中圖分類號(hào)：TS201.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1008-0457（2025）03-0001-09

國(guó)際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2025.03.001

黃芩（ScutellariabaicalensisGeorgi）為唇形科多年生草本植物的干燥根，作為我國(guó)傳統(tǒng)的中藥材之一，具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗癌等多種藥理作用，被廣泛應(yīng)用于臨床治療和養(yǎng)殖業(yè)[1-3]?，F(xiàn)代研究表明，黃芩主要作為綠色飼料添加劑應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖，對(duì)畜禽的各種炎癥和細(xì)菌性感染均有較好的治療作用[45]。有文獻(xiàn)報(bào)道，黃芩根中含有大量的黃酮類成分[，有“天然抗生素”的美譽(yù)，主要含有黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素和白楊素等黃酮類化合物[7]，具有抗病毒、抗菌、清熱解毒、泄火清心等功效[8

隨著傳統(tǒng)中藥資源的深度開(kāi)發(fā)利用以及抗生素的濫用，黃芩作為“替代抗生素”藥物已成為研究熱點(diǎn)。前期研究表明，黃芩素具有廣譜抗菌作用，可有效抑制蛋雞輸卵管炎常見(jiàn)的致病菌，如大腸桿菌、沙門(mén)氏菌等[9-10]。此外，黃芩提取物還具有顯著的抗炎作用]，能夠減輕炎癥反應(yīng)和組織損傷[12-13]。目前，黃芩常見(jiàn)的提取方法主要有水煎煮法[14]、超聲提取法[15]、乙酸乙酯萃取法[16]醇提法[7]等。有研究對(duì)黃芩的多種提取方法進(jìn)行了藥效評(píng)估，發(fā)現(xiàn)其水提物具有較好體外抑菌和抗炎效果[18-9]。近年來(lái)，生物技術(shù)的快速發(fā)展為從植物中提取黃酮類化合物提供了更簡(jiǎn)單高效的提取技術(shù)，提高了提取效率和純度[20]。對(duì)提取工藝的研究多采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法，且大多的工藝評(píng)價(jià)僅以黃芩苷為評(píng)價(jià)指標(biāo)，具有一定的局限性。因此，本研究采用響應(yīng)面法，以黃芩中黃芩苷和總黃酮作為提取工藝的評(píng)價(jià)指標(biāo)具有一定參考價(jià)值。

響應(yīng)面法能最大限度地減少試驗(yàn)次數(shù)并考慮試驗(yàn)變量間的相互作用而被廣泛應(yīng)用于提取參數(shù)的優(yōu)化[21]。Box-Behnken 設(shè)計(jì)（Box-Behnken Designs，BBD）是最常用的響應(yīng)面模型之—[22]，該法可通過(guò)預(yù)測(cè)提取條件和提取因素之間的交互作用關(guān)系來(lái)優(yōu)化試驗(yàn)條件。本研究采用總評(píng)歸一結(jié)合響應(yīng)面法優(yōu)化黃芩水提物的提取方法，并通過(guò)與體外抗菌試驗(yàn)相結(jié)合的方法探究黃芩提取物在最佳提取工藝下的潛在“替代抗生素”活性，在充分挖掘黃芩抗菌活性的同時(shí)，為黃芩資源的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供試驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本試驗(yàn)所用黃芩購(gòu)自江西臻藥堂藥業(yè)股份有限公司；黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所）；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（上海源葉生物科技有限公司）；大腸桿菌（ATCC25922）、沙門(mén)氏菌（ATCC13314）和金黃色葡萄球菌（ATCC25923）標(biāo)準(zhǔn)菌購(gòu)自中國(guó)微生物菌種保藏中心；36株大腸桿菌、26株沙門(mén)氏菌及20株金黃色葡萄球菌由眾樂(lè)中藥功能成分工程技術(shù)研究中心（濰坊）有限公司贈(zèng)送；LB培養(yǎng)基（索萊寶生物科技有限公司）；甲醇、乙腈、磷酸（美國(guó)TEDIA有限公司，色譜級(jí)）；亞硝酸鈉、硝酸鋁（上海麥克林生化科技股份有限公司）；氫氧化鈉（山東科源生化有限公司）；無(wú)水乙醇（成都金山化學(xué)試劑有限公司）。

