馬曉露，劉 艷，李艷蓮

(大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011)

尿液的組成和性狀可以反映機(jī)體的代謝情況，并受機(jī)體各系統(tǒng)功能狀態(tài)的影響。因此，尿液檢測(cè)不僅對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病的診斷、療效觀察[1]，而且對(duì)其他系統(tǒng)疾病的診斷及協(xié)助診斷、預(yù)后判斷也有重要參考價(jià)值。尿液分析因其標(biāo)本留取方便快捷和無(wú)創(chuàng)傷性在目前臨床工作中的應(yīng)用已越來(lái)越廣泛，是臨床中僅次于血液的最主要的檢查手段。尿液中有形成分的分析是尿液分析中重要的組成部分之一。其有形成分主要包括：白細(xì)胞、紅細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型 、結(jié)晶 、細(xì)菌等等。本文對(duì)AX-4280尿干化學(xué)分析儀和UF-1000i尿沉渣分析儀及尿沉渣計(jì)數(shù)盤(pán)對(duì)尿液有形成分檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析，通過(guò)比較多個(gè)參數(shù),希望得到一個(gè)顯微鏡復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)。以指導(dǎo)臨床實(shí)驗(yàn)室工作，從而在保證結(jié)果準(zhǔn)確的前提下節(jié)省人力和時(shí)間。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

AX-4280尿干化學(xué)分析儀(日本)、UF-1000i尿沉渣分析儀(日本)、一次性尿沉渣計(jì)數(shù)盤(pán)、尿液離心管、OLYMPUS光學(xué)顯微鏡。

1.2 標(biāo)本來(lái)源

2009年10月～12月，采集大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院門(mén)診患者隨機(jī)新鮮尿液標(biāo)本500例。

1.3 方 法

隨機(jī)選取大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院門(mén)診患者的新鮮尿液20 mL，將尿液混合后，取10 mL依次用AX-4280尿干化學(xué)分析儀和UF-1000i尿沉渣分析儀對(duì)其進(jìn)行全自動(dòng)分析。余10 mL尿液于離心管中進(jìn)行離心，1500 r/min，離心5 min。棄上清留取0.2 mL，混合后用毛細(xì)吸管取10 μL沖入計(jì)數(shù)盤(pán)中進(jìn)行有形成分的計(jì)數(shù)(需要2 h內(nèi)完成檢測(cè))。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

遵循《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》規(guī)定顯微鏡尿沉渣計(jì)數(shù)正常值為紅細(xì)胞0～4.5個(gè)/μL(男)，0～7個(gè)/μL(女)；白細(xì)胞0～6個(gè)/μL(男)，0～14個(gè)/μL(女)；管型為0個(gè)/μL。 UF-1000i尿沉渣分析儀的正常范圍為紅細(xì)胞0～25個(gè)/μL，白細(xì)胞0～15個(gè)/μL，管型0～2個(gè)/μL。超出正常范圍則視為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)均采用SPSS 11.5軟件中的χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。P<0.05為差異有顯著性意義。

2 結(jié) 果

2.1 AX-4280尿干化學(xué)分析儀和UF-1000i尿沉渣分析儀

儀器檢測(cè)結(jié)果均為陰性者共164例，同時(shí)進(jìn)行尿有形成份顯微鏡計(jì)數(shù)，比較UF-1000i與顯微鏡沉渣計(jì)數(shù)的符合程度。兩組間差異無(wú)顯著性意義，因此，當(dāng)AX-4280尿干化學(xué)分析儀和UF-1000i尿沉渣分析儀結(jié)果均為陰性時(shí)，可以不用做鏡檢分析,結(jié)果見(jiàn)表1。

1)、2)和3)與沉渣鏡檢結(jié)果比較,P均>0.05

2.2 UF-1000i尿沉渣分析儀檢測(cè)RBC 、WBC及CAST

結(jié)果均為陰性而干化學(xué)BLD、LEU及PRO結(jié)果為不同程度陽(yáng)性時(shí)，UF-1000i與顯微鏡兩種方法所得沉渣結(jié)果的對(duì)比分析如下。

2.2.1 UF-1000i尿沉渣分析儀RBC： 結(jié)果為陰性而干化學(xué)BLD結(jié)果為陽(yáng)性者共79例，評(píng)價(jià)顯微鏡沉渣鏡檢與全自動(dòng)沉渣分析儀檢測(cè)數(shù)據(jù)的相關(guān)性，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2.2 UF-1000i尿沉渣分析儀WBC： 結(jié)果為陰性而干化學(xué)LEU結(jié)果為陽(yáng)性者共45例，評(píng)價(jià)顯微鏡沉渣鏡檢與全自動(dòng)沉渣分析儀檢測(cè)數(shù)據(jù)的相關(guān)性。兩種沉渣計(jì)數(shù)結(jié)果間差異存在顯著性意義(P<0.05)，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.2.3 UF-1000i尿沉渣分析儀CAST:結(jié)果為陰性而干化學(xué)PRO結(jié)果為陽(yáng)性者共142例，評(píng)價(jià)顯微鏡沉渣鏡檢與全自動(dòng)沉渣分析儀檢測(cè)數(shù)據(jù)的相關(guān)性。兩種沉渣計(jì)數(shù)結(jié)果間存在差異(P<0.05)。因此,不論UF-1000i尿沉渣分析儀CAST結(jié)果如何，只要干化學(xué)Pro結(jié)果≥±，都需要鏡檢，而且需要通過(guò)鏡檢對(duì)病理管型進(jìn)行分類(lèi)，結(jié)果見(jiàn)表4。

