（2019-11-01發(fā)布2020-01-01買施）

前言

本技術(shù)要求按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。

本技術(shù)要求作為人用重組單克隆抗體制品生產(chǎn)的通用技術(shù)要求。

本技術(shù)要求由上海藥品審評核查中心提出。

本技術(shù)要求由上海醫(yī)藥行業(yè)協(xié)會歸口。

本技術(shù)要求起草單位：上海藥品審評核查中心、上海醫(yī)藥行業(yè)協(xié)會。

本技術(shù)要求主要起草人：陳桂良、王沖、張一瓊、成殷、付艷、丁力承、付秋雁、譚建新、劉曉丹、于玲莉、劉芬、夷征宇、吳耀衛(wèi)、朱蓓芬。

本技術(shù)要求首批執(zhí)行單位：上海百邁博制藥有限公司、上海復宏漢霖生物制藥有限公司、上海君實生物工程有限公司、上海賽金生物醫(yī)藥有限公司、百濟神州（上海）生物科技有限公司、三生國健藥業(yè)（上海）股份有限公司、勃林格殷格翰生物藥業(yè)（中國）有限公司。

本技術(shù)要求為首次發(fā)布。

1范圍

本通用技術(shù)要求適用于單抗制品商業(yè)化生產(chǎn)全過程。按照GMP要求制備的臨床試驗藥物可參照執(zhí)行。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

中華人民共和國衛(wèi)生部藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范

國家藥典委員會中華人民共和國藥典

ICH指導委員會ICHQ5A（R1）來源于人或動物細胞系的生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全性評價

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本技術(shù)要求。

3.1生物反應器

在受控的溫度、通氣、攪拌、pH值和保證無菌等條件下，對細胞進行有控制的培養(yǎng)或特定反應的容器。

3.2細胞培養(yǎng)

是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使細胞生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。

3.3外源因子

系經(jīng)無意中引入于接種物、細胞基質(zhì)和（或）生產(chǎn)制品所用的原材料及制品中的、可復制或增殖的污染物，包括細菌、真菌、支原體和病毒等。

3.4中間產(chǎn)物

生產(chǎn)過程中形成的、為下一步工藝所用的物質(zhì)，不包括原液。

4技術(shù)要求

4.1原則

4.1.1本文中所指的人用重組單克隆抗體制品（簡稱“單抗制品”）包括傳統(tǒng)的單克隆抗體（鼠源抗體、嵌合抗體、人源化抗體和全人源抗體等）及基于抗體結(jié)構(gòu)的融合蛋白，重點闡述以哺乳動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)制備的IgG型單克隆抗體制品。

4.1.2單抗制品的制造、檢定、保存、運輸及有效期、標簽應當符合《中華人民共和國藥典》中“人用重組單克隆抗體制品總論”的規(guī)定和其他法規(guī)相關(guān)規(guī)定。

4.1.3單抗制品高級結(jié)構(gòu)與其功能有高度關(guān)聯(lián)性，因此，在單抗制品生產(chǎn)過程中，需保證蛋白正確表達和折疊，并維持結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。

4.1.3.1穩(wěn)定表達的細胞株在傳代至一定代次后或培養(yǎng)條件發(fā)生變化時，可能會出現(xiàn)表達基因拷貝的丟失或沉默，從而影響產(chǎn)品的表達量。

4.1.3.2細胞培養(yǎng)期間，培養(yǎng)溫度、溶氧、培養(yǎng)基成分、pH值及剪切力等因素可能通過影響細胞狀態(tài)引起蛋白的聚集、降解、二硫鍵錯配、二硫鍵還原，影響蛋白翻譯后的修飾如糖基化、脫氨、N末端焦谷氨酸環(huán)化和氧化。