1.2 儀器與設(shè)備

真空冷凍干燥機(jī)（寧波新藝超聲設(shè)備有限公司）；ZNHW數(shù)顯電熱套（上海力辰邦西儀器科技有限公司）；LHS-100-A恒溫培養(yǎng)箱（鞏義市宏華儀器設(shè)備工貿(mào)有限公司）；高效液相色譜儀（Waters公司）；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限公司）。

1.3 色譜條件

色譜柱采用Hypersil ODS（ 150mm×4.6mm ，5mm ），流動(dòng)相A相為乙腈，B相為 0.05% 磷酸水溶液，以體積 30%：70% （A：B）的比例進(jìn)行洗脫，流速 1.00mL/min ，柱溫 30% ，進(jìn)樣量 10μL

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1黃芩水提物的制備

取黃芩藥材，按照一定的料液比加入蒸餾水充分浸泡，煎煮一定時(shí)間和次數(shù)后過(guò)濾，合并濾液濃縮至 1mg/mL （按生藥量計(jì)算），得到黃芩水提物濃縮液（ C=m/V ，其中 c 代表黃芩水提物濃縮液濃度， m 代表黃芩藥材生藥質(zhì)量， V 代表濃縮后的體積），冷凍干燥 ^48h 后得到黃芩水提物[23]

1.4.2黃芩苷和總黃酮含量的測(cè)定

黃芩苷含量的測(cè)定采用《中國(guó)藥典》（2020版）中規(guī)定的黃芩苷測(cè)定方法（HPLC法）[24]，精密稱取黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品適量，配制質(zhì)量濃度為20、40、80、

160Ω.320μg/mL 的溶液，按照1.3中色譜條件進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)進(jìn)樣3針。以黃芩昔的濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算相關(guān)系數(shù) （R²） 。

總黃酮含量采用紫外分光光度法進(jìn)行測(cè)定[25]。配制 0.1mg/mL 的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，取不同體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液置于容量瓶中，依次加入 5% NaNO₂ 、 10% Al （ NO₃）₃.1.0 mol/LNaOH 溶液，用60% 乙醇定容，在 510nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。總黃酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線以蘆丁濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制。將適量的提取液加入一定的蒸餾水于容量瓶中定容，按上述方法測(cè)得樣品吸光度，代入回歸方程，計(jì)算黃芩中黃芩昔含量和總黃酮含量。

1.4.3單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本研究設(shè)置不同的料液比 $（ 1 ＼colon 1 3 ＼ 、 1 ＼colon 1 5 ＼ 、 1 ＼colon 1 7$ ）、提取次數(shù)（1、2、3、4、5次）和提取時(shí)間 （1.5，2.0，2.5，3.0，3.5h） 作為影響提取過(guò)程的因素，以黃芩昔和總黃酮的含量為檢測(cè)指標(biāo)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

1.4.4總評(píng)歸一法結(jié)合響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝參數(shù)

本試驗(yàn)參考文獻(xiàn)方法[22]，采用總評(píng)歸一法優(yōu)化提取參數(shù)，因提取效果僅使用總黃酮含量作為評(píng)價(jià)的指標(biāo)不足以代表效果的優(yōu)劣，故對(duì)黃芩昔和總黃酮含量2個(gè)指標(biāo)的總評(píng)歸一值（Overall Desirability，O_p ）作為響應(yīng)值進(jìn)行綜合評(píng)分，選用Hassan法對(duì)這2個(gè)指標(biāo)進(jìn)行歸一化處理，2個(gè)指標(biāo)的取值越大表明黃芩水提物的活性越高。計(jì)算公式為 d_i=（Y_i- ，其中 d_i 為各指標(biāo)的 O_p 值， Y 為指標(biāo)測(cè)量值， Y_min 為指標(biāo)中最小值， Y_max 為指標(biāo)中最大值； O_D=（d₁+d₂+d₃+…d_k）/k ，其中 k 為指標(biāo)數(shù)[26-27]。以單因素試驗(yàn)結(jié)果作為基礎(chǔ)，選取料液比、提取次數(shù)和提取時(shí)間中影響較大的因素作為考察因素，采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)，優(yōu)化黃芩中黃芩苷和總黃酮的提取工藝參數(shù)，確定最佳提取工藝。

