摘要：目的：觀(guān)察通腦舒絡(luò)膠囊對(duì)小鼠腦缺血缺氧的保護(hù)作用，及其對(duì)大鼠血栓形成和小鼠凝血時(shí)間的影響。方法：采用斷頭及雙側(cè)頸總動(dòng)脈合并迷走神經(jīng)結(jié)扎法造成小鼠急性腦缺血模型，采用大鼠動(dòng)、靜脈吻合法形成血栓和毛細(xì)玻璃管法測(cè)定小鼠凝血時(shí)間，觀(guān)察藥物對(duì)腦缺血缺氧的保護(hù)作用、對(duì)血栓形成的抑制作用及對(duì)凝血時(shí)間的延長(zhǎng)。結(jié)果：通腦舒絡(luò)膠囊能顯著延長(zhǎng)腦缺血缺氧小鼠的存活時(shí)間，減輕大鼠血栓重量，延長(zhǎng)凝血時(shí)間。結(jié)論：通腦舒絡(luò)對(duì)腦缺血缺氧具有保護(hù)作用，并能抑制血栓形成，延長(zhǎng)凝血時(shí)間。

關(guān)鍵詞：通腦舒絡(luò)膠囊；腦缺血缺氧；血栓形成；凝血時(shí)間

中圖分類(lèi)號(hào)：R743.31

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007—2349(2007)05—0037—02

心腦血管疾病是目前發(fā)病率最高、對(duì)人類(lèi)健康威脅最為嚴(yán)重的疾病之一，其中80％以上為缺血性腦血管病。腦缺血性疾病發(fā)生在局部腦血流減少甚至完全喪失的基礎(chǔ)上，目前對(duì)其治療主要以溶栓恢復(fù)缺血組織血液灌流為主。

通腦舒絡(luò)膠囊是江蘇省中醫(yī)藥研究院根據(jù)名醫(yī)驗(yàn)方制作而成，有多年的臨床應(yīng)用基礎(chǔ)，具有很好的臨床療效，主要用于腦中風(fēng)治療。本文采用斷頭及雙側(cè)頸總動(dòng)脈合并迷走神經(jīng)結(jié)扎法造成小鼠急性腦缺氧缺血模型，大鼠動(dòng)、靜脈吻合法形成血栓等方法，觀(guān)察通腦舒絡(luò)膠囊對(duì)腦缺血的保護(hù)作用及其對(duì)血栓形成和凝血時(shí)間的影響，為中藥驗(yàn)方提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，18～22g；SD清潔級(jí)大鼠，體重280～320g，購(gòu)于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，合格證號(hào)：SCXK(滬)2003—0003，飼養(yǎng)環(huán)境清潔級(jí)，合格證號(hào)：SCXK(蘇)2002—0052。

1.2材料 通腦舒絡(luò)膠囊混懸液，蒸餾水稀釋至所需濃度；尼莫地平片，廣州華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，20mg／片，批號(hào)060201；阿司匹林腸溶片，南京白敬宇制藥有限公司，25mg／片，批號(hào)060601。

2、方法

2.1 對(duì)小鼠急性腦缺氧的保護(hù)作用 昆明種小鼠70只，體重18～22g，雌雄各半，將小鼠隨機(jī)分為5組，即對(duì)照組、陽(yáng)性藥組和給藥高、中、低劑量組。給藥組分別灌胃給予通腦舒絡(luò)膠囊混懸液11、5.5、2.75g生藥／kg，對(duì)照組灌胃給予同體積的蒸餾水，陽(yáng)性藥組灌胃給予尼莫地平20mg／kg，灌胃給藥7d，于末次給藥后1h，參照文獻(xiàn)方法將小鼠雙耳后頸部逐只斷頭，立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止的時(shí)間。

2.2雙側(cè)頸總動(dòng)脈合并迷走神經(jīng)結(jié)扎致小鼠腦缺血 昆明種小鼠70只，體重18～22g，雌雄各半，分組同2.1，灌胃給藥7d，于末次給藥后1h，清醒狀態(tài)下仰位固定，頸部正中切口，分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈合并迷走神經(jīng)，以0號(hào)手術(shù)線(xiàn)，在近心端和遠(yuǎn)心端分別穿線(xiàn)，結(jié)扎同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，剪斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈合并迷走神經(jīng)，完全阻斷大腦血流。記錄各組小鼠的存活時(shí)間(以小鼠末次腹式呼吸為觀(guān)察指標(biāo))。

2.3大鼠體內(nèi)血栓形成(動(dòng)靜脈旁路法) 雄性SD大鼠50只，280～380g，隨機(jī)分為5組，每組10只。即對(duì)照組、陽(yáng)性藥組和給藥高、中、低劑量組。給藥組分別灌胃給予通腦舒絡(luò)膠囊混懸液5.5、2.75、1.375g生藥／kg，對(duì)照組灌胃給予同體積的蒸餾水，陽(yáng)性藥組灌胃給予阿司匹林30mg／kg。大鼠以20％烏拉坦(6ml／kg，ip)麻醉后，分離右頸內(nèi)動(dòng)脈及左頸外動(dòng)脈，以置入6cm 4～0手術(shù)絲線(xiàn)的聚乙烯管連通，形成動(dòng)靜脈旁路。分別舌下靜脈給藥15min后，開(kāi)放血流15min，取出絲線(xiàn)稱(chēng)重，總重減去絲線(xiàn)重即為血栓濕重。按下式計(jì)算抑制百分率，抑制率(％)=(對(duì)照組血栓濕重一給藥組血栓濕重)／對(duì)照組血栓濕重×100。

