中圖分類號：R978.1 文獻標(biāo)志碼：A 文章編號：1001-8751（2025）03-0211-07

Distribution and Drug Resistance Analysis of Pathogenic Bacteria in Adult Blood Culturesfrom 2020 to 2023 ata Hospital in Hefei Area

Wang Juan，XiaXiu-san，WangXin，XuLi-hui （DepartmentofClinical Laboratory，People's HospitalofLujiang County，Anhui Province，Hefei）

Abstract： ObjectiveThe distribution and drug sensitivity of common isolates were gathered，the composition of positive isolates and drug sensitivity data were compiled，and the blood culture results of adult inpatients at a hospital in the Hefei region were examined.MethodsThis retrospective study was conducted at our hospital from January 2020 to December 2023.Specimens for blood culture testing and reporting from adult inpatients were selected，and the isolates cultured after machine-reported positivity were identifiedand analyzedfordrugsensitivity. 3 246 test results were included for statistical analysis after contaminated specimens and duplicate specimens of the same strain that had been isolated from the same patient within a week were eliminated.ResultsA total of 466 strains of pathogens were detected， with a blood culture positivity rate of 14.36%（466/3246） . Among them， 287 Gram-negative bacteria and 171 Gram-positive bacteria were detected， accounting for 61.59%（287/466） and （20 36.70%（171/466） ，respectively. There were 5 strains of anaerobic bacteria， accounting for 1.07%（5/466） ；2 strains of fungi， accounting for 0.43%（2/466） ；and1 strainof Gram-positive Corynebacterium，accounting for 0.21%（1/466） The top three pathogensWere Escherichia coli（172 strains， 59.93% ），Klebsiella pneumoniae（65strains， 22.65% ，and Staphylococcus aureus（44 strains， 25.73% ）. Escherichia coli showed a resistance rate of less than 8% to carbapenems， piperacillin/tazobactam，cefoperazone/sulbactam，and amoxicillin/clavulanicacid，while Klebsiella pneumoniae showed a resistance rate of less than 7% to these drugs. In the statistics of important drug-resistant strains， a total of 2strains ofcarbapenemantibioticresistantEscherichiacoli（CR-ECO），2strainsof Enterobactercloacaeresistantto carbapenems （CR-ECL），1 strainof carbapenemresistant Klebsiell pneumoniae（CR-KPN），11 strains ofoxacillinresistant Staphylococcus aureus（MRSA）. Conclusion The pathogens isolated from blood cultures in our hospital weremainlyGram-negativebacteria，especiallyEscherichiacoli.Bacterialresistancetoantibioticsvaried，and in order to prevent the growth of dug-resistant bacteria as aresult ofirrational antibiotic use，antibiotic sensitivity results should be fully taken into account when using antibiotics.Combination therapy with antibiotics can be considered for drug-resistant strains to achieve therapeutic goals.

Key words： blood culture； pathogenic bacteria；drug-resistant bacteria；distribution of positive bacteria;antibiotics； drug resistance rate

血流感染（Bloodstreaminfection，BSI）是指病原微生物進入血液引起的播散感染，是危及人類生命的全身性感染疾病[1]。主要由細(xì)菌或真菌等微生物及產(chǎn)生的毒素侵入血液引起的感染，有些如導(dǎo)管相關(guān)性感染可無明顯的毒血癥狀，但是大部分BSI可引起發(fā)熱寒戰(zhàn)，肝脾部位出現(xiàn)腫大，全身出現(xiàn)皮疹，心跳加快，呼吸急促等一系列全身性炎癥反應(yīng)的臨床癥狀，嚴(yán)重者甚至可引起感染性休克甚至死亡[2]。近年來隨著免疫抑制劑、廣譜抗菌藥物和激素類藥物的廣泛應(yīng)用以及侵入性操作的廣泛開展[3-4]，血流感染的發(fā)病率有逐年增高趨勢。有資料研究顯示我國每年血流感染病例超過20萬人，病死率高達 28.7%^[5] ，發(fā)生血流感染病死率較高，膿毒癥帶來的感染性休克病死率可高達 60%^[[6]] ，危害較大。因此當(dāng)患者伴隨有發(fā)熱和寒戰(zhàn)等癥狀，需診斷患者是否發(fā)生血流感染，及時送檢血培養(yǎng)[7]，早期診斷血流感染，明確病原菌，選用合適的抗菌藥物，合理使用抗菌藥物，了解本地區(qū)病原菌分布及耐藥趨勢和特點，對患者治療具有重要意義。本文通過對地區(qū)某醫(yī)院連續(xù)4年成人住院患者血培養(yǎng)分離出的陽性菌數(shù)量、菌種分布特征及藥敏結(jié)果進行總結(jié)分析，為臨床在血流感染初期的抗菌藥物選擇提供科學(xué)參考。