1.4.5黃芩水提物的抗菌活性評(píng)估

體外抑菌試驗(yàn)通過(guò)采用微量二倍稀釋法（即96孔板法）[28]對(duì)黃芩水提物的抑菌活性進(jìn)行測(cè)定。取黃芩水提液經(jīng)微孔濾膜 （0.22μm） ）濾過(guò)，用LB培養(yǎng)基成倍稀釋8個(gè)濃度梯度后，依次加入微量最低抑菌濃度（Minimum Inhibitory Concentration， P_MIC ）測(cè)定板中，每孔 0.1mL ，分別加入3種菌懸液（大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌），每孔 0.1mL 陽(yáng)性對(duì)照各加入菌懸液和液體培養(yǎng)基 0.1mL ，陰性對(duì)照加入液體培養(yǎng)基 0.2mL 。將微量 P_MC 測(cè)定板置于 37^°C 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h 后觀察，在陰性對(duì)照完全沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)檢測(cè)得到的最低藥物濃度即為 P_MIC ，并參考文獻(xiàn)方法[29]繪制曲線計(jì)算黃芩水提物 P_MIC50 和 P_MICS0 （即在一批試驗(yàn)中能抑制50% 和 90% 受試菌生長(zhǎng)所需的 P_MC ）。

1.4.6 數(shù)據(jù)處理

采用MicrosoftExcel2O1O和IBMSPSSStatistics26.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析。應(yīng)用Design-Expert軟件建立響應(yīng)面模型擬合對(duì)響應(yīng)面的考察因素和評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行處理，單因素方差分析對(duì)模型進(jìn)行驗(yàn)證，檢驗(yàn)各處理組之間的差異顯著性（ 。

2 結(jié)果與分析

2.1單因素試驗(yàn)結(jié)果分析

2.1.1料液比對(duì)黃芩中黃芩苷和總黃酮含量的影響

基于1.4.2試驗(yàn)方法得到黃芩昔標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為： Y=194 643x+854.2 1 R²=0.9997 ），總黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為： Y=0.340 5x+0.123 9 （ R²= 0.9994）。由表2可知，料液比為 時(shí) O_p 值最大，料液比小于 1：17g/mL 時(shí)， O_p 值隨著料液比的增加而增加。當(dāng)料液比大于 1：17g/mL 時(shí)， O_p 值則開(kāi)始下降，初步推測(cè)可能是由于溶劑含量的增加，其他易溶于水的成分也被提取出來(lái)，導(dǎo)致 O_p 值降低。因此，選擇 1：15g/mL 、 1：17‰ 、1：19g/mL 作為響應(yīng)面的優(yōu)化水平更合理。

2.1.2提取次數(shù)對(duì)黃芩中黃芩苷和總黃酮含量的 影響

由表3可知，當(dāng)提取次數(shù)為3次時(shí)， O_p 值最大，提取次數(shù)少于3次時(shí)， O_p 值隨著提取次數(shù)的增加而增加。然而當(dāng)提取次數(shù)大于3次時(shí)， O_p 值則開(kāi)始降低?？赡苁怯捎谔崛〈螖?shù)的增加，導(dǎo)致某些黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)被破壞，使 O_p 值降低。因此，選擇提取2、3、4次作為響應(yīng)面的優(yōu)化水平更為合理。

2.1.3提取時(shí)間對(duì)黃芩中黃芩苷和總黃酮含量的影響

由表4可知，當(dāng)提取時(shí)間為 2.5h 時(shí)， O_p 值最大，提取時(shí)間小于 2.5h 時(shí)， O_p 值隨提取時(shí)間的增加而增加。當(dāng)提取時(shí)間大于 2.5h 時(shí)， O_p 值則開(kāi)始降低?？赡苁怯捎谔崛r(shí)間的延長(zhǎng)，黃酮類成分的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，或其他類物質(zhì)大量溶出，最終導(dǎo)致 O_p 值降低。因此，選擇提取 2.0，2.5，3.0h 作為響應(yīng)面的優(yōu)化水平更為合理。

2.2總評(píng)歸一結(jié)合響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝參數(shù)的結(jié)果