4.1.3.3在單抗制品純化與制劑過程中，緩沖溶液類型、pH值、鹽離子類型及濃度、表面活性劑、糖類及其它保護劑等可能影響抗體的穩(wěn)定性。

4.1.4單抗制品的病毒污染可能由細胞系、物料或者在生產(chǎn)過程中偶然引入。為確保產(chǎn)品的安全性，需以風險評估及全過程控制的理念控制內(nèi)源性和外源性的潛在病毒污染。

4.2人員

企業(yè)應當配備具有單抗制品相應專業(yè)知識的生產(chǎn)、質(zhì)量、管理人員和技術(shù)人員，其中生產(chǎn)管理負責人、質(zhì)量管理負責人及質(zhì)量受權(quán)人應符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》相關(guān)人員資質(zhì)要求，并具有相關(guān)專業(yè)知識和工作經(jīng)驗，能夠在生產(chǎn)、質(zhì)量管理中履行職責。

4.3廠房與設(shè)備

4.3.1單抗制品生產(chǎn)環(huán)境的空氣潔凈度級別應當與產(chǎn)品和生產(chǎn)操作相適應，廠房與設(shè)施、設(shè)備應最大限度地避免污染和交叉污染，特別是病毒污染，并防止批次間交叉污染。

4.3.1.1應當減少單抗制品生產(chǎn)環(huán)境中的微生物及其它外來微生物。通常原液除菌步驟的環(huán)境控制應當與制劑半成品配制環(huán)境一致。

4.3.1.2單抗制品病毒去除和滅活的前后步驟，應采取必要的預防措施以防止?jié)撛诘牟《疚廴尽?/p>

4.3.1.3應根據(jù)各單抗制品特性和設(shè)備情況，采取相應的預防交叉污染措施，如使用專用廠房和設(shè)備、階段性生產(chǎn)方式、使用密閉系統(tǒng)等。

4.3.2單抗制品工藝用氣（如壓縮空氣、二氧化碳、氧氣、氮氣等）的質(zhì)量要求與工藝密切相關(guān)，應針對產(chǎn)品進行風險評估，對其質(zhì)量建立相應的標準和監(jiān)測手段。工藝用氣的供應商應經(jīng)質(zhì)量管理部門批準。

4.3.3二氧化碳培養(yǎng)箱、生物反應器、純化系統(tǒng)、病毒滅活／去除設(shè)備、滅菌設(shè)備和除熱原設(shè)備等需持續(xù)確認。滅菌設(shè)備和除熱原設(shè)備的持續(xù)確認應包含裝載方式確認，以保證其滅菌效果和去熱原效果。與產(chǎn)品直接接觸的相關(guān)設(shè)備需進行清潔驗證，避免污染和交叉污染。

4.3.4深層過濾、連續(xù)流離心機等細胞分離設(shè)備，應制定有效操作措施防止這類設(shè)備成為污染源。

4.3.5如采用計算機化系統(tǒng)，應建立計算機化系統(tǒng)驗證、計算機化系統(tǒng)管理、數(shù)據(jù)管理等文件，全生命周期管控計算機化系統(tǒng)及其產(chǎn)生的電子數(shù)據(jù)。

4.3.6應對貯藏和運輸用的冷庫及冷鏈運輸設(shè)備進行驗證，且保證相關(guān)設(shè)備、設(shè)施能實時監(jiān)控。

4.4物料管理

4.4.1生產(chǎn)用原材料和輔料應符合《中華人民共和國藥典》中“生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制規(guī)程”的要求。應按照風險等級分級控制。盡可能避免使用動物源性的原材料，任何動物源性的成分均應溯源并進行外源因子檢測。

4.4.2培養(yǎng)基、層析填料、病毒過濾膜，濾器、超濾膜包等關(guān)鍵物料應與批準的制造及檢定規(guī)程一致。

4.4.3應制定適合產(chǎn)品的培養(yǎng)基內(nèi)控質(zhì)量標準。其來源、制備、貯存、檢測過程應當有記錄，貯存條件及效期應符合要求。

4.4.4直接接觸產(chǎn)品的一次性細胞培養(yǎng)袋、一次性儲液袋、除菌過濾器等關(guān)鍵一次性材料，企業(yè)應提供適當?shù)尿炞C材料（生物相容性、物理化學相容性、可提取物分析、培養(yǎng)袋完整性和輻照滅菌工藝的有效性等），并使用經(jīng)批準的供應商。

