謝建興 譚禾英 彭敏（等）

[摘要]目的 探討CD117/CD34共表達(dá)在急性白血?。ˋL）診斷中的價(jià)值。 方法 利用流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)了47例急性髓細(xì)胞性白血?。ˋML）、28例急性淋巴性白血?。ˋLL）和20例正常骨髓細(xì)胞CD34和CD117的表達(dá)，并比較CD117、CD34和CD117/CD34 在AML、ALL和正常人間的表達(dá)差異。 結(jié)果CD34和CD117在正常人表達(dá)為陰性。CD34在AML和ALL中均有表達(dá)，二者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.0285，P = 0.8659>0.017）。而CD117在AML患者中有更高表達(dá)（40/47），但很少在ALL中表達(dá)（1/28例），兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=47.0698，P = 0.0000<0.017）。此外，CD117/CD34在AML中有較高表達(dá)（30/47），而在ALL中表達(dá)極低，只有1/28，二者比較亦有顯著差異（χ2=26.2747，P < 0.017）。 結(jié)論CD117/CD34的共同表達(dá)可用于排除ALL，有助于AML診斷。

[關(guān)鍵詞] 急性白血??；CD117/CD34；白細(xì)胞分化抗原

[中圖分類(lèi)號(hào)] R733.71[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673—9701（2012）25—0058—02

The expression and clinical significance of CD117 and CD34 in patients with acute leukemia

XIE JianxingTAN HeyingPENG MinLUO XuhuaLUO Xiaohong

Department of Hematology，Xinyu People's Hospital in Jiangxi Province，Xinyu 338000，China

[Abstract] Objective To explore the value of the expression of CD117/CD34 with acute leukemia （AL）， we designed a study to compare the results of analyses of co—expression of CD34/CD117. Methods We estimated by flow cytometry （FCM） the expression of CD34 and CD117 in cells from 47 patients with acute myeloid leukaemia （AML） ，28 patients with acute lymphoid leukemia （ALL） and 20 normal bone marrows. Results CD34 was commonly expressed in all types of acute leukemias， whereas CD117 seemed to be a more expression for 40 out of 47 cases of AML patients， but rarely detected in ALL （1/28 patients）. Moreover， co—expression of CD34/CD117 was extremely rare on lymphoblasts with only 1/28 ALL patients. Conclusion Co—expression of CD34/CD117 may strongly suggest the diagnosis of AML， and it should be used in the exclusion of ALL.

[Key words] Acute leukemia；CD117/CD34；Leukocyte differentiation antigen

急性白血?。╝cute leukemia，AL）是造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，目前國(guó)際上廣泛采用MICM標(biāo)準(zhǔn)對(duì)其進(jìn)行診斷、分型、指導(dǎo)臨床治療和評(píng)估預(yù)后。其中免疫學(xué)檢查不僅對(duì)白血病分型，而且對(duì)白血病細(xì)胞的性質(zhì)、分化發(fā)育階段能作出較客觀(guān)的判斷，對(duì)治療及預(yù)后判斷具有指導(dǎo)意義。隨著單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展，流式細(xì)胞術(shù)使急性白血病免疫分型結(jié)果更快速、可靠。本研究采用FCM研究CD117及CD34在ALL和AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)，進(jìn)一步探討了CD117/CD34共表達(dá)的臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

收集2009年1月～ 2011年12月間在我院血液內(nèi)科初次就診的急性白血病患者75例，所有病例均按《血液病診斷與療效標(biāo)準(zhǔn)》[1]確診。其中男47例，女28例；年齡15～70歲，中位年齡40歲。ALL 組28例，男20例，女8例，年齡15～61歲，中位年齡 26歲；AML組47例，男27例，女20例，年齡15～70歲，中位年齡42歲。在 AML 組中M0 1例，M1 2例，M2 18例，M3 6例，M4 6例，M5 11例，M6 2例，M7 1例。20例正常對(duì)照組骨髓標(biāo)本均采自健康成人體檢者。

1.2 免疫表型分析

抽取患者骨髓3 mL，肝素抗凝，分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞，按常規(guī)三色直接免疫熒光法標(biāo)記骨髓單個(gè)核細(xì)胞，各管均標(biāo)記CD45—Percp（ Becton Dickinson），同時(shí)配以FITC、PE或PE—Cy5標(biāo)記的CD2、CD4、CD34、CD5、CD38、CD56、CD8、CD64、CD71、CD11b、CD117、MPO、cCD79a、cCD3、TdT、CD123等，分析時(shí)以相應(yīng)的標(biāo)記熒光素作為同型對(duì)照。所有單抗均購(gòu)自美國(guó) Becton Dickinson 公司。采用流式細(xì)胞儀（BDFA salibur 型，美國(guó) Becton Dickinson 公司）分析。在 CD45/SSC 散點(diǎn)圖上，至少分析10 000個(gè)細(xì)胞。CD117以陽(yáng)性細(xì)胞水平≥10%為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)[2]，其余抗原均以抗原陽(yáng)性細(xì)胞≥20%為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料多個(gè)樣本率的比較應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，P < 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其中樣本率的兩兩比較，采用Bonferroni法，修正檢驗(yàn)水準(zhǔn)值α=0.017，即P < 0.017為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

