王學(xué)梅，許 麗

（1.海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院，?？?570228；2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030）

大豆黃酮（Da）屬于異黃酮類植物雌激素之一，主要存在于大豆等豆科的蝶形花亞科植物中，是一種天然的有效活性成分，具有弱的雌激素和抗雌激素活性，在內(nèi)源激素水平較低時，其可與雌激素受體結(jié)合，表現(xiàn)雌激素激動劑作用，而在機(jī)體雌激素水平較高時，則競爭性結(jié)合雌激素受體表現(xiàn)抗雌激素作用[1]。膳食中的異黃酮具有防癌和抗癌的作用，近年來動物營養(yǎng)研究表明，大豆黃酮具有促進(jìn)動物生長、增加產(chǎn)蛋、增強(qiáng)免疫力、調(diào)節(jié)動物繁殖等生理功能，是一種具有廣闊開發(fā)前景的新型飼料添加劑。本試驗通過在產(chǎn)蛋雞飼糧中添加大豆黃酮探討其對蛋雞產(chǎn)蛋后期生產(chǎn)性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料和動物

大豆黃酮純度大于98%，試驗動物為66周齡海蘭褐商品蛋雞。

1.2 試驗設(shè)計

試驗采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計。選用體況良好，產(chǎn)蛋率、體重相近的66周齡的海蘭褐產(chǎn)蛋后期試驗雞72只，隨機(jī)分成4組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)6只。以海南華星飼料廠生產(chǎn)的華星牌113中雞配合飼料（玉米－豆粕－雜粕型）為基礎(chǔ)日糧，對照組（Ⅰ）飼喂基礎(chǔ)日糧，各試驗組分別在基礎(chǔ)日糧中添加大豆黃酮10mg·kg－1（Ⅱ）、20mg·kg－1（Ⅲ）、30 mg·kg－1（Ⅳ）。預(yù)飼期3 d，正飼期30 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗預(yù)飼期結(jié)束后計算平均耗料量，確定試驗期投料量。正飼期采取定量投料限飼方式。試驗雞采用3層階梯式籠養(yǎng)，同一列3個籠為一個重復(fù)單位，定量采食，自由飲水，光照16 h·d－1，進(jìn)行常規(guī)的免疫，每日以重復(fù)為單位，記錄產(chǎn)蛋數(shù)、產(chǎn)蛋量和畸形蛋數(shù)。

1.4 檢測指標(biāo)

1.4.1 產(chǎn)蛋率和蛋重

以重復(fù)為單位，計算各重復(fù)平均蛋重和產(chǎn)蛋率。

1.4.2 蛋殼厚度的測定

每個處理隨機(jī)取3枚蛋用游標(biāo)卡尺測量蛋殼大頭、小頭、中段厚度（精確到0.02 mm），平均值即為蛋殼厚度。

1.4.3 蛋中蛋白質(zhì)、鈣和磷含量的測定

試驗結(jié)束時，以處理組為單位每個處理隨機(jī)取3枚蛋，用真空冷凍干燥法將雞蛋制成凍干樣，待測。用凱氏定氮法（GB/T 5009.5－1985）測定蛋白質(zhì)含量。用高錳酸鉀滴定法測定鈣含量，用釩鉬酸銨顯色法測定磷含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析

試驗所得數(shù)據(jù)用SAS 6.12軟件中的GLM過程進(jìn)行方差分析，用Duncan′s進(jìn)行多重比較，結(jié)果以X±SD表示。

2 試驗結(jié)果

2.1 產(chǎn)蛋性能

不同處理對產(chǎn)蛋性能的影響結(jié)果見表1。

表1 不同處理對產(chǎn)蛋性能的影響

由表1可知，添加適量大豆黃酮能在一定程度上提高產(chǎn)蛋率和蛋重。其中，Ⅱ組、Ⅲ組產(chǎn)蛋率分別比對照組提高了9.59%、2.60%，而Ⅳ組產(chǎn)蛋率比對照組下降了0.64%。試驗組與對照組之間差異均不顯著（P＞0.05）。由此可見，低濃度Da可提高產(chǎn)蛋率，而高濃度的Da則導(dǎo)致產(chǎn)蛋率的下降。同時，添加Da還能使蛋重增加，試驗組蛋重均高于對照組但差異不顯著（P＞0.05）。

由表1可知，試驗組蛋殼厚度和蛋殼重均與對照組差異顯著（P＜0.05），而試驗組之間差異不顯著（P＞0.05）。其中，試驗Ⅱ組蛋殼厚度和蛋重最高，即添加Da 10mg·kg－1對增加蛋殼厚度的效果最好。