4.4.5質(zhì)量管理部門應當對生產(chǎn)檢驗用關(guān)鍵一次性材料的供應商進行質(zhì)量評估，如一次性使用系統(tǒng)設(shè)計、原材料管理、生產(chǎn)過程監(jiān)控、質(zhì)量控制與保證和運輸確認等。

4.5生產(chǎn)和質(zhì)量控制

4.5.1生產(chǎn)和檢定用細胞需建立完善的細胞庫系統(tǒng)。細胞庫系統(tǒng)的建立、檢定、貯存、維護和使用應當符合《中華人民共和國藥典》和批準的制造及檢定規(guī)程的要求。

4.5.2主細胞庫和工作細胞庫的制備應符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求，建立審核、放行程序。

4.5.3應按照《中華人民共和國藥典》對生產(chǎn)終末細胞進行檢定。

4.5.4應驗證細胞庫細胞在凍存及貯存條件下的穩(wěn)定性。

4.5.5液氮貯存設(shè)備應當有適當?shù)谋O(jiān)測。任何偏離貯存條件的情況及糾正措施都應記錄并評估。不同細胞庫的貯存應當能夠防止差錯、混淆或交叉污染。

4.5.6在指定人員的監(jiān)督下，經(jīng)批準的人員才能進行細胞庫操作。未經(jīng)批準不得接觸細胞庫。

4.5.7應采用批準的制造及檢定規(guī)程中的工藝組織生產(chǎn)和質(zhì)量控制。工藝應經(jīng)過驗證并進行持續(xù)工藝確認。

4.5.8從細胞復蘇開始，整個細胞培養(yǎng)過程中應對微生物及其他可能的污染進行控制，包括生物反應器的接種、取樣和收獲的操作必須使用經(jīng)驗證的技術(shù)。細胞培養(yǎng)過程中不得有外來微生物的污染，如有污染應對原因進行調(diào)查。

4.5.9應記錄細胞株的相關(guān)信息，包括細胞株的名稱、代次、批號、編號、凍存日期、數(shù)量。細胞的傳代水平應不超過批準的制造及檢定規(guī)程中的最高限定代次。

4.5.10應對生產(chǎn)用層析填料、深層過濾膜包、一次性關(guān)鍵材料、病毒過濾膜／濾器等材料的關(guān)鍵信息進行記錄，如名稱、型號／規(guī)格、供應商、批號或其他唯一識別號等。

4.5.11生產(chǎn)過程中應有明確的過程控制參數(shù)，以確保單抗制品安全有效、質(zhì)量可控：如細胞培養(yǎng)步驟的培養(yǎng)溫度、pH值、攪拌速度、通氣量；層析步驟的上樣載量、上樣流速、柱壓、緩沖液pH值和電導率；低pH孵育步驟的pH值、孵育溫度、時間；制劑半成品配制步驟的配制時長、過濾時長、過濾壓力、灌裝時長等。

4.5.12應對生產(chǎn)過程中關(guān)鍵工藝（如細胞培養(yǎng)、純化層析、制劑灌裝／凍干等）的相關(guān)參數(shù)進行連續(xù)監(jiān)控，并將連續(xù)監(jiān)控數(shù)據(jù)（如細胞培養(yǎng)控制曲線、層析圖譜、凍干曲線等）納入批記錄。

4.5.13應當采用經(jīng)過驗證的工藝進行病毒去除或滅活處理，操作過程中應當采取有效措施防止已處理的產(chǎn)品被再次污染。

4.5.14含有活細胞等活性物質(zhì)的廢液、濾器和膜包等，須收集并進行滅活處理。

4.5.15不得將同一層析分離柱用于生產(chǎn)的不同階段。應當明確規(guī)定層析分離柱的合格標準（如柱效、對稱性等）、清潔或滅菌方法及層析填料的使用壽命。層析填料保存、再生及重復使用性的可接受限度應當經(jīng)過研究。

