劉翠燕

摘 要 目的：了解住院患者2年中大腸埃希氏菌，克雷伯氏菌EsBLs的檢出率及對常用抗生素的耐藥情況。方法：采用雙紙片協(xié)同試驗及紙片確證試驗對2006～2007年分離的412株大腸埃希氏菌，134株克雷伯氏菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株檢測，并采用紙片擴散法(K-B法)對產(chǎn)ESBLs菌株進行藥敏試驗。結(jié)果：大腸埃希氏菌產(chǎn)ESBLs分離率2006、2007年分別為33.3%、35.3%。耐藥表型結(jié)果顯示產(chǎn)ESBLs菌對抗生素耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBLs菌。結(jié)論：產(chǎn)ESBLs是大腸埃希氏菌、克雷伯氏菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的重要機制，臨床細菌室應對產(chǎn)ESBLs菌進行規(guī)范化監(jiān)測與報告。

關(guān)鍵詞 院內(nèi)感染 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶 大腸埃希氏菌克雷伯氏菌 耐藥性doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.09.179

資料與方法

一般資料：來自我院住院患者2006～2007年分離的臨床菌株，共收集大腸埃希氏菌(ECO)和克雷伯氏菌(KPN)共計546株。所用于質(zhì)控的標準菌株肺炎克雷伯氏菌ATCC700603為ESBLs陽性質(zhì)控菌，大腸埃希氏菌ATCC25922為ESBLs陰性質(zhì)控菌，均來自衛(wèi)生部藥品生物檢定所。

培養(yǎng)基：分離鑒定培養(yǎng)基和MH瓊脂干粉購自杭州天和微生物試劑有限公司，細菌鑒定按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行。

藥敏紙片：頭孢他啶(CAZ)、頭孢噻肟(CTX)、氨曲南(ATM)、阿莫西林/克拉維酸(AMC)、亞胺培南(IMP)、頭孢他啶/克拉維酸、頭孢噻肟/克拉維酸。

藥敏試驗：采用K-B法，判斷標準按照NCCLSI1999年版規(guī)定進行以敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)報告結(jié)果。

ESBLs測定：①紙片協(xié)同試驗：按紙片擴散法在M-H平板上涂布細菌，在平板中心貼上阿莫西林/克栓(AMC)紙片，距中心紙片25mm處分別貼上CRZ、CTX、ATM紙片，35℃孵育18～24小時觀察結(jié)果，在中心紙片和CAZ、CTX、ATM3種紙片抑菌環(huán)間出現(xiàn)協(xié)同，則初步判斷ESBLs陽性。②確證試驗：在涂布待測菌的M-H平面上分別貼上CTX(30μg)、CAZ(30μg)、CTX/CLAV(30/10μg)、CAZ/CLAV(3/10μg)紙片，37℃培養(yǎng)18～24小時觀察結(jié)果，即加克拉維酸和不加克拉維酸紙片的直徑之差≥5mm，可確認為ESBLs菌株。

統(tǒng)計方法：采用WHONET-5軟件系統(tǒng)。

結(jié) 果

ESBLs檢出率：大腸埃希氏菌產(chǎn)ESBLs分離率2006、2007年分別為 33.3%、35.3%，克雷伯氏菌產(chǎn)ESBLs分離率2006、2007年分別為27.5%、35.5%。

ESBLs的耐藥率：2006～2007產(chǎn)ESBLs大腸埃希氏菌、克雷伯氏菌耐藥性動態(tài)觀察中發(fā)現(xiàn)氧氟沙星、替卡西林/克拉維酸、頭孢西啶、頭孢哌酮等抗菌藥物的耐藥性，不同時期有所不同，而青霉素類、頭孢菌素類、單環(huán)類、氨基糖苷類、喹諾酮類以及加β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復合制劑等常用抗菌用藥均高度耐藥，而且表現(xiàn)為多重耐藥。見表1。

討 論

大腸埃希菌和克雷伯氏菌是產(chǎn)ESBLs的重要菌株，由于大量使用廣譜的第三代頭孢菌素等原因，近年來臨床產(chǎn)ESBLs的細菌分布率逐漸增加，已成為臨床感染重要致病菌，本院兩年來臨床標本培養(yǎng)分離出大腸埃希氏菌412株，ESBLs陽性率平均為34.3%，克雷伯氏菌134株，產(chǎn)ESBLs株平均為31.5%，和文獻報道相同^[1，2]，大腸埃希氏菌產(chǎn)酶率高于克雷伯氏菌。產(chǎn)ESBLs菌株對18種常用抗菌藥物的敏感率明顯低于不產(chǎn)ESBLs菌株，對第一、二代頭孢菌素呈高度耐藥，對第三代頭孢菌素和氨曲南的耐藥率也達到 38%～78%，但有58%的產(chǎn)ESBLs株對氨基糖苷類和碳青酶烯類敏感，因此，臨床治療ESBLs菌感染不宜選用第三代頭孢菌素，宜選用氨基糖苷類和碳青酶烯類藥物。由于許多的產(chǎn)ESBLs菌株在體外不表達酶的活性，體外藥敏試驗顯示出對氨曲南等抗菌藥物部分敏感，按照NccLs規(guī)定，對于產(chǎn)ESBLs菌株無論體外藥敏試驗結(jié)果如何，均應報告對青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南等單酰胺類抗生素耐藥，因此，實驗室應注重ESBLs的檢測，以提供正確的藥敏試驗報告，產(chǎn)ESBLs的菌株對亞胺培南的敏感率為100%，對于產(chǎn)ESBLs腸桿菌細菌重點感染的治療亞胺培南可作為首選藥物。

由于該菌具有多重耐藥性和經(jīng)質(zhì)粒傳播迅速等特點，很容易在細菌間傳遞播撒，導致對抗生素耐藥的細菌個體傳播，因此，給臨床治療帶來了極大的困難，造成醫(yī)療費用增加，平均住院日延長，病死率增加，通過兩年的檢測，了解我院大腸埃希氏菌和克雷伯氏菌產(chǎn)ESBLs的產(chǎn)生情況，及時快速地檢測出ESBLs，有利于指導臨床醫(yī)生及時合理應用抗菌藥物，避免產(chǎn)ESBLs菌株的增多。

參考文獻

1 吳安華,任南,文細毛,等.我國178所醫(yī)院住院患者橫斷面抗菌藥物使用調(diào)查.中華醫(yī)院感染學雜志,2002,12(12):881-884.

2 彭少華,李從榮.施金玲,等.產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的檢測與耐藥性觀察.中華檢驗醫(yī)學雜志,2001,24(6):350-352.