楊秀芳, 伍發(fā)云, 馬養(yǎng)民, 傅建熙, 石芳萍

(1.教育部輕化工助劑化學(xué)與技術(shù)重點實驗室,陜西科技大學(xué),陜西 西安 710021；2.陜西全昌榮生物科技有限公司, 陜西 楊凌 712100；3.陜西英考鴕鳥股份有限公司, 陜西 西安 710014)

0 引言

鴕鳥(ostrich)原產(chǎn)于非洲北部草原和阿拉伯沙漠地帶，是動物界現(xiàn)存鳥類中最大的一種鳥.目前的鴕鳥產(chǎn)品主要包括肉、皮、蛋、羽毛等，是高檔食品、名貴皮革、工藝品、高級化妝品、藥品和裝飾材料的重要原料[1].鴕鳥油(ostrich oil)來源于鴕鳥身體的脂肪，含有一系列長鏈脂肪酸，其組成因其種屬、飼養(yǎng)地點、提取工藝和儲存方式及時間等其他多種因素的不同而有差異[2],但其主要脂肪酸的含量還是在一定范圍內(nèi)波動，一般含有肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸等，其中油酸含量最高.鴕鳥油具有極強的藥用功能，關(guān)于它的最早報道是澳洲土著人對鴯鹋油(澳洲鴕鳥)的使用，后來人們又發(fā)現(xiàn)，如果鴕鳥骨折，只要站立兩分鐘就自動修復(fù)好了，目前認為是鴕鳥脂肪中的特殊因子起了作用，它可在 3～15 秒內(nèi)修復(fù)損傷細胞，正是由于這種神奇功效，鴕鳥油被稱為“神油”.研究發(fā)現(xiàn),鴕鳥油有消炎鎮(zhèn)痛的作用，用它涂抹身體可治療多種皮膚病、肌肉疼痛、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕、燒傷燙傷等[3].由于試驗鴕鳥油產(chǎn)自中國，其化學(xué)成分含量和種類會發(fā)生一定變化，活性也會受到相應(yīng)的影響，所以筆者在實驗中選擇幾種細菌以驗證鴕鳥油的活性.

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 動物材料

鴕鳥來自于陜西英考鴕鳥股份公司養(yǎng)殖場，由納米比亞引進，屠宰成年鴕鳥，取其肌下脂肪，用索氏提取器乙醚做溶劑進行提取.采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析鴕鳥油的組成，其主要成分為棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸等及少量萜類化合物.將鴕鳥油保存在4 ℃?zhèn)溆?

1.1.2 供試菌種

綠膿桿菌(Pseudomonasaeruginosa)；乳鏈球菌(Streptococcuslactis)；金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)；大腸桿菌(Escherichiacoli)；枯草芽孢桿菌(Bacillussubtils)；青霉菌(Penicilliumglaucum)；白色念珠菌(Candidaalbicans)；黑曲霉(Aspergillusniger).

1.1.3 培養(yǎng)基

細菌培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏3.5 g，蛋白胨10 g，NaCl 5 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，pH 7.0～7.2.真菌培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1000 mL，pH自然.

1.2 實驗方法

1.2.1 菌懸液的制備

把各個測試菌菌種用營養(yǎng)瓊脂活化后，挑取少許新鮮的菌絲體放入5 mL無菌水中，混合均勻后，用注射器移取一滴于血球計數(shù)器載玻片小室內(nèi)，蓋上蓋玻片(注意排除氣泡)，顯微鏡下進行計數(shù)，最后配成濃度為106cfu/mL的各種菌懸液備用.

1.2.2 鴕鳥油抗菌定性實驗[4]

用無菌移液管移取0.3～0.5 mL配好的菌懸液于倒好的平板上，用涂布器均勻涂好，備用,每個菌種制2個平板.

在每個營養(yǎng)平板中加入4片濾紙片，并使濾紙片展平.在每個培養(yǎng)平板的3個濾紙片上分別滴加鴕鳥油10 μL，另一濾紙片作對照.其中真菌培養(yǎng)皿放在28 ℃下培養(yǎng)48 h后進行觀察記錄，細菌培養(yǎng)皿放在37 ℃下培養(yǎng)24 h后進行觀察記錄.測量其抑菌圈的大小，根據(jù)抑菌圈的大小來判斷活性的強弱，抑菌圈大，則表明其活性強，抑菌圈小則表明其活性弱.

