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        海草床鹽生植物根際土壤可培養(yǎng)細菌多樣性及抑菌活性研究

        2024-12-31 00:00:00陳望安李蜜黎芳婷高程海
        廣西植物 2024年8期
        關(guān)鍵詞:抑菌活性

        摘 要: "為探究海草床鹽生植物根際土壤可培養(yǎng)細菌的新穎性和獨特性及其代謝產(chǎn)物粗提物抑菌活性,該文采集防城港市珍珠灣和漁洲坪海草床9份鹽生植物根際土壤進行研究,使用5種分離培養(yǎng)基,并采用稀釋涂布法分離純化可培養(yǎng)細菌。通過PCR擴增和16S rRNA測序進行菌種鑒定并對其進行多樣性分析。采用濾紙片法篩選可培養(yǎng)細菌發(fā)酵粗提物對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)、金黃色葡萄球菌(S. aureus)和鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii)4種人類致病菌的抑制活性。結(jié)果表明:(1)從9份樣品中共分離獲得可培養(yǎng)細菌42株,隸屬13個科14個屬,包括鏈霉菌屬、弧菌屬、芽孢桿菌屬、希瓦氏菌屬、微桿菌屬、短桿菌屬、葡萄球菌屬、鞘氨醇單胞菌屬、羅思氏菌屬、嗜冷桿菌屬、假諾卡氏菌屬、發(fā)光菌屬、氟單胞菌屬和志賀菌屬,其中鏈霉菌屬為優(yōu)勢菌屬。(2)抑菌活性初篩結(jié)果顯示,6株可培養(yǎng)細菌至少對2種以上人類致病菌有較強的抑制活性,其中1株來自弧菌屬,1株來自羅思氏菌屬,其余4株均來自鏈霉菌屬。綜上所述,防城港海域海草床鹽生植物根際土壤微生物資源較新穎獨特,鏈霉菌屬細菌具有較強的抑菌活性,為開發(fā)新型抗生素提供了潛在菌種資源。

        關(guān)鍵詞: 海草床, 人類致病菌, 細菌多樣性, 鏈霉菌屬, 抑菌活性

        中圖分類號: "Q948.12

        文獻標識碼: "A

        文章編號: "1000-3142(2024)08-1458-11

        Diversity and antibacterial activity of culturable bacteria from rhizosphere soil in seagrass bed halophytes

        CHEN Wang’an1,2,3, LI Mi1,2, LI Fangting1,2, GAO Chenghai1,2*

        ( 1. Institute of Marine Drugs, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530200, China;

        2. Guangxi Key Laboratory of MarineDrugs, Nanning 530200, China; 3. Guangxi Talent International College, Qinzhou 535000, Guangxi, China )

        Abstract: "The purpose of this study was to investigate the novelty and particularly of the culturable bacteria in seagrass bed and study its antibacterial activity crude extracts of the metabolites. A total of nine rhizosphere soil samples were collected from the seagrass bed ecosystems in Pearl Bay and Yuzhouping, Fangchenggang City. Five different isolation media were used to isolate and purify the culturable bacteria using the dilution spread plate method. The bacterial species were identified through PCR amplification and 16S rRNA sequencing. The antibacterial activity against four human pathogenic bacteria (methicillin-resistant Staphylococcus aureus, S. epidermidis, S. aureus and Acinetobacter baumannii) were screened with Kirby-Bauer method. The results were as follows: (1) A total of 42 culturable bacteria were isolated, belonging to 14 genera and 13 families, which included Streptomyces, Vibrio, Bacillus, Shewanella, Microbacterium, Brevibacterium, Staphylococcus, Sphingomonas, Rothia, Psychrobacter, Pseudonocardia, Photobacterium, Halomonas, and Shigella. The genus Streptomyces was the dominant bacterium. (2)Antibacterial activity showed that six bacteria exhibited strong inhibitory activity against at least two or more human pathogenic bacteria, which included Vibrio (1 strain), Rothia (1" strain), and Streptomyces (4" strains). The studies show that the rhizosphere soil microbial resources of halophytes in the seagrass bed in Fangchenggang sea area are novel and unique, and" Streptomyces has a strong antibacterial activity, which provides a new source for the research and development of new antibiotics drugs.