2.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，本試驗(yàn)將料液比（A）、提取次數(shù) （B） 和提取時(shí)間 （C） 作為考察因素，篩選出3水平作為考察水平（表5），以黃芩水提物中黃芩昔和總黃酮含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用三因素三水平Box-Behnken響應(yīng)面法對(duì)試驗(yàn)進(jìn)行設(shè)計(jì)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表6。

2.2.2建立響應(yīng)面模型擬合及方差分析

采用Design-Expert軟件，以料液比（A）、提取次數(shù) （B） 和提取時(shí)間 （C） 作為變量，評(píng)價(jià)指標(biāo)選取黃芩水提物中黃芩苷和總黃酮含量， O_p 值評(píng)分為響應(yīng)值，依據(jù)響應(yīng)面結(jié)果回歸方程為： O_D=0.99+ 0.041A-0.019B-0.34C+0.070AB+0.00675AC+ 0.015BC-0.21A²-0.24B²-0.39C² 。響應(yīng)面模型方差分析及顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7。由表7可知，此模型差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.01 ），且模型對(duì)該試驗(yàn)的擬合度較好（失擬項(xiàng) F=6.17，P=0.0555gt; 0.05）。由矯正系數(shù) （R_Adj²=0.9957 ）、預(yù)測(cè)復(fù)相關(guān)系數(shù)（ R²=0.9981 ），預(yù)測(cè)相關(guān)系數(shù)（ R_Pred²=0.9747 可知，偏差在合理范圍內(nèi)，實(shí)際值和預(yù)測(cè)值擬合度較好。

2.2.3響應(yīng)面優(yōu)化分析

響應(yīng)面3D圖及等高線分析圖如圖1所示。結(jié)合表7的 P 值可知 A、C、AB、A²、B²、C² 因素對(duì) O_p 值均具有顯著性（ Plt;0.01 ）。由圖1可知，料液比和提取時(shí)間對(duì)響應(yīng)面弧面影響較大，料液比和提取次數(shù)的交互作用對(duì) O_p 值影響較大。故最終確定最佳提取工藝參數(shù)為料液比 1：172 3g/mL 、提取次數(shù)3次、提取時(shí)間 2.38h ，此條件下 O_p 值為0.98。

2.2.4 工藝驗(yàn)證

將2.2.3優(yōu)化后的工藝參數(shù)進(jìn)行3次平行試驗(yàn)，考慮到實(shí)際操作的可行性，將試驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行取整處理，確定為料液比 、提取次數(shù)3次、

提取時(shí)間 2.5h ，得到的 O_p 均值為0.99，與預(yù)測(cè)值0.98相比偏差為 1.02% ，說(shuō)明本試驗(yàn)所建模型預(yù)測(cè)性較好且相對(duì)穩(wěn)定。

2.3黃芩水提物的抗菌活性評(píng)估結(jié)果

2.3.1 對(duì)大腸桿菌的抑菌作用

黃芩水提物對(duì)大腸桿菌的抑制作用見(jiàn)表8和表9。由表8可知，36株大腸桿菌中有2株菌株在藥液濃度為 10mg/mL 時(shí)停止生長(zhǎng)，有20 株大腸桿菌菌株在藥液濃度為 20mg/mL 時(shí)停止生長(zhǎng)，有14 株大腸桿菌菌株在藥液濃度為 40mg/mL 時(shí)停止生長(zhǎng)，其余藥液濃度無(wú)明顯抑菌作用。由表9可知，黃芩水提物的藥液濃度在 20mg/mL 和40mg/mL 時(shí)，被抑制生長(zhǎng)的大腸桿菌菌株數(shù)分別達(dá)到了 61.11% 與 100% ，可見(jiàn)黃芩水提物對(duì)36株大腸桿菌均有不同程度的抑菌作用，且 P_MC50 為18.00mg/mL P_MIC90 為 34.86mg/mL 。