1.2.3 鴕鳥油最佳抗菌濃度的測定

將鴕鳥油分別配成4 mg/mL，8 mg/mL，12 mg/mL，16 mg/mL，20 mg/mL，24 mg/mL，28 mg/mL的丙酮溶液,然后取濾紙片(Φ=0.6 cm，已滅菌)浸沒于以上配制的丙酮溶液中，使其充分飽和，略微風(fēng)干后，接于上述制作好的含菌培養(yǎng)皿中，每個組分對測試菌分別作2個重復(fù)，丙酮作為空白對照.將制好后的培養(yǎng)皿在28 ℃恒溫培養(yǎng)48 h后觀察(真菌)，而細菌培養(yǎng)皿在37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h后觀察, 測量其抑菌圈的大小[5].

表1鴕鳥油對3種有抗性供試菌種抗菌圈的測定

供試菌種抗菌圈直徑綠膿桿菌13.5±0.5白色念珠菌10.8±0.7青霉菌9.0±1.0

2 實驗結(jié)果與討論

2.1 鴕鳥油抗菌定性實驗

鴕鳥油的定性抗菌實驗結(jié)果表明鴕鳥油對白色念珠菌、綠膿桿菌和青霉3種供試菌有抗性(見表1)，對另外的5種供試菌沒有抗性，其中對綠膿桿菌的抗性最強，對青霉的抗性最弱.在對8種菌的空白對照的平皿中沒有檢測到抗菌圈.

表2 各濃度鴕鳥油對3種有抗性供試菌的抑菌圈的測定(單位：mm)

注：/表示沒有抑菌圈.

2.2 鴕鳥油最佳抗菌濃度的測定

各濃度鴕鳥油的抗菌性見表2，從中看出，鴕鳥油對于綠膿桿菌的抗性最強，當(dāng)濃度為20 mg/mL時最大抑菌圈達到14 mm；其次是白色念珠菌，鴕鳥油對它的抗菌濃度為4，20，28 mg/mL；青霉菌在鴕鳥油濃度為20和28 mg/mL時也有較強的抗菌性.由此說明鴕鳥油對于3種有抗性的供試菌的最佳抗菌濃度為20 mg/mL.

3 結(jié)束語

鴕鳥油成分復(fù)雜，本實驗所用的鴕鳥油主要含棕櫚酸、油酸、亞油酸及少量萜類化合物.有文獻報道產(chǎn)自澳大利亞的鴕鳥油在體外實驗中對綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌有抗菌性[6]，而本實驗結(jié)果顯示產(chǎn)自陜西西安的鴕鳥油對金黃色葡萄球菌沒有抗性而對白色念珠菌和青霉有較好的抗性，可能是因為鴕鳥油中抗菌活性成分的含量不同所致，但還需要進一步實驗加以證實.

在鴕鳥油的定性抗菌試驗中，綠膿桿菌對鴕鳥油的敏感性很高，其它供試菌未出現(xiàn)抑菌圈，可能是敏感性相對較低的緣故.由于實驗條件限制，沒有對一些特殊致病菌進行實驗，今后還需要進行這方面的研究.從鴕鳥油的最佳抗菌濃度的實驗中可以看出對于鴕鳥油這種特殊的抗菌動物油來說并不是濃度越高抗菌性越好，因為高濃度的油脂反而會為供試菌提供營養(yǎng)成分而使抗菌性降低，因此只有濃度適中才能有較好的抗菌性.

目前國內(nèi)外對于鴕鳥油的各種活性已進行了大量的研究，而對其作用機制的研究剛剛起步，這將成為今后鴕鳥油研究的發(fā)展方向.

[1]薛旭初，潘巨忠，黃鴻鳴，等.我國鴕鳥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展現(xiàn)狀及展望[J].溫州農(nóng)業(yè)科技，2006,(1)：5-7.

[2]李 娟，李小瑞.鴯鹋油的綜合開發(fā)利用[J].精細與專用化學(xué)品，2003，24：14-15.

[3]吳曉英，張聚寶，林 影.平胸類鳥油的開發(fā)與利用[J].中國家禽，2005，27(5)：45-47.

[4]楊森艷，姚 雷.檸檬草精油抗菌性研究[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)科學(xué)版)，2005，23(4)：374-382.

[5]施巧琴，吳松剛.工業(yè)微生物育種學(xué)(第二版)[M].北京：科學(xué)出版社，2003：69-72.

[6]邱學(xué)文，王甲漢，方小文，等.鴯鹋油對燙傷大鼠炎癥反應(yīng)的影響[J].廣東醫(yī)學(xué)，2005，26(2)：169-171.