2.2 蛋中營養(yǎng)物質(zhì)沉積

不同處理對蛋成分的影響見表2。

表2 不同處理對蛋成分的影響 %

由表 2可知，Ⅲ組、Ⅳ組與對照組相比，CP含量差異顯著（P＜0.05），而各個試驗組間差異不顯著（P＞0.05）。Ⅰ組與Ⅱ組差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)果表明，添加大豆黃酮使蛋中蛋白質(zhì)的沉積量下降，且隨著添加量越大，蛋白質(zhì)含量越低。

由表2可知，飼糧中添加大豆黃酮可極顯著提高蛋中鈣沉積量（P＜0.01）。其中Ⅲ組、Ⅳ組與Ⅰ組、Ⅱ組間差異極顯著（P＜0.01），而Ⅰ組與Ⅱ組、Ⅲ組與Ⅳ組間差異不顯著（P＞0.05），且隨著Da添加量的增加，蛋中鈣的沉積量顯著增加。添加Da對蛋中磷的沉積也有促進(jìn)作用，但差異不顯著（P＞0.05），隨著Da添加量的增加，蛋中磷的沉積量增加。

3 討論

3.1 對產(chǎn)蛋性能的影響

3.1.1 對產(chǎn)蛋率和蛋重的影響

大豆黃酮提高禽類產(chǎn)蛋性能可能主要通過中樞途徑發(fā)揮作用。一是大豆黃酮降低下丘腦中GH和IGF－Ⅰ受體水平，以減弱GH和IGF－Ⅰ的負(fù)反饋作用，并增加垂體GH的表達(dá)，維持血清中較高的GH和IGF－Ⅰ水平，從而提高其產(chǎn)蛋性能[2]。二是大豆黃酮提高GnRH的基因表達(dá)，促進(jìn)FSH和LH的釋放，從而增強(qiáng)卵巢E2的產(chǎn)生，通過高水平的E2來提高產(chǎn)蛋性能[3－4]。研究表明，體內(nèi)狀態(tài)下或腦內(nèi)灌注大豆黃酮均可改變GnRH的分泌，促進(jìn)LH的釋放，并且調(diào)節(jié)垂體GnRH受體水平[5－6]。周玉傳等試驗表明，大豆黃酮能夠顯著提高紹興鴨的產(chǎn)蛋性能，并促進(jìn)下丘腦GnRH基因表達(dá)水平，說明大豆黃酮可能通過禽類的高級神經(jīng)中樞調(diào)控其產(chǎn)蛋性能[7]。但是，大豆黃酮GnRH基因表達(dá)是直接還是間接作用尚需進(jìn)一步研究探討。

本試驗結(jié)果表明，添加大豆黃酮的試驗組產(chǎn)蛋性能均有改善，但試驗組與對照組相比差異均不顯著（P＞0.05）。而馬學(xué)會研究表明，在產(chǎn)蛋后期雞日糧中添加大豆黃酮，添加Da組的產(chǎn)蛋率均顯著高于對照組（P＞0.05）[8]。當(dāng)添加大豆黃酮 20 mg·kg－1時，產(chǎn)蛋率最高，比對照組提高14.56%，差異極顯著（P＜0.01）；而添加大豆黃酮 30mg·kg－1時，產(chǎn)蛋率又有下降趨勢。同時，所有添加大豆黃酮組蛋重均有所提高，當(dāng)添加10mg·kg－1時，蛋重達(dá)到最大值且與其他處理組比較差異顯著（P＜0.05）；當(dāng)添加 20、30mg·kg－1時，蛋重有下降趨勢，兩組之間差異不顯著（P＞0.05）。與本試驗結(jié)果差異較大。分析其原因有以下兩個方面：一是與飼養(yǎng)環(huán)境有關(guān)。試驗期間正處本地氣溫較高的季節(jié)，時常有雷雨天氣。因此，有可能是高溫等原因使產(chǎn)蛋雞處于熱應(yīng)激狀態(tài)，而Da具有抗應(yīng)激作用，從而使Da因為對抗機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)而對產(chǎn)蛋率和蛋重的影響不顯著[9]。二是與試驗設(shè)計有關(guān)。本試驗為了使每只雞攝入的Da量盡量保持一致，因此先測各處理的平均耗料量，再以此耗料量為基礎(chǔ)，采取定量投料的方式飼養(yǎng)。左偉勇等研究表明，在飼料中添加 Da使產(chǎn)蛋初期母雞攝食量增加4.32%，產(chǎn)蛋高峰期母雞攝食量增加7.95%（P＜0.01）[10]。因此，有可能是因為飼喂Da后沒有讓雞任意采食，沒有滿足雞的營養(yǎng)需要，從而導(dǎo)致產(chǎn)蛋率和蛋重提高不顯著。

