付麗娟　趙宏偉　胡曉麗

[摘要] 目的:檢查合格獻(xiàn)血員中隱匿性乙肝病毒感染情況,探討減少輸血傳播乙肝病毒的檢測(cè)方法。方法:隨機(jī)抽取2005年2月～2007年8月黑龍江省醫(yī)院收取血站合格全血標(biāo)本560例,應(yīng)用生化儀復(fù)檢肝功能、酶聯(lián)免疫方法復(fù)檢HBV M,實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法檢測(cè)血漿HBV DNA載量,應(yīng)用χ2檢驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:560例HBsAg陰性獻(xiàn)血員血漿HBV DNA陽性率為11.07%,HBV DNA含量(9.72±8.95)×103 copy/ml,HBV DNA檢出率與性別、年齡無關(guān),抗-HBc抗體陽性人群中HBV DNA檢出現(xiàn)率較高,占17%,抗-HBs陽性或乙型肝炎病毒標(biāo)志物全陰性也可檢出HBV DNA。結(jié)論:HBsAg陰性獻(xiàn)血員中存在隱匿性乙肝病毒感染,現(xiàn)行的輸血篩查存在HBV漏檢,為隱匿性乙肝病毒感染的原因。應(yīng)重視隱匿性乙肝病毒感染引起的HBV的輸血傳播,應(yīng)在現(xiàn)有的血液篩查中增加HBV核酸檢測(cè)及HBV M檢測(cè)。

[關(guān)鍵詞] 隱匿性;HBV感染;熒光定量PCR;獻(xiàn)血員

[中圖分類號(hào)] R512.6+2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1674-4721(2009)07(a)-066-02

隱匿性乙肝病毒感染是指血清HBsAg陰性,而應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)檢測(cè)血清和(或)肝組織中HBV DNA陽性[1-3]。隱匿性乙肝病毒感染作為乙肝病毒感染的一種特殊類型,是臨床和流行病學(xué)的一大難題。隱匿性乙肝病毒感染可經(jīng)輸血、器官移植、血液透析等方式傳播,并可引起典型的乙肝表現(xiàn)[4-5]。在印度,隱匿性乙肝已成為輸血相關(guān)性乙肝感染的主要原因。隱匿性乙型肝炎病毒感染影響供血源的篩選質(zhì)量,從而使HBV傳染源的管理更加困難,并與肝硬化、肝癌的發(fā)生相關(guān)[6-7],因此其臨床意義重大。本課題對(duì)篩檢合格的獻(xiàn)血員進(jìn)行隱匿性乙肝病毒感染的檢查,探討如何進(jìn)一步降低輸血傳播乙肝病毒的發(fā)生率。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

隨機(jī)抽取2005年2月～2007年8月我院收到血站配送全血標(biāo)本560例,其中男324例,女236例,年齡22～49歲,平均35.5歲。留取全血4 ml,離心取血漿。

1.2 試劑與儀器

HBV DNA熒光PCR定量檢測(cè)試劑盒 (廣州達(dá)安基因公司),乙肝酶聯(lián)免疫試劑盒(天津美德太平洋科技有限公司),全自動(dòng)生化儀(OLYMPUS),羅氏熒光定量PCR儀。

1.3 方法

實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)血漿中HBV DNA載量,酶聯(lián)免疫方法檢測(cè)HBV M,生化儀復(fù)檢肝功能。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用率的比較用χ2檢驗(yàn),P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同性別HBV DNA檢出率

560例獻(xiàn)血員中HBV DNA檢出率為11.07%,HBV DNA載量為(9.72±8.95)×103 copy/ml,陽性檢出率分別為男性12.35% (40/324),女性9.32%(22/236),P>0.05,兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 乙型肝炎病毒標(biāo)志物中HBV DNA檢出率

乙肝標(biāo)志物中存在抗-HBc陽性與抗-HBc陰性,HBV DNA陽性檢出率分別為17.0%(38/224)及7.1%(24/336),P<0.05,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