兩種方法陽(yáng)性率對(duì)比，1)P>0.05；2)P<0.05；3)P<0.05

表3 UF-1000i尿沉渣分析儀WBC為陰性而干化學(xué)LEU結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)兩種沉渣檢測(cè)方法陽(yáng)性檢出率的比較Tabl. 3 WBC negative by UF-1000i urine sediment analyzer and LEU positive By urine dry chemistry analyzer, comparing the positive detection rate n(%)

兩種方法陽(yáng)性率對(duì)比(The positive rate between two methods)，1)P<0.05；2)P<0.05

表4 UF-1000i尿沉渣分析儀CAST為陰性而干化學(xué)PRO結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)兩種沉渣檢測(cè)方法陽(yáng)性檢出率的比較Tab 4 CAST negative by UF-1000i urine sediment analyzer and PRO positive by urine dry chemistry analyzer, comparing the positive detection rate n(%)

兩種方法陽(yáng)性率對(duì)比，1)P<0.05；2)P<0.05；3)P<0.05

2.3 AX-4280尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)BLD、LEU及PRO

結(jié)果為陰性而UF-1000i檢測(cè)RBC、WBC及CAST為陽(yáng)性者，分別為29例、39例及2例，評(píng)價(jià)沉渣鏡檢與UF-1000i陽(yáng)性率的比較。兩種沉渣計(jì)數(shù)結(jié)果之間存在差異(P<0.05)。因此，當(dāng)AX-4280尿干化學(xué)分析儀BLD結(jié)果為陰性，沉渣分析儀RBC顯示為陽(yáng)性(>25/μL)時(shí)，需要做鏡檢，并且觀察紅細(xì)胞形態(tài)；當(dāng)AX-4280尿干化學(xué)分析儀LEU結(jié)果為陰性，沉渣分析儀WBC顯示為陽(yáng)性(>15/μL)時(shí)，需要做鏡檢；AX-4280尿干化學(xué)分析儀Pro結(jié)果為陰性,一般可以不做鏡檢，但對(duì)于腎臟疾病、高血壓等特殊人群，仍需要鏡檢觀察，結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 干化學(xué)為陰性時(shí)兩種沉渣檢測(cè)陽(yáng)性率的對(duì)比 n(%)

兩種方法陽(yáng)性率對(duì)比，1)P<0.05；2)P<0.05

3 討 論

目前尿液分析已成為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，尿干化學(xué)分析儀和尿沉渣分析儀等自動(dòng)化儀器的應(yīng)用提高了檢測(cè)的速度與準(zhǔn)確性。但由于尿干化學(xué)分析是根據(jù)化學(xué)顯色反應(yīng)，經(jīng)過(guò)光學(xué)電學(xué)轉(zhuǎn)化來(lái)反映紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型等有形成分[2,3]，UF-1000i尿沉渣分析儀是通過(guò)半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞/核酸熒光染色技術(shù)，對(duì)各種有形成分進(jìn)行特異性的核酸熒光染色，根據(jù)多角度散射光和不同級(jí)別的熒光進(jìn)行分析[4]。因此，自動(dòng)化分析存在很多影響因素[5]，會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰或假陽(yáng)性。而本研究期望找到一個(gè)指導(dǎo)尿沉渣鏡檢的更直觀的界限值，即用自動(dòng)化儀器將完全正常的標(biāo)本篩除，對(duì)異常的標(biāo)本進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范性的檢查，最大可能的降低假陽(yáng)性及假陰性的出現(xiàn)，從而正確的指導(dǎo)臨床工作[6]。

