張先福 韋 強(qiáng) 鮑國(guó)連 季權(quán)安 龐安娜
研究中藥復(fù)方黃連湯水提醇沉濃縮物(Ethanol extracts Copitdis of Coptidis rhizoma decoctiOn,EcCrd)對(duì)鴨疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)的體外抑菌規(guī)律及其對(duì)菌體形態(tài)的影響。黃連湯經(jīng)水提醇沉后,減壓濃縮,制成含生藥176 g·L-1的EcCrd原液。用PBS將原液倍比稀釋成88、88×2-1、88×-2……88×2-9g·L-1等11個(gè)梯度濃度的藥液。用紙片擴(kuò)散法和液體倍比稀釋法研究EcCrd完全抑菌時(shí)的最小抑菌濃度和不完全抑菌時(shí)的亞抑菌濃度;取88和88×2-3g·L-1EeCrd濃度組藥液分別作用17和3、6、17 h后的細(xì)菌,用透射電鏡觀察菌體形態(tài)的變化。紙片擴(kuò)散法和液體倍比稀釋法測(cè)定的EcCrd完全抑制RA時(shí)的最小濃度均為88×2-2g·L-1,不完全抑菌時(shí)亞抑菌濃度為88×2-3·L-1;88×2-1g·L-1以上稀釋度EeCrd基本無(wú)抑菌活性;50μL的88g·L-1濃度組的EcCrd作用RA 17 h后,RA菌體濃縮,變小,最終死亡;50μL的88×2-3g·L-1濃度組的EcCrd作用RA3、6、17h后,RA菌體長(zhǎng)度變長(zhǎng),細(xì)胞壁變薄,菌內(nèi)顏色變淺,皺褶減少,紋理不均勻,菌體干癟、折疊、彎曲,最終死亡。EcCrd可能通過(guò)破壞RA外膜結(jié)構(gòu)來(lái)抑制細(xì)菌增殖。