        Key words: seagrass bed, human pathogenic bacteria, bacteria diversity, Streptomyces, antibacterial activity

        海草是生長在溫帶和熱帶淺海海域的單子葉植物,中國有22種,約占全球海草種類數(shù)(72種)的30%(鄭鳳英等,2013)。海草床是指由一種或兩種以上的海草植物主導(dǎo)的海洋生態(tài)系統(tǒng),與紅樹林、珊瑚礁并稱三大典型海洋生態(tài)系統(tǒng),處于紅樹林與珊瑚礁之間,其微生物分布廣泛,多樣性豐富(Hassenrück et al., 2015;蔡澤富等,2021)。組成海草根圈、底質(zhì)和葉的菌落主要有γ-變形桿菌綱、α-變形桿菌綱、擬桿菌門、黃桿菌綱和藍細菌門等(Devereux, 2005)。江玉鳳等(2016)發(fā)現(xiàn)海南新村灣海草沉積物中主要的細菌類群分布在變形菌門和厚壁菌門,其中優(yōu)勢菌群為γ-變形菌門。凌娟等(2010)從泰來藻(Thalassia hemperichii)植株的根際分離得到1株固氮成團泛菌(Pantoea agglomerans)。王琦等(2017)從鰻草(Zoslera marina)植株的根際分離獲得2株新的具有較高固氮酶活性的芽孢桿菌(Bacillus sp.)和海旋菌(Thalassospira sp.)。廣西北部灣海洋微生物物種資源豐富,近年來對紅樹林和珊瑚礁微生物資源的研究較多,忽視了海草床微生物資源的豐富性(徐新亞等,2020)。廣西是中國熱帶-亞熱帶海域海草床主要分布區(qū)之一,據(jù)周毅等(2023)調(diào)查發(fā)現(xiàn),廣西現(xiàn)有海草5種,海草床面積合計665.46 hm2,其中防城港海域海草面積為297.89 hm2,占廣西海草床總面積的44.76%。防城港海草床主要分布在珍珠灣(鄭鳳英等,2013),珍珠灣海草床位于廣西北侖河口國家級自然保護區(qū),地處中越邊界,地理位置特殊,屬南亞熱帶濕熱季風(fēng)氣候區(qū),其基質(zhì)多為淤泥。珍珠灣海草床地處亞熱帶,受季節(jié)與潮汐影響海草物種單一,以矮大葉藻 (Zostera japonica)為優(yōu)勢種,夏季混生喜鹽草(Halophila ovalis),并且多處于潮間帶,低潮時受失水脅迫,能適應(yīng)高堿性高鹽度環(huán)境(鄭杏雯,2007;范航清和鄭杏雯,2007;邱廣龍等,2014)。海草床毗鄰紅樹林和珊瑚礁,受自然和人為雙重脅迫,海草根莖發(fā)達,交錯成密集的網(wǎng)絡(luò)狀,能截留大量的海底沉積物,成為獨特微生物的溫床(李森等,2010;周毅等,2023;胡曉珂等,2023)??傊2荽采程厥?,蘊含著大量與陸地環(huán)境不同的微生物。

        北部灣紅樹植物根際土壤可培養(yǎng)細菌資源豐富。例如:吳家法等(2017)從茅尾海25份紅樹林土壤樣品中分離獲得117株放線菌,分布于6個亞目10個科19個屬,優(yōu)勢菌屬為鏈霉菌屬(Streptomyces);候師師等(2020)從海南西海岸四種真紅樹根系土壤共分離獲得22株放線菌,隸屬于4目7科9屬,其中鏈霉菌屬為優(yōu)勢菌群;李王靖等(2023)從7份紅樹植物根際土壤樣品中培養(yǎng)獲得細菌120種,隸屬于35科47屬,優(yōu)勢菌屬為鏈霉菌屬。