干化學(xué)檢測(cè)潛血為不同程度陽(yáng)性，而UF-1000i檢測(cè)RBC為陰性，最大的問(wèn)題可能是干化學(xué)檢測(cè)受易熱酶干擾，在尿液中常存在類(lèi)過(guò)氧化酶性的物質(zhì)，其具有與血紅蛋白相同的氧化色原的作用，而造成潛血試驗(yàn)為假陽(yáng)性。干化學(xué)檢測(cè)BLD為“±”時(shí)，39例沉渣鏡檢和UF-1000i檢測(cè)結(jié)果一致(P>0.05)。此時(shí)可以不做鏡檢。而當(dāng)干化學(xué)檢測(cè)BLD為“+”及以上時(shí)，兩種沉渣檢測(cè)方法出現(xiàn)明顯差異(P<0.05)，可考慮：當(dāng)UF-1000i尿沉渣分析儀RBC結(jié)果為陰性，但只要干化學(xué)BLD結(jié)果≥+1以上都需要鏡檢，另外，尿液中含有如羊水、經(jīng)血白帶、肌紅蛋白、大量維生素C也可干擾紅細(xì)胞的檢測(cè)[7]。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)干化學(xué)檢測(cè)潛血為不同程度陽(yáng)性時(shí)，UF-1000i與顯微鏡沉渣鏡檢的符合程度有差別，從沉渣鏡檢的4例陽(yáng)性標(biāo)本中，作者觀察到的紅細(xì)胞均為影狀紅細(xì)胞，UF-1000i在檢測(cè)時(shí)可能難以進(jìn)行辨別及計(jì)數(shù)檢測(cè)。而當(dāng)UF-1000i可以檢測(cè)到不同數(shù)量的紅細(xì)胞而干化學(xué)為陰性時(shí)，作者發(fā)現(xiàn)大多數(shù)情況是尿液中存在不同數(shù)量的體積較小的結(jié)晶所致，最常見(jiàn)的為草酸鈣結(jié)晶，其次常常發(fā)現(xiàn)有霉菌、細(xì)菌、非定型結(jié)晶等的存在[8]。

干化學(xué)檢測(cè)LEU為不同程度陽(yáng)性，而UF-1000i檢測(cè)WBC為陰性，經(jīng)鏡檢證實(shí)陽(yáng)性結(jié)果也只有6例，原因不是很清楚，有可能是尿液在膀胱內(nèi)儲(chǔ)存時(shí)間較長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞破壞嚴(yán)重而影響細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)[9]。而當(dāng)UF-1000i可以發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞，而干化學(xué)為陰性時(shí)，大部分標(biāo)本是由于尿液中以單核和淋巴細(xì)胞為主，而干化學(xué)中白細(xì)胞的測(cè)定主要是針對(duì)中性粒細(xì)胞的酯酶反應(yīng)，因此可以出現(xiàn)假陰性的結(jié)果。另外尿液中若污染一些藥物如慶大霉素、先鋒等也可使白細(xì)胞的檢出率降低[10]。不論UF-1000i尿沉渣分析儀WBC結(jié)果如何，只要干化學(xué)LEU結(jié)果≥25/μL，都需要鏡檢。

干化學(xué)檢測(cè)蛋白為不同程度陽(yáng)性，而UF-1000i中并沒(méi)有看到有管型，本組觀察到大部分尿液標(biāo)本中存在粘液蛋白絲，或者男性尿液標(biāo)本中存在少量精子，這些都會(huì)干擾蛋白的檢測(cè)。而尿液比重、滲透壓及pH都可能對(duì)尿液中的管型造成影響，在不利的因素下，管型甚至可以被溶解，而產(chǎn)生假陰性[11]。

[1] 梁可斌. 尿液有形成分檢查的難點(diǎn)與疑點(diǎn)[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009，32：605-608.

[2] John Toffaletti,MaryAnn Dotson, Pamela Shearman, et al.Comparison of 2 Automated Systems for Urine Chemistry and Urine Sediment Analysis[J].Lab Hematol,1999,5:123-129.

[3] 何為恒，溫水年.尿干化學(xué)法結(jié)合尿沉渣分析儀的應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2008，17：236.

[4] 白云，侯天文.尿液有形成分分析的方法學(xué)發(fā)展[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2007，5：657.

[5] 樊云蓉，甘超.UF1000i全自動(dòng)尿有形成分分析儀對(duì)尿路感染的診斷價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009，6：655-658.

[6] Ben-Ezra J, Bork L, Mcpherson RA. Evaluation of the Sysmex UF-100 automated urinalysis system[J].Clin Chem,1998,44:92-95.

[7] 叢玉龍,馬俊龍. 幾種檢測(cè)尿紅細(xì)胞方法的價(jià)值與互補(bǔ)關(guān)系[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2003，25：263-264.

[8] 周強(qiáng),羅淼珊,文燕,等.流式尿沉渣分析儀、尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)尿紅、白細(xì)胞的分析研究[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè)，2005，9：592-593.

[9] 梁國(guó)明.干化學(xué)分析法檢測(cè)尿中白細(xì)胞、紅細(xì)胞和人工顯微鏡檢查的比較[J]. 國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2006，12(1)：37-39.

[10] 楊佳芝，李高蘭 .尿液分析儀干化學(xué)法不能代替顯微鏡檢查[J].醫(yī)學(xué)導(dǎo)刊,2008，5：92.

[11] 周業(yè)模,趙秀華.UF-100尿沉渣分析儀的局限性[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，3：91.