CD117、CD34、CD117/CD34在對(duì)照組、ALL組和AML組的表達(dá)差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=66.784 7、28.173 5、41.253 3，P=0.0000<0.0001）。其中指標(biāo)在各組中的兩兩比較結(jié)果如下：①CD117、CD34、CD117/CD34在對(duì)照組中無(wú)表達(dá)；②ALL組中 CD117陽(yáng)性表達(dá)率（3.571 4%）、CD117/CD34 共表達(dá)率（3.571 4%），與對(duì)照組（0%）比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.729 5、0.729 5，P = 0.393 1>0.017）。而CD34陽(yáng)性表達(dá)率（67.857 1%）與對(duì)照組（0%）比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=22.463 1，P = 0.0000<0.017）；③AML組中CD117、CD34陽(yáng)性表達(dá)率（85.106 4%、65.957 4%）、CD117/CD34 共表達(dá)率（63.829 8%），與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 =42.238 0、24.550 8、23.116 7，P = 0.0000<0.017）；而與 ALL 組比較，CD34差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.028 5，P = 0.865 9>0.017），但CD117、CD117/CD34差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=47.069 8、26.274 7，P = 0.0000<0.017）。見(jiàn)表1。

表1CD117、CD34、CD117/CD34在對(duì)照組、ALL組和AML組中的兩兩比較結(jié)果

3 討論

免疫學(xué)分型在MICM分型診斷方法中占有重要地位，在ALL和AML的鑒別診斷中具有非常重要的作用。CD117是造血干細(xì)胞因子受體膜外區(qū)域的分子表面抗原標(biāo)記，在正常情況下，CD117只在正常造血干/祖細(xì)胞上有表達(dá)，極少表達(dá)于較成熟的粒細(xì)胞和單核細(xì)胞，淋巴細(xì)胞幾乎沒(méi)有表達(dá)。Nomdedeu等[2]報(bào)道，CD117在AML中的陽(yáng)性表達(dá)率在60%～87%，與本研究CD117在AML中的陽(yáng)性表達(dá)率85.106 4%（40/47）一致。沈紅強(qiáng)等[3]研究表明，CD117主要在AML中表達(dá)，且CD117在ALL患者中也可存在一部分交叉表達(dá)。本研究亦顯示，CD117在ALL和AML均有表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率分別依次為3.571 4%（1/28）、 85.106 4%（40/47），并且兩者比較具有顯著性差異（P = 0.0000，P < 0.017）。因此，當(dāng) CD117 高表達(dá)時(shí)，仍需要對(duì)其進(jìn)行鑒別ALL 或 AML。

Auewarakul 等[4]研究顯示，CD34表達(dá)于早期造血干/祖細(xì)胞，在AL中表達(dá)缺乏系列特異性，CD34在 ALL 和 AML（除M3外）中均可呈高表達(dá)，與本研究結(jié)果相一致。本研究中，在ALL組和AML組中CD34陽(yáng)性表達(dá)率分別為67.857 1%（19/28）、65.957 4%（31/47），均有較高表達(dá)，且二者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P = 0.865 9>0.017），故僅根據(jù)CD34表達(dá)難以對(duì) ALL 和 AML作出鑒別診斷。

本研究顯示，CD117 /CD34 在ALL 和AML中的共表達(dá)率依次分別為3.571 4%（1/28）和63.829 8%（30/47），二者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P = 0.0000<0.017）。CD117 /CD34在AML患者的陽(yáng)性表達(dá)率（63.829 8%）比CD117在AML患者的陽(yáng)性表達(dá)率更低（85.106 4%），由此表明CD117 /CD34比CD117具有更好的髓系免疫學(xué)特征。因此 CD117 /CD34 共表達(dá)可作為 AML診斷的免疫學(xué)參考指標(biāo)，協(xié)助診斷 AML。

綜上所述，AML 患者骨髓CD117、CD117/CD34 的陽(yáng)性表達(dá)率均高于正常人和ALL患者，可作為AML患者M(jìn)ICM分型診斷的髓系免疫學(xué)標(biāo)志。其中CD117/CD34共表達(dá)具有更高的髓系免疫學(xué)特異性，可以輔助排除ALL，對(duì)AL患者的診斷與鑒別診斷具有重要意義。

[參考文獻(xiàn)]

[1]張之南，沈悌. 血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M]. 第3版. 北京：科學(xué)出版社，2007：131—134.

[2]Nomdedeu JF，Mateu R，Alts A，et al. Enhanced myeloid specificity of CD117 compared with CD13 and CD33[J]. Leuke Res，1999，23（4）：341—347.

[3]沈紅強(qiáng)，湯永民，楊世隆，等. CD117 在白血病細(xì)胞上的表達(dá)分析[J]. 中華血液病學(xué)雜志，2003，24（5）：228—230.

[4]Auewarakul CU，Promsuwicha O，U—Pratya Y，et al. Immunophenotypic profile of adult acute myeloid leukemia （AML）：analysis of 267 cases in Thailand Asian Pac[J]. Allergy Immunol， 2003，21（3）：153—160.

（收稿日期：2012—05—31）