        據(jù)文獻報道,海草床生境可培養(yǎng)細菌資源具有豐富的生物活性,如抗病毒(Rowley et al., 2002)、抗癌(Gavagnin et al., 2007)、抗菌(Qi et al.,2008)等。Rowley 等(2002)從 Thalassia testudinum 中分離出的黃酮苷化合物有抗 HIV 病毒活性。Gavagnin 等(2007)從 Halophila stipulacea 分離出1個對人體和大鼠癌細胞具有強抑制活性的大環(huán)內(nèi)酯類化合物。Qi等(2008)從海南采集的海菖蒲(Enhalus acoroides)中分離得到木犀草素、芹黃素、木犀草素-4′-葡萄糖顯示拒食活性、細胞毒性、抑菌活性等活性。據(jù)統(tǒng)計,自2020年起從北部灣3種海草植物中獲得3個新化合物和7個已知活性化合物(高程海等,2022)。目前,抗生素耐藥性依然嚴重威脅著人類的生命,每年約有70萬人死于感染,預(yù)計到2025年這將導(dǎo)致數(shù)以百萬計的人失去生命(Subramaniam amp; Girish, 2020)。因此,亟待尋找新的抗生素來源。

        本研究以防城港珍珠灣和漁洲坪兩處海草床為研究對象,采用稀釋涂布法分離鹽生植物根際可培養(yǎng)細菌,通過16S rRNA基因測序鑒定菌種以及濾紙片法篩選細菌代謝產(chǎn)物粗提物的抑菌活性,擬探討以下問題:(1)與紅樹植物根際土壤可培養(yǎng)細菌相比,海草床鹽生植物根際土壤可培養(yǎng)細菌的新穎性和獨特性;(2)海草床可培養(yǎng)細菌代謝產(chǎn)物粗提物的抑菌活性。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 樣品采集

        2021年6月從廣西防城港珍珠灣和漁洲坪海草床生態(tài)系統(tǒng)采集海草貝克喜鹽草等植物的根際土壤樣品9份(表1)。拔起植物根系,抖落根系周圍松散的土壤后,收集剩下的附著在根系上的土壤,挑除斷根等雜質(zhì)后,用無菌采樣袋盛裝,放入冰盒保存并盡快送回實驗室進行分離實驗。

        1.1.2 試劑

        Chelex-100樹脂和2X Easy Taq Supermix購于Bio-Rad公司(美國)。16S rRNA基因擴增引物對27F (5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)和1492R(5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′)購于生工生物工程(上海)股份有限公司廣州分公司。其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

        1.1.3 培養(yǎng)基

        1.1.3.1 分離培養(yǎng)基 共采用5種分離培養(yǎng)基對海草床鹽生植物根際土壤細菌進行培養(yǎng),分別為改良ISP5培養(yǎng)基(M7)、棉籽糖-組氨酸培養(yǎng)基(M11)、燕麥培養(yǎng)基(P3)、酪氨酸-天冬酰胺培養(yǎng)基(P7)和AM6-1。其中,M7、M11、P3、P7詳細配方參考李蜜等(2020),AM6-1詳細配方參考馬睿霄(2016)。每種培養(yǎng)基加入1 L海水和15 g瓊脂,pH調(diào)節(jié)至7.2,添加重鉻酸鉀25 mg·L-1抑制真菌生長。

        1.1.3.2 純化及菌種保存培養(yǎng)基 改良ISP2固體培養(yǎng)基(38號),配方為酵母提取物2.0 g、麥芽提取物2.0 g、葡萄糖2.0 g、瓊脂粉15.0 g、海鹽30.0 g和去離子水1 000 mL。