3.1.2 對蛋殼品質(zhì)的影響

蛋殼強(qiáng)度和厚度隨產(chǎn)蛋雞年齡增加而降低，說明產(chǎn)蛋后期雞對鈣的吸收能力減弱。而雌激素能提高 1α－羥化酶（1α－Hydroxylaser）的活性，促進(jìn)血中25－（OH）－維生素 D3到活性維生素 D3，即 1,25－（OH）2－維生素D3的轉(zhuǎn)化，雌激素還可直接作用于腸黏膜1,25－（OH）2－維生素D3受體，提高對鈣的吸收。所以，雌激素的活力可使血鈣升高[8,11]。大豆黃酮屬于植物性雌激素，在飼糧中添加大豆黃酮可增加蛋殼厚度和蛋殼重，從而降低破蛋率，改善蛋殼品質(zhì)。本試驗研究結(jié)果表明，試驗組蛋殼重、蛋殼厚度與對照組相比均差異顯著（P＜0.05），試驗組間差異不顯著（P＞0.05）。尤其是添加 10 mg·kg－1時，對蛋殼重、蛋殼厚度的影響最大。此試驗結(jié)果與馬學(xué)會等的研究一致[8,11]。說明大豆黃酮可能增加產(chǎn)蛋后期雞對鈣的吸收，這可能與雌激素的活力可使血鈣升高的機(jī)理是一致的，但對這一作用及其作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步驗證。

3.2 對蛋中營養(yǎng)物質(zhì)沉積的影響

3.2.1 對蛋中蛋白質(zhì)沉積的影響

大豆黃酮具有促進(jìn)動物生長的作用，可能的機(jī)制是：Da與下丘腦、垂體等處的雌激素受體不同程度的結(jié)合，影響動物神經(jīng)內(nèi)分泌的性腺軸和生長軸，使睪酮、生長激素（GH）和胰島素樣生長因子（IGF－Ⅰ）產(chǎn)生和釋放增加，而睪酮、GH、IGF－Ⅰ均能直接促進(jìn)肌肉和蛋白合成代謝，最終導(dǎo)致動物的肌肉肥大，生長加速[12]。本試驗結(jié)果表明，對照組與20和30 mg·kg－1組蛋白質(zhì)沉積量差異顯著（P＜0.05），而與 10mg·kg－1組差異不顯著（P＞0.05）。說明Da對蛋中CP的沉積有抑制作用。由于大豆黃酮具有雌激素和抗雌激素的雙重生物活性，其發(fā)揮作用取決于靶器官受體數(shù)目以及動物機(jī)體的激素水平，故Da導(dǎo)致蛋中蛋白質(zhì)沉積量的減少可能與所選試驗動物的生理階段以及輸卵管上受體數(shù)目有關(guān)，其作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

3.2.2 對蛋中鈣和磷沉積的影響

大豆黃酮可通過內(nèi)分泌途徑改變蛋雞的內(nèi)源激素水平及鈣磷代謝，從而影響生產(chǎn)性能。在飼料中添加Da 3 mg·kg－1可使蛋雞產(chǎn)蛋率和只日蛋重均顯著增加，料蛋比顯著下降；血清總鈣水平和堿性磷酸酶活性提高，無機(jī)磷水平呈下降趨勢[11]。本試驗結(jié)果表明，當(dāng)添加Da 20、30 mg·kg－1時，試驗組蛋中鈣的沉積量與對照組差異極顯著（P＜0.01），但10mg·kg－1組與對照組差異不顯著（P＞0.05）。而試驗組中磷的沉積與對照組差異均不顯著。說明Da能促進(jìn)蛋中鈣的沉積，而對磷的沉積作用雖有提高但影響不顯著。蛋殼形成需要大量的鈣，必需從循環(huán)的血液中攝取鈣。在蛋殼形成期，所有進(jìn)入子宮部的鈣都由血液提供，血液中的鈣來自飼糧和骨組織。研究表明，大豆黃酮具有雌激素樣作用，可使血鈣升高，使蛋殼中鈣的沉積增加，從而增加蛋殼厚度和蛋殼重[12]。因此，蛋中鈣的沉積量的增加，也是由于Da提高血鈣的機(jī)制。

4 結(jié)論

本次試驗結(jié)果表明，大豆黃酮可以提高產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能。能促進(jìn)鈣的吸收，提高蛋殼厚度和蛋殼重，改善蛋殼品質(zhì)；能增加蛋中鈣的沉積量，而對蛋中蛋白質(zhì)的沉積有抑制作用。

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