乙型肝炎病毒感染是一個(gè)全球性的問題,我國(guó)是乙肝病毒感染的高發(fā)區(qū)。自從1900年輸血前篩查HBsAg以來,輸血導(dǎo)致乙肝傳播比率逐年下降,但仍有1:10 000的人輸血后發(fā)生乙型肝炎。隱匿性乙肝病毒感染是輸血傳播乙肝病毒的重要原因[8]。隱匿性乙肝病毒感染的發(fā)生機(jī)制受到眾多學(xué)者的關(guān)注,目前研究的形成因素主要有以下幾方面:①HBV保持極低水平復(fù)制;②HBV基因變異;③HBsAg分泌障礙;④HBV整合到宿主染色體中;⑤外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)感染HBV;⑥病毒或其他因素對(duì)HBsAg合成的影響;⑦檢測(cè)試劑的靈敏度和特異性。以上因素導(dǎo)致隱匿性乙肝病毒感染的存在,因此如何減少輸血傳播乙肝病毒是臨床需要解決的問題。

本課題檢測(cè)血站配送臨床全血560例,HBV陽性檢出62例,HBV DNA載量為(9.72±8.95)×103 copy/ml,檢出率為11.07%,此62例獻(xiàn)血者為隱匿性乙型肝炎病毒感染者?？梢娬＋I(xiàn)血員中,隱匿性乙肝病毒感染者的存在增加了輸血傳播乙肝病毒的幾率。本課題同時(shí)對(duì)乙肝標(biāo)志物與隱匿性乙肝病毒感染的相關(guān)性進(jìn)行了研究,抗-HBc陽性與抗-HBc陰性獻(xiàn)血員中HBV DNA的檢出率分別為17.0%,7.1%,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？?HBc陽性者隱匿性乙肝病毒檢出率17.0%,表明獻(xiàn)血員篩查增加抗-HBc的檢測(cè),可降低隱匿性乙肝病毒的輸血傳播。

通過對(duì)乙肝病毒的特殊感染類型-隱匿性感染的認(rèn)識(shí)及本課題研究結(jié)果的證實(shí),使我們了解到目前血制品的安全性仍需進(jìn)一步提高。篩查HBsAg陰性的隱性感染者仍有傳播乙肝病毒的可能性,因此輸血篩查需增加HBV核酸、抗HBc的檢測(cè),以進(jìn)一步提高輸血的安全性。并且許多研究[8]對(duì)隱匿性乙肝病毒感染者檢測(cè)發(fā)現(xiàn),血漿中病毒DNA水平及肝組織細(xì)胞中病毒基因組的拷貝數(shù)均低,與本課題的研究結(jié)果一致(9.72±8.95)×103 copy/ml,提示在診斷不明原因肝病時(shí),對(duì)其進(jìn)行HBV檢測(cè)是必要的。

隱匿性乙肝病毒感染的流行與HBV總體流行有關(guān),隱匿性乙肝病毒感染最常見于高流行區(qū),據(jù)報(bào)道,在高流行區(qū)有70%～90%的人口先前暴露于HBV的流行區(qū)中的供血者中,7%～9%有隱匿乙肝病毒感染,在低流行區(qū)中,僅5%的人口先前暴露于HBV的美國(guó),0～9%供血者有隱匿乙肝病毒感染,這種長(zhǎng)期反復(fù)暴露是形成大量隱匿性乙肝病毒感染的重要原因之一。我國(guó)是乙肝病毒感染的高發(fā)區(qū),因此隱匿性乙肝病毒感染者也多。雖然目前對(duì)隱匿性乙肝病毒感染的流行病學(xué)、發(fā)病機(jī)制、臨床及治療尚不明確,但可以阻斷其傳播途徑,以減少乙肝病毒的傳播。尚需對(duì)本研究檢出的62例隱匿性感染者及受血者作進(jìn)一步隨訪,以明確其流行病學(xué)及發(fā)病機(jī)制,從而指導(dǎo)臨床治療。

[參考文獻(xiàn)]

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(收稿日期:2009-04-20)