1資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

回顧性收集地區(qū)某醫(yī)院2020年1月—2023年12月期間（年齡 ?18 歲的成人）的住院患者，血培養(yǎng)陽性瓶分離的菌株標(biāo)本共3261份（同一患者僅統(tǒng)計第一次分離菌株信息），根據(jù)2022年《血液培養(yǎng)技術(shù)用于血流感染診斷臨床實踐專家共識》[8]和《臨床微生物實驗室血培養(yǎng)操作規(guī)范》[9]，結(jié)合臨床資料判斷，去除15份污染標(biāo)本，污染率為 0.46%（15/3261） ，共計3246份檢測結(jié)果納入統(tǒng)計分析，其中陽性標(biāo)本466份，陰性標(biāo)本2780份，血培養(yǎng)陽性率為 14.36%（466/3246） 。

1.2血培養(yǎng)流程

根據(jù)《臨床微生物實驗室血培養(yǎng)操作規(guī)范》，疑似患者為血流感染，即在抗菌藥物應(yīng)用之前抽取雙側(cè)雙套血培養(yǎng)標(biāo)本（即2套4瓶，部分病例由于依從性原因采集1套2瓶），每瓶 8～10mL 。

1.3儀器和試劑

血培養(yǎng)儀器為碧迪公司（Becton，Dickinsonandcompany）的Bactec9050全自動血培養(yǎng)儀，微生物鑒定儀器為北京毅新博創(chuàng)生物科技有限公司的Clin-TOFⅡ飛行時間質(zhì)譜儀，藥敏實驗儀器為生物梅里埃中國有限公司的Vitke2-Compact全自動細(xì)菌鑒定藥敏儀。血培養(yǎng)瓶為碧迪公司的成人需氧微生物培養(yǎng)瓶和厭氧微生物培養(yǎng)瓶。鑒定試劑為北京毅新博創(chuàng)生物科技有限公司的Clin-TOFII飛行時間質(zhì)譜儀標(biāo)本處理液。

藥敏試劑為生物梅里埃中國有限公司的革蘭陰 性桿菌GN13藥敏卡、革蘭陰性桿菌GN334藥敏卡、 革蘭陰性桿菌GN335藥敏卡和革蘭陽性菌GP68藥敏 卡。培養(yǎng)基選用天達診斷試劑有限公司的哥倫 比亞血瓊脂培養(yǎng)基、非選擇性巧克力瓊脂培養(yǎng)基、 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基和沙保羅瓊脂培養(yǎng)基。

1.4方法

1.4.1血培養(yǎng)陽性標(biāo)本處理

血培養(yǎng)儀出現(xiàn)陽性報警后，取出培養(yǎng)瓶，記錄報警時間及觀察生長曲線。在生物安全柜內(nèi)使用無菌注射器抽取瓶中培養(yǎng)物 2～3 滴進行革蘭染色涂片，同時根據(jù)鏡檢結(jié)果在哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基、非選擇性巧克力瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基和沙保羅瓊脂培養(yǎng)基中選擇相應(yīng)的培養(yǎng)基進行轉(zhuǎn)種，放入 35^°C 、 5% 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 18～24h ，若未見細(xì)菌生長則繼續(xù)培養(yǎng)。

1.4.2 細(xì)菌鑒定

采用北京毅新博創(chuàng)生物科技有限公司的ClinTOFⅡI飛行時間質(zhì)譜儀進行質(zhì)譜法鑒定。

1.4.3 藥敏試驗

采用生物梅里埃中國有限公司的Vitke2-Compact鑒定藥敏儀進行分離菌的藥敏試驗，藥敏折點結(jié)果判讀依據(jù)美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（CLSI）第33版《抗菌藥物敏感性試驗執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)》。

1.4.4質(zhì)控菌株

大腸埃希菌ATCC25922、大腸埃希菌ATCC35218、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黃色葡萄球菌ATCC29213、糞腸球菌ATCC29212、肺炎鏈球菌ATCC49619和白念珠菌ATCC14053，均為本實驗室常備菌株。

1.5血培養(yǎng)污染判斷

根據(jù)2022年《血液培養(yǎng)技術(shù)用于血流感染診斷臨床實踐專家共識》和《臨床微生物實驗室血培養(yǎng)操作規(guī)范》，結(jié)合臨床資料對本文統(tǒng)計的檢出菌中污染菌做出判斷，共計有15份污染標(biāo)本，污染率為0.46%（15/3261）

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用瑞美系統(tǒng)統(tǒng)計功能以及Whonet5.6軟件對菌株分布及藥敏結(jié)果進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析。