2.4小鼠凝血時(shí)間測(cè)定 昆明種小鼠70只，體重18～22g，雌雄各半。將小鼠隨機(jī)分為5組，即對(duì)照組、陽(yáng)性藥組和給藥高、中、低劑量組。給藥組分別灌胃給予通腦舒絡(luò)膠囊混懸液11、5.5、2.75g生藥／kg，對(duì)照組灌胃給予同體積的蒸餾水，陽(yáng)性藥組灌胃給予阿司匹林60mg／kg，灌胃給藥6d。末次給藥后1h，眼后靜脈叢取血，以毛細(xì)管法測(cè)定凝血時(shí)間(CT)L3J。

2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。組間比較采用t檢驗(yàn)，組間率的比較采用x²檢驗(yàn)。

3、結(jié)果

3.1對(duì)小鼠急性腦缺氧的影響與對(duì)照組比較，通腦舒絡(luò)膠囊中、高劑量組能明顯延長(zhǎng)小鼠斷頭喘氣時(shí)間(P<0.05或0.01)。見(jiàn)表1。

與對(duì)照組相比，*P<0.05，**P％0.01

3.2對(duì)雙側(cè)頸總動(dòng)脈合并迷走神經(jīng)結(jié)扎小鼠存活時(shí)間的影響與對(duì)照組比較，通腦舒絡(luò)膠囊中、高劑量組能明顯提高雙側(cè)頸總動(dòng)脈合并迷走神經(jīng)結(jié)扎小鼠的存活時(shí)間(P<0.05或0.01)。見(jiàn)表2。

4、討論

腦是高級(jí)神經(jīng)中樞，對(duì)血供的需求很大，腦重只占體重的2％～3％，卻利用了全身耗氧量的20％～25％，葡萄糖的75％。腦組織的氧、葡萄糖的儲(chǔ)備極少，一旦血流完全阻斷，6秒鐘內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞代謝即可受到影響，幾分鐘內(nèi)能量代謝和離子平衡就發(fā)生紊亂，因此腦血流的充足供應(yīng)是腦功能正常和結(jié)構(gòu)完整的首要條件Ⅲ。小鼠顱內(nèi)腦血管之間有吻合枝，單獨(dú)結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈不出現(xiàn)明顯腦缺血癥狀，當(dāng)將迷走神經(jīng)和頸總動(dòng)脈一起結(jié)扎時(shí)，則迷走神經(jīng)受到刺激引起血壓下降，可產(chǎn)生腦缺血。在同時(shí)結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)后，大腦因?yàn)檠鞴?yīng)的減少出現(xiàn)供氧減少而出現(xiàn)明顯缺氧癥狀，模型動(dòng)物絕大多數(shù)在內(nèi)死亡。在斷頭實(shí)驗(yàn)中，腦血液供應(yīng)中斷，但腦中原有的血和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚能使腦功能維持一段時(shí)間，表現(xiàn)為小鼠規(guī)律地喘氣，當(dāng)能量耗至一定程度，活動(dòng)終止。實(shí)驗(yàn)表明通腦舒絡(luò)膠囊3個(gè)劑量組均可延長(zhǎng)結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈小鼠的存活時(shí)間，通腦舒絡(luò)膠囊高、中劑量能顯著延長(zhǎng)斷頭小鼠的喘息時(shí)間，使腦耗氧量降低，增加神經(jīng)細(xì)胞耐缺氧能力，對(duì)急性腦缺血缺氧有明顯的拮抗作用，提示該藥能具有提高機(jī)體的血氧利用率，降低機(jī)體的耗氧量，增加動(dòng)物血管動(dòng)靜脈血氧量，從而提高組織利用氧的能力，促進(jìn)對(duì)動(dòng)物心腦等重要器官的供氧需求，對(duì)腦組織有明顯的保護(hù)作用。

凝血系統(tǒng)和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)平衡，既保證了血液有潛在的可凝固性，又始終保證了血液的流體狀態(tài)。然而，有時(shí)在某些能促進(jìn)凝血過(guò)程的因素作用下，打破了上述動(dòng)態(tài)平衡，觸發(fā)凝血過(guò)程，血液便可在血管腔內(nèi)凝固，形成血栓。腦缺血時(shí)，血液處于高凝、高粘、高聚狀態(tài)，血栓的形成是其重要的生理病理過(guò)程之一。實(shí)驗(yàn)表明通腦舒絡(luò)膠囊各劑量組能顯著抑制大鼠動(dòng)靜脈旁路血栓的形成，提示能夠?qū)寡ǖ男纬?。缺血性心腦血管病的病理生理過(guò)程中存在著凝血一纖溶的異常變化。而凝血過(guò)程是一個(gè)多因子參與的復(fù)雜過(guò)程，既可由血管內(nèi)膜損傷激活的“內(nèi)源途徑”引發(fā)，也可由血管外的凝血因子與血液接觸而啟動(dòng)的“外源途徑”引發(fā)。實(shí)驗(yàn)表明通腦舒絡(luò)膠囊中、高劑量能顯著延長(zhǎng)小鼠凝血時(shí)間，從而也有對(duì)抗血栓生成的作用。

本文初步證實(shí)通腦舒絡(luò)膠囊能夠保護(hù)腦缺血缺氧，延長(zhǎng)凝血時(shí)間，抑制血栓形成，其作用機(jī)制有待進(jìn)一步探討。