòng)進(jìn)一步促使SHR的心肌細(xì)胞凋亡率增高。提示高血壓的病理生理環(huán)境對(duì)心肌細(xì)胞有損害作用,適量的運(yùn)動(dòng)能保護(hù)心肌,而過量的運(yùn)動(dòng)則加劇心肌損害。說明力竭性運(yùn)動(dòng)可促使高血壓病程向心衰階段發(fā)展,而適量的運(yùn)動(dòng)可能對(duì)左室重塑產(chǎn)生有利影響。本文研究也顯示,對(duì)SHR大鼠進(jìn)行低強(qiáng)度鍛煉,到第5周時(shí)運(yùn)動(dòng)組與對(duì)照組相比血壓已有差異,但未達(dá)到有顯著差異。之后運(yùn)動(dòng)組血壓增加不明顯,而對(duì)照組血壓則逐漸增高,到第10周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)血壓已有顯著性差異。這顯示,低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)可以有效持續(xù)地降低SHR大鼠血壓,在藥物治療的基礎(chǔ)上重視運(yùn)動(dòng)鍛煉將能減少藥物用量,減少藥物副作用,并增加降壓達(dá)標(biāo)率。

多數(shù)研究認(rèn)為,低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)鍛煉可以降低CRP水平[3],尤其是CRP水平較高的患者,而對(duì)于CRP水平正常的健康人群可能無明顯作用[6]。本文研究顯示,SHR大鼠CRP水平明顯高于正常,進(jìn)行低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)10周后CRP水平明顯下降,差異有顯著性,這預(yù)示低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)鍛煉不僅明顯降低了SHR大鼠血壓而且同時(shí)可以減低高血壓病所致的心血管疾病并發(fā)癥。

運(yùn)動(dòng)降低CRP的機(jī)理目前并不清楚,研究顯示,低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)可明顯增強(qiáng)抗氧化酶(SOD)蛋白水平提高 SOD活性[7],抑制 p67phox、p22phox和gp91phox蛋白水平[8],從而減少氧化應(yīng)激的作用。低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)減低機(jī)體內(nèi)的胰島素抵抗,激動(dòng)proliferator-activated receptor gamma(PPAR gamma)的活性[9],降低RAS系統(tǒng)的活性都有助于減低體內(nèi)的CRP水平。

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