2結(jié)果

2.1血培養(yǎng)分離病原菌的構(gòu)成及分布

剔除一個星期內(nèi)重復(fù)檢測分離出的菌株及15份污染標(biāo)本后，本研究共納入分析病原菌466株，本文將分離出的病原菌按照革蘭染色性及病原菌類別結(jié)合起來分組統(tǒng)計。統(tǒng)計出需氧及兼性厭氧革蘭陰性桿菌287株，占比 61.59% ，需氧革蘭陽性球菌171株，占比 36.70% ，其他類型病原菌8株，占比1.72% 。在需氧及兼性厭氧革蘭陰性桿菌和需氧革蘭陽性球菌里，根據(jù)細(xì)菌名稱或種屬分類列出各類病原菌數(shù)量，分別再計算各自的占比，具體情況如表1＼～表3所示。

2.2不同科室血培養(yǎng)結(jié)果

血培養(yǎng)送檢標(biāo)本數(shù)以感染性疾病科最多（1651例），其次為腎內(nèi)科（293例）、呼吸與危重癥科（202例）、重癥醫(yī)學(xué)科（163例）和心血管內(nèi)科（143例）等。陽性菌率分離率較高的科室依次是肝膽外科 （29.01%） 、腎內(nèi)科 （26.96% 、消化內(nèi)科 （18.75%） 、神經(jīng)外科1 （17.24%） 和泌尿外科 （14.04% 等。上述科室的患者具有病情危重、基礎(chǔ)疾病、存在感染、營養(yǎng)不良以及有創(chuàng)治療等特點，導(dǎo)致其他部位的病原菌通過各種管路或機體屏障入侵血液系統(tǒng)的機會增多，研究提示不同科室患者血培養(yǎng)陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，詳見表4。

2.3各類病原菌耐藥情況

2.3.1主要革蘭陰性菌耐藥情況

在碳青霉烯類藥物敏感實驗中，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌均保持著較高的敏感率，其中大腸埃希菌對厄他培南和亞胺培南的耐藥率均僅為 1.16% 。肺炎克雷伯菌對厄他培南和亞胺培南的耐藥率分別為 3.08% 和 1.54% 。上述兩種菌對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦和阿莫西林/克拉維酸等藥物的耐藥率也比較低，均在 8% 以下。但是兩種菌對氨芐西林或氨芐西林/舒巴坦耐藥率均較高，其中大腸埃希菌對氨芐西林或氨芐西林/舒巴坦耐藥率分別為79.07% 和 60.98% 。見表5。

2.3.2 碳青霉烯耐藥腸桿菌目細(xì)菌（CRE）檢出及耐藥 情況

通過對267株需氧革蘭陰性桿菌進行碳青霉烯類藥物的藥敏試驗，我們統(tǒng)計出對碳青霉烯耐藥腸桿菌目細(xì)菌（CRE）共檢出5株，檢出率為 1.87%（5/267） 其中耐碳青霉烯類大腸埃希菌（CR-ECO）2株，耐碳青霉烯類陰溝腸桿菌（CR-ECL）2株，耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（CR-KPN）1株。CRE對大多數(shù)臨床常用抗菌藥物呈高度耐藥，對加酶抑制劑的復(fù)合制劑以及第三、四代頭孢菌素類藥物的耐藥率均在 100% ，但是對阿米卡星有較高的敏感性，5株CRE均對阿米卡星表現(xiàn)為敏感，耐藥率為0，見表6。

2.3.3 主要革蘭陽性菌耐藥情況

在檢出的44株金黃色葡萄球菌中，對苯唑西林耐藥的金黃色葡萄球菌（MRSA）共計11株，耐藥率為 25.00%（11/44） 。在檢出的77株凝固酶陰性葡萄球菌中，對苯唑西林耐藥的凝固酶陰性葡萄球菌（MRSCON）共計48株，耐藥率為 62.34%（48/77） 。本文對這兩類葡萄球菌的藥敏結(jié)果進行分析，發(fā)現(xiàn)苯唑西林耐藥的葡萄球菌，對紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星和慶大霉素等抗菌藥物的耐藥性均高于苯唑西林敏感的葡萄球菌，這與邵俊杰等[10]研究結(jié)果相同，詳情見表7和表8。