        1.1.4 指示菌

        耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)(methicillin-resistant Staphylococcus aureus)由廣西中醫(yī)藥大學(xué)海洋藥物研究所提供,表皮葡萄球菌(S. epidermidis)和鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii)由廣東微生物研究所提供,金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)由華南農(nóng)業(yè)大學(xué)提供。

        1.2 方法

        1.2.1 樣品處理方法

        挑除海草床鹽生植物根際土壤樣品中的雜質(zhì),稱取樣品2 g置于裝有20 mL無菌水的錐形瓶中,置于搖床充分搖勻后,稀釋成1×10-2、1×10-3懸液,各取100 μL分別涂布于5種分離培養(yǎng)基上,倒置在培養(yǎng)箱內(nèi)恒溫28 ℃培養(yǎng)14~30 d。

        1.2.2 細菌的分離純化 分離培養(yǎng)3~5 d后觀察菌落的生長狀況,當(dāng)平板長出明顯的菌落形態(tài),在超凈工作臺下挑取各單菌落,采用三區(qū)劃線法,使用無菌竹簽接種到改良ISP2 固體培養(yǎng)基平板上,置于28 ℃ 恒溫箱進行純化培養(yǎng),觀察并記錄菌落的形態(tài)特點,直至獲得純單菌落。

        1.2.3 細菌的保藏

        配置20%(V/V)甘油管,滅菌后轉(zhuǎn)接純化的菌株,置于-80 ℃冰箱冷凍保藏以備用。

        1.2.4 細菌的鑒定

        參考周雙清等(2010)的方法,用Chelex-100法提取細菌基因組DNA,用27F和1492R引物對PCR擴增16S rRNA基因片段,PCR產(chǎn)物送至生工生物工程(上海)股份有限公司廣州分公司測序,用DNA Star軟件編輯整理16S rRNA基因測序結(jié)果,在數(shù)據(jù)庫 EzBioCloud(http://www.eztaxon.org/)及Blast網(wǎng)站上在線比對相似性。

        1.2.5 抑菌活性實驗

        1.2.5.1 細菌發(fā)酵粗提物的制備 參考李蜜等(2020)的方法,發(fā)酵已分離純化的菌株,離心收集發(fā)酵液用等體積的乙酸乙酯萃取。將萃取物減壓濃縮后,溶解于甲醇并收集置于通風(fēng)櫥,待甲醇揮干后,將得到的細菌發(fā)酵粗提物存放于4 ℃的冰箱中備用。

        1.2.5.2 抑菌活性篩選 用三角瓶配置LB液體培養(yǎng)基50 mL并滅菌,待冷卻至約50 ℃,接種生長良好的指示菌,置37 ℃搖床180 r·min-1培養(yǎng)6 h即得種子液。用培養(yǎng)皿制備成種子液濃度為0.2%的LB固體培養(yǎng)基檢定板。將細菌發(fā)酵粗提物用甲醇溶解配成20 mg·mL-1,吸取5 μL至直徑為6 mm的無菌濾紙片上(加入5 μL甲醇和3 μL濃度為50 μg·mL-1的甲氧芐啶濾紙片分別作陰性和陽性對照),揮干甲醇,貼于檢定板表面,于37 ℃培養(yǎng)24 h,觀察并記錄抑菌圈的大小,實驗重復(fù)3次,計算抑菌圈平均值(曾臻和譚強來,2019)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 多樣性分析

