吳敏華 容伯芬 陳妙嬋

惡性血液病是造血干細(xì)胞的克隆性疾病，染色體畸變則是惡性血液病的克隆標(biāo)記。越來越多的研究表明，骨髓染色體核型分析對惡性血液病的治療選擇、預(yù)后估計以及發(fā)病機制的探討都有很大的價值，筆者對我院63例惡性血液病患者進行骨髓細(xì)胞染色體核型分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料 2008年10月～2009年12月來我院就診的惡性血液病患者共63例，其中男36例，女27例，年齡17～61歲。

1.2 方法 抽取血液病患者骨髓，骨髓抽取量應(yīng)視外周血白細(xì)胞計數(shù)而定。采用短期培養(yǎng)法將骨髓經(jīng)有核細(xì)胞計數(shù)按一定的細(xì)胞密度[(1～3)×106/ml]接種到培養(yǎng)基內(nèi)，經(jīng)過24h培養(yǎng)后收獲細(xì)胞制片。制片后進行熱處理姬姆薩R顯帶，再用Giemse液染色。分析20～25中期分裂相。先用低倍鏡尋找合適的分裂相，再換用油鏡進行觀察。油鏡下觀察一個分裂相時，先計數(shù)染色體數(shù)目，確定數(shù)目有無異常，然后逐條審視其核型，以檢出結(jié)構(gòu)異常。核型分析參照《人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制(ISCN)(1995)》的有關(guān)規(guī)定進行核型分析[1]。

2 結(jié)果

63例惡性血液病中骨髓染色體核型結(jié)果異常有29例，陽性率為46%。其中11例慢性粒細(xì)胞白血病(CML)患者有10例核型帶有費城染色體(PH)。在急性粒細(xì)胞白血病(AML)中原粒細(xì)胞白血病部份分化型(M2)核型異常有8例，早幼粒細(xì)胞白血病(M3)有7例異常。慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)1例異常。其他惡性血液病中異常的有：骨髓異常增生綜合征(MDS)2例，骨髓纖維化(MF)1例。核型結(jié)構(gòu)異常分析結(jié)果見表1。

表1 骨髓染色體核型異常分析結(jié)果

3 討論

雖然多數(shù)CML患者有較為典型的臨床及血液學(xué)表現(xiàn)，但最終確診還是依賴于發(fā)現(xiàn)特征性Ph染色體。Ph染色體作為CML的細(xì)胞遺傳學(xué)特征性標(biāo)記具有特殊意義。Ph+CML患者出現(xiàn)新的額外異常染色體，病情多難以控制，Ph+CML額外染色體的出現(xiàn)預(yù)示著預(yù)后不良[2]。在急性粒細(xì)胞白血病中，90%的M2B型白血病細(xì)胞可發(fā)現(xiàn)特異的染色體易位t(8:21)(q22:q22)，這種白血病細(xì)胞有一定的分化能力，對化療反應(yīng)較好。約85%的AML-M3包括多顆粒和微顆粒型均可檢出t(15;17)，因而成為該型白血病高度特異性的細(xì)胞遺傳學(xué)標(biāo)志[3]。臨床上凡具有t(15;17)易位對維甲酸和坤劑治療有效，反之則無效[4]。MDS作為惡性克隆性疾病，染色體改變在疾病的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。大約40%～70%的MDS有克隆性染色體畸變[5]，研究發(fā)現(xiàn)，隨著克隆性染色體異常核型的出現(xiàn)和數(shù)量的增多，MDS患者出現(xiàn)白血病轉(zhuǎn)化率增高、白血病轉(zhuǎn)化時間縮短、病死率增高、生存時間縮短的趨勢[6]。CLL患者核型很少發(fā)生演變，一旦發(fā)生則往往提示預(yù)后不良。骨髓纖維化核型異常演變意味著向白血病轉(zhuǎn)化。

總之，血液系統(tǒng)中染色體核型改變具有獨特的診斷意義，可作為監(jiān)測急性白血病緩解、復(fù)發(fā)和CML急變的指標(biāo)，同時有助于發(fā)現(xiàn)預(yù)后差的克隆性異常，能及時提醒臨床醫(yī)生尋找更有效的化療方案，進行骨髓移植或免疫治療。

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