3討論

近年來，隨著侵入性手術(shù)的不斷增加以及廣譜抗菌藥物和皮質(zhì)類固醇的不合理使用，BSI的發(fā)病率和病死率逐年上升，尤其以肺炎克雷伯菌引起的血流感染病死率較高[1]。對于血流感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)還是血培養(yǎng)，提高血培養(yǎng)檢測效率不但對于明確病原菌，進而盡快知曉其耐藥情況對于明確病原學(xué)診斷及治療具有重要意義。本研究共收集成人血培養(yǎng)標(biāo)本3246份，其中陽性標(biāo)本466份，陰性標(biāo)本2780份，血培養(yǎng)陽性率為 14.36% 。Gao等[12]收集大連市中心醫(yī)院住院患者血培養(yǎng)數(shù)據(jù)，共計檢測24786份，陽性率為 7.15% ，與本文收集的樣本陽性率略有不同。提示各種病原菌的分布差異可能與不同醫(yī)院病種組成不同有關(guān)[13]。

抗菌藥物是臨床治療血流感染的首選藥物，但由于抗菌藥物的濫用，致病菌的耐藥問題日益嚴(yán)重。作為血流感染的金標(biāo)準(zhǔn)，血培養(yǎng)在診斷病原菌，并知曉其耐藥情況，進而合理應(yīng)用抗菌藥物快速控制感染中，起著不可或缺的作用。本次研究發(fā)現(xiàn)居前三位病原菌分別是大腸埃希菌172株，占總病原菌比率為 36.91%（172/466） 、肺炎克雷伯菌65株，占總病原菌比率為 13.95%（65/466） 、金黃色葡萄球菌44株，占總病原菌比率為 9.44%（44/466） ，這與王揚等[14]研究統(tǒng)計結(jié)果接近。亞胺培南、美羅培南、厄他培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦和阿莫西林/克拉維酸等對于革蘭陰性桿菌均具有良好的抑制作用。根據(jù)CLSIM100第31版建議，臨床應(yīng)考慮優(yōu)先選用哌拉西林/他唑巴坦和阿莫西林/克拉維酸等藥物。本文革蘭陰性桿菌的藥敏試驗中發(fā)現(xiàn)氨芐西林或氨芐西林/舒巴坦耐藥率均較高，其中大腸埃希菌對氨芐西林或氨芐西林/舒巴坦耐藥率分別為79.07% 和 60.98% 。臨床應(yīng)避免使用該類藥物。CRE對大多數(shù)臨床常用抗菌藥物呈高度耐藥，對加酶抑制劑的復(fù)合制劑以及第三、四代頭孢菌素類的耐藥率均在 100% ，但對阿米卡星有較高的敏感性，與關(guān)佳灝等[15]研究結(jié)果一致，可用碳青霉烯類藥物聯(lián)合阿米卡星治療，可望降低病死率[16]。

本次統(tǒng)計分析中，凝固酶陰性葡萄球菌共77株，占需氧革蘭陽性球菌比率為 45.03% 。凝固酶陰性葡萄球菌是引起導(dǎo)管相關(guān)血流感染的重要病原菌[7]，但也是血培養(yǎng)最常見的污染菌，判斷凝固酶陰性葡萄球菌是否為致病菌，需充分考慮患者的臨床癥狀及危險因素，同時結(jié)合白細(xì)胞、降鈣素原和急性時相反應(yīng)蛋白（即在機體發(fā)生炎癥、感染、心肌梗死及腫瘤等情況下，血漿濃度發(fā)生顯著變化的一類蛋白質(zhì)）等感染性指標(biāo)來綜合判斷[18]。一般無發(fā)熱或可歸因地發(fā)熱，且無明顯感染體征，或多次培養(yǎng)出不同菌株，或抗感染治療無效時，即便培養(yǎng)確定細(xì)菌，臨床均判斷為污染菌，包括凝固酶陰性葡萄球菌、棒狀桿菌、芽孢桿菌屬、微球菌屬和痤瘡丙酸桿菌等，培養(yǎng)檢出為污染菌的可能性較大。當(dāng)然如果多次培養(yǎng)出同種上述菌或有血管置管等高危因素時，不應(yīng)輕易判定為污染，而應(yīng)仔細(xì)鑒別[19]。本次研究中，利福平和慶大霉素對葡萄球菌的耐藥率均較低，喹諾酮類藥物在苯唑西林耐藥的葡萄球菌中耐藥率明顯高于苯唑西林敏感的葡萄球菌，目前尚未檢出對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌。

由上述研究可知，我院患者的BSI病原菌復(fù)雜多樣，耐藥性不同。大量研究表明，雙側(cè)雙瓶能有效提高檢出率，并幫助我們判斷所檢出的細(xì)菌污染菌的可能性[20]。所以臨床應(yīng)重視血培養(yǎng)雙瓶送檢，同時還應(yīng)該關(guān)注雙瓶陰性率及報警時間。及時對病原菌分布及耐藥現(xiàn)狀進行監(jiān)測，根據(jù)藥敏結(jié)果合理選擇有效藥物，改善BSI轉(zhuǎn)歸，提高治療效果。

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