        16S rRNA基因序列比對結(jié)果排重后,最終獲得細菌42株(表2)。由圖1可知,42株菌隸屬3門4綱12目13科14屬42種。其中,鏈霉菌屬最多,有13種,占總分離菌種的30.95%,為優(yōu)勢菌群,與紅樹根際土壤的研究結(jié)果類似(李王靖等,2023),海草床鹽生植物根際土壤也含有豐富多樣的放線菌。其次是弧菌屬(Vibrio)和芽孢桿菌屬(Bacillus),分別為9種和6種,占21.43%和14.29%。從16S rRNA基因序列比對相似度來看,42株細菌中4株16S rRNA相似度小于98.65%,分別為Streptomyces abikoensis、S. griseocarneus、S. carpinensis、Vibrio hispanicus。由此可見,海草床根際土壤放線菌資源不僅豐富,而且潛藏著疑似新菌,值得進一步發(fā)掘和研究。

        2.2 細菌在不同鹽生植物根際土壤、不同培養(yǎng)基中的分布

        不同樣品鹽生植物根際土壤細菌多樣性如圖2所示。F4貝克喜鹽草分離出11屬11種可培養(yǎng)細菌,多樣性最豐富,優(yōu)勢均屬為弧菌屬。其次為F2貝克喜鹽草,分離獲得6屬9種可培養(yǎng)細菌。F1廣州相思子(沙質(zhì)),分離篩選出5屬9種可培養(yǎng)細菌。廣州相思子F7和F3不相上下,分別為6屬7種和5屬7種。F6卵葉喜鹽草和F8貝克喜鹽草,均獲得4種,分別隸屬于4屬和2屬。F5卵葉喜鹽草和F9苔蘚分離獲得的可培養(yǎng)細菌最少,均為2屬2種。由此可見,不同樣品可培養(yǎng)細菌多樣性存在差異,其中最多的2個樣品(F2、F4)都是貝克喜鹽草,F(xiàn)4比F2多分離出2種可培養(yǎng)細菌,參考邱廣龍等(2020)對貝克喜鹽草生態(tài)學(xué)特征的研究,推測可能與貝克喜鹽草特殊的生境有關(guān)。貝克喜鹽草僅生長在潮間帶,受周期性潮汐運動影響,需忍耐相對其他海草更大的環(huán)境波動(邱廣龍等,2020)。此外,不同海域可培養(yǎng)細菌的多樣性也存在差異。來源于珍珠灣的樣本分離到的細菌要多于漁洲坪。徐慧鵬(2020)研究表明,珍珠灣的表層沉積物有黏土,而漁洲坪則沒有。因此,造成兩地差異的原因可能與兩地的表層沉積物質(zhì)地不同有關(guān)。

        細菌生長受培養(yǎng)基營養(yǎng)成分影響,故不同培養(yǎng)基分離得到的細菌會存在差異。由圖3可知,5種培養(yǎng)基中,M11分離得到菌株總數(shù)最多,為15株7屬,其中鏈霉菌屬最多,共6株。其次是M7和P7,分離獲得的菌株數(shù)量相當(dāng),分別為12株8屬和12株5屬,兩者都含有L-天冬酰胺和甘油且含量相當(dāng),這兩種成分是微生物生長所必需的生長因子。這與李蜜(2020)的研究結(jié)果一致。AM6-1分離獲得可培養(yǎng)細菌8種6屬,相比M7和P7,它只含有甘油。純化得到可培養(yǎng)細菌數(shù)量最少的是培養(yǎng)基P3,僅5種3屬。P3只含有燕麥粉一個營養(yǎng)成分,不含甘油或氨基酸,本次實驗樣本可培養(yǎng)細菌需要較多的氨基酸類生長因子,對于碳源的需求不高。

        2.3 抑菌活性分析

        本次研究采用濾紙片法,篩選具有抑菌活性的細菌發(fā)酵粗提物,由表3和圖4可知,有6株菌的發(fā)酵粗提物具有抑菌活性。除1株弧菌外,其余5株均是放線菌,包含4株鏈霉菌,由此可知,放線菌尤其是鏈霉菌屬產(chǎn)生抗生素的潛力巨大。菌株GXIMD209對MRSA、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、鮑曼不動桿菌均有不同程度的抑制作用。GXIMD119對鮑曼不動桿菌無作用,對其他三種指示菌均有抑制作用。GXIMD200對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和鮑曼不動桿菌具有抑菌活性,而對金黃色葡萄球菌無抑菌活性。GXIMD160僅對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和鮑曼不動桿菌有抑制作用,相反地,GXIMD156對金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌有抑制作用。GXIMD130對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌無抑制作用,對其他三種指示菌顯陽性。