2.3.2 對(duì)沙門(mén)氏菌的抑菌作用

黃芩水提物對(duì)沙門(mén)氏菌的抑制作用見(jiàn)表10和表11。由表可知，26株沙門(mén)氏菌中有1株菌株（ 3.85% ）在藥液濃度為 2.5mg/mL 時(shí)可見(jiàn)停止生長(zhǎng)，有4株菌株 （15.38% ）在藥液濃度為 5mg/mL 時(shí)停止生長(zhǎng)，有9株菌株 34.62% ）在藥液濃度為10mg/mL 時(shí)停止生長(zhǎng)，有11株菌株 （42.31% ）在藥液濃度為 20mg/mL 時(shí)停止生長(zhǎng)，有1株菌株（ 3.85% ）在藥液濃度為 40mg/mL 時(shí)停止生長(zhǎng)，其余藥液濃度無(wú)明顯抑菌作用。可見(jiàn)黃芩水提物對(duì)26株沙門(mén)氏菌均有不同程度的抑菌作用，其中對(duì)沙門(mén)氏菌菌株 A₂ 的抑菌效果最好，且 P_MIC50 為9.47mg/mL P_MIC90 為 18.26mg/mL 。

2.3.3對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用

黃芩水提物對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用見(jiàn)表12和表13。由表12可知，20株金黃色葡萄球菌均在藥液濃度為 10mg/mL 時(shí)可見(jiàn)停止生長(zhǎng)，其余藥液濃度無(wú)明顯抑菌作用。由表13可知，黃芩水提物的藥液濃度在 10mg/mL 時(shí)，被抑制生長(zhǎng)的金黃色葡萄球菌菌株數(shù)達(dá)到 100% ，可見(jiàn)黃芩水提物對(duì)20株金黃色葡萄球菌均有一定程度的抑菌作用，且 P_MC50 與 P_MC90 均為 10mg/mL 。

3 討論與結(jié)論

黃芩中黃酮類化合物的提取方法較多，林玉萍等[30]與劉潔等[31]采用乙醇加熱回流提取黃酮，經(jīng)萃取、濃縮后的提取率分別為 5.8% 和 1% 。郭振庫(kù)等[32]和程存歸等[33]采用微波法提取黃芩苷，發(fā)現(xiàn)其提取率分別為 13.12% 和 14.51% 。于千等[34]采用水煎法提取黃芩，在最佳條件下提取率為 10.56% 。李杰等[35]采用超聲輔助提取法對(duì)黃芩中黃芩苷、漢黃芩苷和黃芩素進(jìn)行提取，3種黃酮類成分的總得率為 230mg/g 。從這些提取方法來(lái)看，盡管水提取法沒(méi)有最佳的提取率，但根據(jù)具體情況，在應(yīng)用到臨床和畜牧業(yè)上時(shí)，有機(jī)溶劑提取法存在較大的安全隱患；微波提取法和超聲提取法能耗高，容易破壞活性物質(zhì)；唯有水提取法安全性高、成本較低、提取率較好，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。故本試驗(yàn)選擇水提取法最佳的工藝條件及參數(shù)，可提高黃芩中黃酮類成分的提取率，以便充分發(fā)揮其功效。

大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌等是常見(jiàn)的食品污染菌、飼料添加劑污染菌和致病菌，對(duì)人類及牲畜的健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅[36]。近年來(lái)，中醫(yī)藥治療細(xì)菌性感染的研究日益增多。特別是在運(yùn)用抗生素治療時(shí)加入中藥，或直接用中藥替代抗生素治療可以有效提高抗菌活性，并降低抗生素的不良反應(yīng)，其中黃芩在大多中藥中表現(xiàn)出較高的應(yīng)用潛力。黃芩具有廣譜抗菌作用，與青霉素、頭孢菌素、喹諾酮類等抗菌藥物都可協(xié)同發(fā)揮抗菌的作用[37]。崔一喆等[38]通過(guò)測(cè)定黃芩提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門(mén)氏菌的體外抑菌活性，發(fā)現(xiàn)其對(duì)3種病原菌均具有一定的抑制作用，其中對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制活性最強(qiáng)。劉柏杉等[39]表示黃芩提取物對(duì)金黃色葡萄球菌具有明顯的體外抗菌活性（ P_MIC 為 1.25g/L ），劉俊俊等[40]也指出黃芩水提物能使金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)速度降低，作用明顯。此外何湘蓉等[4通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)黃芩水提取物對(duì)已經(jīng)產(chǎn)生耐藥性的金黃色葡萄球菌的抑菌作用強(qiáng)于其醇提取物。任明星等[42研究發(fā)現(xiàn)黃芩苷可顯著降低小鼠體內(nèi)的細(xì)菌數(shù)，有效抑制其增殖。這些研究表明，黃芩提取物可以通過(guò)抑制病原菌的生長(zhǎng)和繁殖發(fā)揮其防治細(xì)菌性疾病的作用，且對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等菌株均表現(xiàn)出十分良好的抗菌和殺菌作用。本研究結(jié)果與以上研究相符，采用響應(yīng)面法優(yōu)化黃芩提取物水提取法的工藝參數(shù)，并在最佳提取工藝參數(shù)下探究黃芩水提物的抑菌活性，以此揭示黃芩的“替代抗生素”作用。