4.5.16未經(jīng)注冊批準，不合格原液及中間產(chǎn)物不得進行返工及重新加工。

4.5.17應當按照《中華人民共和國藥典》和注冊批準要求對原輔料、包裝材料、中間產(chǎn)物、原液、半成品及成品進行檢定。

4.5.18應在研發(fā)階段對產(chǎn)品進行充分的研究，并在此基礎(chǔ)上按特性分析要求對參比品進行全面分析鑒定，參比品的建立和制備可參照“生物制品國家標準物質(zhì)制備和標定規(guī)程”。應當證明參比品的效價或含量在有效期內(nèi)保持穩(wěn)定。

4.5.19應對原液和成品進行持續(xù)穩(wěn)定性考察。

4.5.20原液應當參照成品進行留樣，留樣數(shù)量一般至少應當能夠確保按照注冊批準的質(zhì)量標準完成兩次全檢。

4.5.21純化工藝應保證對產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)和工藝相關(guān)雜質(zhì)的適當去除。工藝驗證應包括產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)和工藝相關(guān)雜質(zhì)的去除（如宿主蛋白質(zhì)和DNA，PtoteinA等）。

4.5.22應根據(jù)制品關(guān)鍵質(zhì)量屬性、對產(chǎn)品和工藝理解認識的積累和風險評估的原則，制定相應質(zhì)量控制策略，確保生產(chǎn)批間一致性和穩(wěn)定性。

4.5.23產(chǎn)品的質(zhì)量檢定應至少包括以下項目：鑒別、純度和雜質(zhì)、效價、含量、和其他檢定（如外觀、pH、滲透壓、裝量、無菌、細菌內(nèi)毒素、可見異物、不溶性微粒檢查）。凍干粉還應考察復溶時間、水分和裝量差異。4.6質(zhì)量管理

4.6.1應根據(jù)穩(wěn)定性數(shù)據(jù)制定中間產(chǎn)物、原液、半成品、成品的貯存條件（包括容器材質(zhì)）和有效期。中間產(chǎn)物和原液凍融應經(jīng)過驗證。

4.6.2生產(chǎn)工藝變更應符合國家藥品注冊管理等相關(guān)要求。應建立有效的風險管理體系，最大限度降低變更導致的風險。需特別注意培養(yǎng)基、生物反應器、細胞分離、層析填料、層析分離柱和病毒過濾等的變更。

4.6.3對一次性使用系統(tǒng)的管理應當基于風險評估的方式，其風險級別通常與一次性使用系統(tǒng)應用中產(chǎn)品所處的生命周期階段和工藝階段有關(guān)；還需要考慮一次性使用系統(tǒng)自身的復雜性，以及在特定產(chǎn)品工藝中應用的工藝條件（時間、溫度、溶劑、表面積與體積比率等）等方面。通常應當考慮的要素包含供應商的質(zhì)量管理及控制策略，檢測項目、方法和標準等。應基于科學和風險對所應用的一次性生產(chǎn)系統(tǒng)及相應產(chǎn)品工藝進行驗證，以確保產(chǎn)品的安全有效。

4.6.4藥品上市許可持有人承擔藥品全生命周期內(nèi)相關(guān)法律和法規(guī)要求的責任，在商業(yè)協(xié)議和質(zhì)量協(xié)議中與受托生產(chǎn)／檢測企業(yè)明確雙方相應責任。藥品上市許可持有人應當建立藥品上市放行規(guī)程，對藥品生產(chǎn)企業(yè)出廠放行的藥品進行審核，經(jīng)質(zhì)量受權(quán)人簽字后方可放行。不符合國家藥品標準的，不得放行。