        3 討論與結(jié)論

        本次研究,從廣西北部灣防城港珍珠灣與漁洲坪兩地采集9份海草床鹽生植物根際土壤樣本,分離純化得到42株可培養(yǎng)細菌,隸屬12目13科14屬,鏈霉菌屬是優(yōu)勢菌屬。在優(yōu)勢菌屬上,本研究與吳家法等(2017)、候師師等(2020)及李王靖等(2023)研究結(jié)果一致,優(yōu)勢屬均為鏈霉菌屬。不同的是,本次研究的對象為防城港海草床的鹽生植物。然而,防城港海域的紅樹植物根際土壤亦存在豐富的放線菌資源,如吳越等(2017)從防城港北侖河口紅樹林植物根際土壤中分離獲得放線菌110株。據(jù)此推測,防城港海草床根際土壤中亦可能富含放線菌,可對此作進一步研究。

        海草床鹽生植物可培養(yǎng)細菌的多樣性和新穎性受植物、培養(yǎng)基、分離技術(shù)等因素影響。不同鹽生植物分離得到的菌種存在差異,本研究采集于珍珠灣的兩處貝克喜鹽草根際土壤分離到的細菌數(shù)量最多。這應(yīng)該和貝克喜鹽草的特殊生境和環(huán)境脅迫等因素有關(guān)。貝克喜鹽草為最古老的海草之一,被稱為“活恐龍”。珍珠灣貝克喜鹽草位于紅樹林和矮大葉藻之間,生長于潮間帶,相對于其他海草,每天需承受周期性潮汐運動所產(chǎn)生的光照、溫度、鹽度等環(huán)境波動(邱廣龍等,2013,2020),此外海草床微生物群落活動也受光照的影響(鄧娛婷,2023)。貝克喜鹽草面臨多種生存威脅,重金屬的脅迫影響貝克喜鹽草根際沉積物酶活性,從而對土壤的微生物產(chǎn)生影響(權(quán)佳惠,2022)。海草床微生物群落分布受根齡、葉齡、季節(jié)變化、海草定植、海草生理狀況和組織部位等多種因素影響(胡曉珂等,2023)。這啟發(fā)了研究者可采集海草床多類型樣本對其微生物多樣性作進一步研究。就不同培養(yǎng)基進行分析,從M11培養(yǎng)基中分離獲得的菌株數(shù)量最多,P3培養(yǎng)基獲得細菌數(shù)量最少。P3主要成分為燕麥粉,為寡營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,海草床土壤中含有較高水平的有機碳能為海草根際微生物提供充足的碳源(胡曉珂等,2023)。吳越等(2017)采用的培養(yǎng)基為5種,而成分比本研究采用的培養(yǎng)基復(fù)雜。傳統(tǒng)的分離技術(shù)和方法越來越難獲得新穎性高的可培養(yǎng)細菌。據(jù)李王靖等(2023)統(tǒng)計,2015—2021年運用傳統(tǒng)分離方法從北部灣海洋植物根際土壤分離得到的潛在新菌(lt;98.65%)比例為2.34%。本次研究采用傳統(tǒng)的分離方法,獲得4株16S rRNA基因序列比對相似度小于98.65%的細菌,但均高于97.00%,新穎性較低。李王靖等(2023)采用富集培養(yǎng)法以復(fù)蘇休眠的菌株,分離獲得5 種相似度均低于97.00%的潛在新菌。后續(xù)可采用其他方法分離海草床的可培養(yǎng)細菌以獲得新穎性高的菌株,如高通測序分析、原位培養(yǎng)等。熊小飛等(2018)采用高通測序分析法發(fā)現(xiàn)廣西北侖河口潮間帶紅樹林沉積物中微生物的5大主要類群分別為變形菌門、綠彎菌門、擬桿菌門、浮霉菌門和酸桿菌門。因此,我們需要利用新技術(shù)、配制多種培養(yǎng)基,從而充分發(fā)掘海草床的細菌多樣性,獲得更多新型可培養(yǎng)的海洋細菌。

