張　明　衛(wèi)　罡　原　素，等

摘要：目的：建立舒心片中淫羊藿苷含量的測(cè)定方法。方法：采用高效液相色譜法，色譜柱：Phenomenex BOS C₁₈柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：乙腈－水(78:22)；流速：1Ml.min^-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：270hm；柱溫：25℃。結(jié)果：淫羊藿苷在0.1972～1.972μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9994；平均回收率為99.91％，RSD=2.75％。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確，可為淫羊藿苷在復(fù)方劑中的含量測(cè)定提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞：舒心片；淫羊藿苷；含量測(cè)定+HPLC

中圖分類(lèi)號(hào)：R927.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-2349(2009)06-0052-02

舒心片為本院醫(yī)院制劑。由丹參、淫羊藿、紅參等藥組成，具有補(bǔ)元?dú)?、活血脈的功效，用于治療冠心病。淫羊藿為方中西藥，而淫羊藿苷為其主要活性成分，因此選用淫羊藿苷作為含量測(cè)定的指標(biāo)成分。運(yùn)用高效液相色譜方法測(cè)定淫羊藿苷含量多有報(bào)道，方法比較成熟，因此筆者選用高效液相色譜法為舒心片中淫羊藿苷的含量測(cè)這建立了一種分離效率高、穩(wěn)定性好、分析速度快的方法，為控制制劑質(zhì)量提供了可靠的方法。

1儀器與試藥

Agilent 1100型高效液相色譜儀，柱溫箱，二級(jí)管陣列檢測(cè)器(DAD)，Agilent-Chemstation化學(xué)工作站。舒心片，江門(mén)市新會(huì)區(qū)中醫(yī)醫(yī)院制，批號(hào)20051015、2051223、20060206；陰性對(duì)照樣品(自制)；淫羊藿苷對(duì)照品(批號(hào)110373－200312，中國(guó)藥品生物制品檢定所)。乙腈為色譜純，液相用水為超純水，其余試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件phenomenex BOS C₁₈色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)，乙腈－水(78:22)；柱溫：25℃；檢測(cè)器：DAD,檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；流速：1mL／min；進(jìn)樣量：20μL。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。在上述條件下，淫羊藿苷分離良好，空白無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取淫羊藿苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含淫羊藿苷98.6ug的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3供試品溶液的制備取本品5片(0.5g／片)研細(xì)，取1.0g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入95％乙醇50mL，稱(chēng)定重量，超聲(250W，40kHz)處理1h，放冷，稱(chēng)重，用95％乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25mL，水浴蒸干，加95％乙醇使溶解，置5mL量瓶中，加95％乙醇至刻度，搖勻，微孔濾膜濾過(guò)，即得。

2.4陰性溶液的制備原方去淫羊藿，按照制備工藝方法制備空白制劑。按供試品制備方法制備陰性對(duì)照溶液。依含量測(cè)定法處理和分析，空白樣品色譜在淫羊藿苷峰相應(yīng)保留時(shí)間沒(méi)有干擾峰。

2.5線性關(guān)系考察取對(duì)照品溶液分別進(jìn)樣2、4、8、12、16、20μL，記錄色譜峰面積。以進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程：Y＝1259.3X+10.379，相關(guān)系數(shù)r=0.9994，表明淫羊藿苷在0.1972～1.972μg之間呈良好的線性關(guān)系。

2.6精密度實(shí)驗(yàn)精密量取對(duì)照品溶液10μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定淫羊藿苷的峰面積，結(jié)果平均峰面積為1277.62，RSD＝0.33％，結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品溶液，分別在0、1、2、3、4、12h進(jìn)樣20μL，記錄峰面積，結(jié)果淫羊藿苷平均峰面積為1566.1，RSD=1.53％，表明供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8重復(fù)性試驗(yàn)精密稱(chēng)取同一批號(hào)(20050801)5份，按供試品溶液制備方法處理，測(cè)定，淫羊藿苷的平均含量為0.3077mg／片，RSD＝1.49％，結(jié)果表明本方法重現(xiàn)性良好。

2.9回收率試驗(yàn)取已知含量的舒心片樣品1g，共5份，精密稱(chēng)定。分別加入與樣品中淫羊藿苷含量近相等的淫羊藿苷對(duì)照品，按供試品溶液的制備方法操作，結(jié)果見(jiàn)表1，平均回收率為99.92％，RSD=2.75％，結(jié)果表明該方法具有良好的回收率。

2.10樣品的含量測(cè)定取不同批號(hào)舒心片樣品各5片，研細(xì)，按供試品溶液制備方法處理，在上述色譜條件下分析，計(jì)算含量結(jié)果見(jiàn)表2。

3討論

在提取溶液媒選擇時(shí)，分別比較了50％乙醇、70％乙醇、95％乙醇3種溶劑超聲，制得供試品溶液，通過(guò)比較后，95％乙醇成分極性較小可減少干擾，確定以95％乙醇為提取溶媒。

實(shí)驗(yàn)比較了95％乙醇加熱回流提取或超聲提取，結(jié)果超聲提取與回流提取比較無(wú)明顯差異，以超聲提取簡(jiǎn)便；通過(guò)比較提取溶媒用量，提取時(shí)間，確定提取方法為95％乙醇50倍量超聲提取1h。

本文建立了采用HPLC法測(cè)定舒心片中淫羊藿苷含量的測(cè)定方法，方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可以為舒心片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

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