葉延青

資料表明，美國大約每年有2000萬婦女診斷為非典型鱗狀細胞宮頸病變(ASCUS;atypical squamous cell of undermined significance)。目前我們明確認識到人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌及癌前病變密切相關(guān)，HPV是導(dǎo)致宮頸癌的主要發(fā)病病因之一［1、2］。本文擬通過對200例陰道脫落細胞TBS分類檢查結(jié)果為ASC-US的女性患者行HPV-DNA檢測，探討HPV檢測對ASC-US分流監(jiān)測的臨床價值。報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選我院2005年1月1日至2009年12月31日在我院就診的陰道脫落細胞學(xué)TBS分類檢查結(jié)果為ASCUS婦女患者，共200例，其年齡介于19～54歲之間，平均年齡為(35.50±10.35)歲。其中20例為未婚有性生活史婦女，已絕經(jīng)24例，余為已婚婦女。

1.2 實驗方法

1.2.1 ASCUS的診斷與操作方法 本研究采用2001年TBS(the bethesda system)分級系統(tǒng)。官頸外口和頸管的脫落細胞經(jīng)Thinprep 2000系統(tǒng)自動制片機處理后，制成直徑為2cm薄層細胞涂片(TCT)后固定、染色等處理。同時采用2001年國際癌癥協(xié)會(NCI)推薦的新TBS分類標準分為未見上皮內(nèi)病變細胞或惡性細胞(negative for intraepithelial or malignancy，NILM)、其他(子宮內(nèi)膜細胞出現(xiàn)在40歲以后婦女的涂片)和上皮細胞異常(鱗狀上皮異常和腺上皮異常)。鱗狀上皮異常分為非典型鱗狀細胞，其中包括非典型鱗狀細胞(atypical squamous cell，ASC)、不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變的不典型鱗狀細胞(a-typical squamous cells，ASC.H)，統(tǒng)稱 ASCUS。ASCUS的診斷標準為:①細胞核增大，是正常中層細胞核的2.5～3.0倍，核漿比例輕度增大;②可能有細胞核形態(tài)改變或有雙核;③核染色質(zhì)輕度增加，但仍均勻分布，無顆粒片中的異常細胞僅有1～2個，不足以診斷鱗狀上皮內(nèi)病變(SIL)。二代雜交捕獲試驗檢測HPV高危型(HC2)，高危型HPV檢測值≥1 pg/ml為HPV陽性;＜1 pg/ml為HPV陰性。

1.2.2 HPV DNA(13種高危型)檢測方法 系采用二代雜交捕獲法{HC2法}，如Hybrid CaptureⅡ Systems(HCⅡ，Digene Corp.，USA)。這是利用一種非同位素信號放大系統(tǒng)并基HPV-DNA雜交到溶液中標記 RNA探針的方法。結(jié)合后DNA-RNA雜交體被微孔板所捕獲并被隨后所加的特異性單克隆抗體和化學(xué)發(fā)光底物所檢測。該法可對HPV-DNA進行定量分析。此系統(tǒng)應(yīng)用兩組不同的混合探針(即所謂的雞尾酒探針)，一組含有 HPV-6、HPV-11、HPV-42、HPV-43 和 HPV-44型5種LR探針，而另一組則含有 HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-56、HPV-58、HPV-59和HPV-68型13種HR探針。HCⅡ為目前唯一以商品形式提供的，且有足夠的科學(xué)正據(jù)支持其應(yīng)用于臨床的檢測系統(tǒng)。該方法得到美國FDA認證，已成為許多國家的標準方法并被廣泛應(yīng)用于臨床研究中。

2 結(jié)果

本資料200例ASC-US患者中，高危型HPV陽性者54例(27%)。這與別人的研究相一致［2］。結(jié)果見下表1。

表1 200例ASCUS患者中UPV陽性數(shù)與點比例(例，%)

3 討論

未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細胞(AS-cus)的定義為:介于正常鱗狀細胞與異常鱗狀細胞之間的一組細胞，其鱗狀細胞的異常是指明顯超過細胞反應(yīng)性改變但在數(shù)量與質(zhì)量上又沒達到鱗狀上皮內(nèi)瘤變的診斷標準。大量資料表明，未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細胞的發(fā)病原因主要有可能與炎癥發(fā)生相關(guān)，與刺激有關(guān)，與宮內(nèi)節(jié)育器有關(guān);與刮片采取固定不好有關(guān);可能有癌前病變;可能有癌存在等［2］。由于細胞涂片缺乏完整的組織形態(tài)，所提供的信息有限，難以對一些輕微的細胞病變明確是正常或是鱗狀上皮內(nèi)瘤變(SIL)［3］。

近年來，美國陰道鏡與宮頸病理協(xié)會科學(xué)家們提出5種AS-cus的治療方案:重復(fù)細胞學(xué)檢查，立即陰道鏡檢查，高危型HPV檢測(眾所周知，HPV是小型雙鏈DNA病毒。其感染具有種屬特異性，主要引起高級脊椎動物的上皮細胞發(fā)生增殖以及乳頭瘤樣改變。HPV有多種類型，常見的低危型是6，11，42，43，44;常見的高危型是 16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，59，68。大量的研究發(fā)現(xiàn)，HPV高危感染常引起生殖道惡性腫瘤，特別與宮頸癌之間有著密切的聯(lián)系)。高危型HPV檢測具有分流作用，陰性者繼續(xù)隨診，陽性者則需立即陰道鏡檢查，從而可降低陰道鏡檢查率而又有較高的宮頸病變的檢出率。根據(jù)篩查結(jié)果進行定向分流，篩查高風(fēng)險人群，便于進行有效監(jiān)控，以便臨床醫(yī)生早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌變［4］。如果只有HPV-DNA檢測結(jié)果為陽性，細胞學(xué)檢查結(jié)果陰性，表明尚未引起病變，可暫不予處理，但要隨訪觀察，6～12個月后復(fù)查細胞學(xué)和HPV-DNA檢測，如二者均為陰性，可3年后再進行篩查，對于細胞學(xué)和HPV檢查異常者應(yīng)積極行陰道鏡檢查和宮頸活體組織學(xué)檢查。

本研究200例ASC-US女性患者中，高危型HPV陽性者54例(27%)。這與別人的研究相一致［2］。本研究進一步證實HPV檢查對ASCUS可提高官頸病變篩查的陽性率，減少癌前病變的漏診，有一定的臨床檢測意義。

［1］Bdsch F X，Mundzx N，ChinaTedn S，et al.The causal relation between human papillomavinus cervical cance.J Clinpathol，2002，55:244.

［2］陳棠嬌.156例未明確診斷意義的宮頸鱗狀細胞HPV感染分析.現(xiàn)代醫(yī)院，2006，6(4):52-53.

［3］朱鳴萍.106例意義不明確的宮頸不典型鱗狀上皮細胞的病理診斷.腫瘤學(xué)雜志，2008，14(6):487-489.

［4］魯菊英，李國輝.宮頸細胞學(xué)未明確意義的不典型鱗狀上皮細胞的診斷.中國生育健康雜志，2009，20(3):172-175.