        放線菌有較強的抑菌活性,鏈霉菌屬是產(chǎn)生抗生素最多的放線菌(呂佩帥等,2021)。本研究發(fā)現(xiàn)具有較強抑制人體致病菌的可培養(yǎng)細菌6株,分別為GXIMD209、GXIMD119、GXIMD200、GXIMD160、GXIMD156和GXIMD130。其中,GXIMD160與GXIMD156分離自廣州相思子的根際土壤,均隸屬于鏈霉菌屬,GXIMD209和GXIMD119分離自貝克喜鹽草的根際土壤,分別隸屬于弧菌屬和羅思氏菌屬(Rothia),GXIMD200分離自卵葉喜鹽草,隸屬于鏈霉菌屬,GXIMD130分離自苔蘚,亦隸屬于鏈霉菌屬。6株活性菌中,除GXIMD209外,其余5株均屬放線菌且4株為鏈霉菌。吳越等(2017)從分離自防城港北侖河口紅樹林根際土壤的51株放線菌中篩選出46株有抗菌活性。

        本研究首次將海草床植物根際土壤作為研究對象,拓寬了北部灣微生物資源研究的范圍,是尋找具有抗菌活性菌株的一次有益嘗試。彭霞薇等(2013)證明阿比科恩鏈霉菌(Streptomyces abikoensis)對茄腐皮鐮刀菌(Fusarium solani)引起的根腐病具有較強的抑制作用。而本研究活性菌株GXIMD160與菌株阿比科恩鏈霉菌相似性為100%,對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和鮑曼不動桿菌有較強抑制作用,預(yù)示其可能有抑制人體致病菌的潛力,具有進一步開發(fā)為人用抗生素的價值。

        綜上所述,防城港海域海草床鹽生植物根際土壤可培養(yǎng)細菌資源較為新穎獨特,鏈霉菌屬細菌具有較強的抑菌活性,是開發(fā)新型抗生素的潛在菌種資源。但是,除防城港海域海草床鹽生植物根際土壤樣本外,本實驗未采集防城港海草床更多樣本或其他海域的海草床樣本,后續(xù)將考慮采集更多海草床樣本。另外,本研究分離得到的菌株數(shù)量與有效活性菌株種類有關(guān),需改進細菌培養(yǎng)的技術(shù),擴大致病菌篩選范圍及改進抑菌實驗方法,以獲取更多強活性的新型海洋微生物,為進一步研究微生物多樣性和抑菌活性提供新思路和新的菌株資源。

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        (責(zé)任編輯 周翠鳴)

        基金項目: "國家自然科學(xué)基金(81903533); 廣西重點研發(fā)計劃項目(桂科AB24010109); 廣西中醫(yī)藥大學(xué)桂派中醫(yī)藥傳承創(chuàng)新團隊項目(2022B005); 廣西中醫(yī)藥大學(xué)桂派杏林拔尖人才資助項目(2022C008); 廣西中醫(yī)藥大學(xué)高層次人才培育創(chuàng)新團隊項目(2022A007)。

        第一作者: 陳望安(1986—),碩士研究生,講師,主要從事海洋中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究,(E-mail)chenwangan@qq.com。

        通信作者: "高程海,博士,研究員,碩士研究生導(dǎo)師,主要從事海洋藥用微生物資源與應(yīng)用研究,(E-mail)1178740043@qq.com。

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