本試驗(yàn)通過(guò)總評(píng)歸一響應(yīng)面法，以黃芩水提物中黃芩苷和總黃酮含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，料液比、提取次數(shù)和提取時(shí)間作為考察因素，對(duì)黃芩的提取工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳提取工藝：液料比 1：17 、提取次數(shù)3次、提取時(shí)間 2.5h.O_p 值0.99、黃芩苷含量 12.26% 、總黃酮含量 32.08% ，該條件下黃芩水提物對(duì)大腸桿菌的 P_MC50 為 18.00mg/mL?P_MIC90 為 34.86mg/mL ，對(duì)沙門(mén)氏菌的 P_MCS0 為 9.47mg/mL 、P_MIC90 為 18.26mg/mL ，對(duì)金黃色葡萄球菌的 P_MC50 和 P_MC90 均為 10mg/mL 。黃芩水提物因富含黃芩昔和總黃酮等活性成分具有明顯的廣譜抑菌效果，通過(guò)對(duì)其進(jìn)行工藝參數(shù)的優(yōu)化得到一種高效提取方法，使黃芩作為“替代抗生素”產(chǎn)品在畜牧業(yè)領(lǐng)域中具有較好的應(yīng)用前景，為黃芩資源價(jià)值的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供試驗(yàn)基礎(chǔ)。

（責(zé)任編輯：嚴(yán)秀芳 胡吉鳳）

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Optimization of the Extraction Process and Antibacterial Activity of Aqueous Extract of Scutellaria baicalensis by Response Surface Method

Cao Jiangsong，Wei Qing，Zhan Jun，Gao Depan， Jian Bingbing，Zhang Jing*（Experimental Animal Institute， Guizhou Universityof Traditional Chinese Medicine，Guiyang 55oO25，Guizhou，China）

Abstract：Todetermine theoptimal extractionconditionsandantibacterialactivityfortheaqueousextractof Scutelaria baicalensis，which were used asevaluation material and extracted by aqueous extraction.The contents of baicalin and totalflavonoids were usedasevaluation indicators for processoptimization.The processparameters were optimized by the total evaluation normalized-response surface method.The antibacterial activityof theoptimized extract was evaluated using the broth microdilution method，and the Minimum Inhibitory Concentration （ P_MC"）against different bacterial strains was determined.The resultsindicated that theoptimal extraction conditions for theaqueousextractof S baicalensis wereamaterial-to-liquid ratioof1：17，three extractioncycles，andan extractiontimeof2.5h.Under these conditions，the contents of baicalein and total flavonoids reached 11.97% and 27.03% ，respectively.Additionally，in vitro bacteriostatic tests showed that the P_MC50"and P_MIC90"of the extract against Escherichia were 20 mg/mL and 40 mg/mL， against Salmonella with P_MCS0"of 10 mg/mL and P_MIC90"of 20mg/mL ， and against Staphylococcus aureus with P_MICS0"and （20 P_MC90"of 10 mg/mL，respectively. These results demonstrate that S . baicalensis aqueous extract possesses significant antibacterial activity. In conclusion，under its optimal extraction conditions，the aqueous extract of S .baicalensis could effctivelyinhibitthegrowthandreproductionof variouspathogenic bacteria，suggestingits high antimicrobial activity and itspotential asan‘a(chǎn)lternative antibiotic’in thetreatmentof bacterial infections.Thisstudy shows thatasan ‘a(chǎn)lternative antibiotic’product，S.baicalensis has a beter application prospect in animal husbandry.This study provides a new experimental basis for the development and application of traditional Chinese medicine.

Keywords;Scutellaria baicalensis Georgi；baicalin；totalflavonoids；responsesurface method；antimicrobial activity