［摘 要］ 目的：應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析蒲公英-桑葉在急性髓系白血病 （AML） 發(fā)生發(fā)展過程的作用，闡明其治療 AML 的活性成分和作用機制。 方法：通過中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫和分析平臺（TCMSP） 篩選蒲公英-桑葉的活性成分，采用SwissTargetPrediction 數(shù)據(jù)庫預(yù)測其作用靶點，在癥狀映射（SymMap） 數(shù)據(jù)庫、人類基因數(shù)據(jù)庫（GeneCards）、DisGeNET 數(shù)據(jù)庫和在線人類孟德爾遺傳（OMIM） 數(shù)據(jù)庫中檢索AML 相關(guān)基因和蛋白靶點。對AML 相關(guān)基因和蒲公英-桑葉靶基因進(jìn)行比較，確定富集基因，并進(jìn)行基因本體論（GO） 功能和京都基因與基因組百科全書（KEGG） 信號通路富集分析。采用Cytoscape 3. 8. 0 軟件根據(jù)靶點信息構(gòu)建藥物-有效成分-靶點網(wǎng)絡(luò)和蛋白-蛋白互作（PPI）網(wǎng)絡(luò)，采用CytoNCA插件篩選出核心基因，通過AutoDock軟件進(jìn)行分子對接驗證。結(jié)果：對數(shù)據(jù)庫檢索結(jié)果進(jìn)行篩選后得到39 種有效成分，收集蒲公英-桑葉與AML 的共同靶點148 個。GO 功能富集分析主要涉及細(xì)胞因子介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑、激酶活性正向調(diào)節(jié)和氧化應(yīng)激反應(yīng)等。KEGG 信號通路富集分析主要涉及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B （PI3K/AKT） 信號通路、腫瘤壞死因子（TNF）信號通路和Janus 激酶/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子（JAK/STAT） 信號通路等。拓?fù)浞治龅玫叫盘栟D(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3 （STAT3）、表皮生長因子受體（EGFR）、蛋白激酶B1 （AKT1）、重組人表皮生長因子（EGF）、血管內(nèi)皮生長因子A （VEGFA）、原癌基因MYC、腫瘤蛋白P53 （TP53）、絲裂原活化蛋白激酶3 （MAPK3）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 （CASP3）、肉瘤基因SRC、熱休克蛋白90α 家族A 類成員1 （HSP90AA1）、連環(huán)蛋白B1 （CTNNB1）、磷酸肌醇3-激酶催化亞基α（PIK3CA）、白細(xì)胞介素6 （IL-6）、TNF、絲裂原活化蛋白激酶1 （MAPK1） 和磷酸肌醇3-激酶調(diào)節(jié)亞基1 （PIK3R1） 等核心靶點。分子對接，結(jié)合親和力最高的配對結(jié)果為蒲公英萜醇（taraxerol） 與MYC （-8. 74 kcal·mol-1），槲皮素（quercetin）、kaemfprol、木犀草素（luteolin） 和artemetin 與各個靶點均有很好的結(jié)合親和力。結(jié)論：蒲公英-桑葉主要活性成分 quercetin、taraxerol、kaemfprol、luteolin 和artemetin 可能通過調(diào)控AKT1、STAT3、HSP90AA1、IL-6 和MAPK1 發(fā)揮抗AML 的作用，對PI3K-AKT 信號通路的調(diào)節(jié)是蒲公英-桑葉發(fā)揮抗AML 作用的重要機制。

［關(guān)鍵詞］ 急性髓系白血?。?蒲公英； 桑葉； 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)； 分子對接

［中圖分類號］ R733. 7； R285. 5 ［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A

急性髓系白血?。╝cute myeloid leukemia，AML） 是由骨髓內(nèi)未分化或分化不良的干細(xì)胞或祖細(xì)胞克隆增生所致，其病因尚不明確，可能與遺傳因素、環(huán)境因素或遺傳與環(huán)境因素相互作用有關(guān)。AML 的發(fā)病率在過去幾年中呈逐年上升的趨勢［1］，其病程急驟，進(jìn)展迅速，患者常需要積極治療，否則病情會迅速惡化［2］。此外，AML 通常預(yù)后不佳，只有約40% 60 歲以內(nèi)的患者存活超過5 年［3］。目前， 臨床上常用于治療AML 的藥物包括阿糖胞苷、順鉑和達(dá)拉比嗪等細(xì)胞毒性藥物。常用的化療方案包括7+3 方案， 即阿糖胞苷和順鉑的聯(lián)合應(yīng)用。此外，還有其他一些強化化療方案，如FLAG（氟達(dá)拉濱、阿糖胞苷及順鉑） 和HAM （阿糖胞苷、阿霉素及蒽環(huán)類藥物） 方案等，但均無法完成強化根治性治療，而且對正常細(xì)胞還有一定毒性作用。因此迫切需要更安全和更有效的治療方法。

青黃散和雷公藤等中藥對AML 具有治療作用［4-5］。霍俊明等［6］ 認(rèn)為：急性白血病初期多屬邪實正盛的階段，骨髓增生極度活躍，治療以清熱解毒之法，方用抗白解毒湯，該方由蒲公英、桑葉和金銀花等中藥組成。雖然桑葉尚未用于AML 的治療，但 研 究［7］ 表 明： 純化的桑葉凝集素（mulberryleaf lectin，MLL） 以含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（cysteinyl aspartate specific proteinase， CASP）依賴性方式誘導(dǎo)MCF-7 和HCT-15 細(xì)胞凋亡。蒲公英提取物的化學(xué)成分，包括倍半萜內(nèi)酯和苯丙烷類化合物，具有抗炎、抗氧化和抗癌特性［8］。但關(guān)于蒲公英和桑葉其他成分治療AML 作用機制的研究較少。 隨著系統(tǒng)生物學(xué)和生物信息學(xué)的快速發(fā)展，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)提供了一種揭示藥物之間、靶點之間、疾病之間和中藥復(fù)雜機制的新方法［9］。現(xiàn)采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法研究蒲公英-桑葉對AML 的治療效果，旨在確定蒲公英-桑葉的主要成分，預(yù)測蒲公英-桑葉治療AML 的相關(guān)靶點，并闡明蒲公英-桑葉抗AML 的藥理學(xué)機制。

1 資料與方法

1. 1 蒲公英-桑葉活性成分篩選及靶點預(yù)測

檢索中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺（TraditionalChinese Medicine Systems Pharmacology Databaseand Analysis Platform， TCMSP）［10］、 癥狀映射（Symptom Mapping， SymMap） 數(shù)據(jù)庫［11］ 和中醫(yī)分子機制生物信息學(xué)分析工具（BioinformaticsAnalysis Tool for Molecular Mechanism of TraditionalChinese Medicine， BATMAN-TCM） 數(shù)據(jù)庫［12］，并輔以文獻(xiàn)收集對蒲公英-桑葉活性成分加以補充。將口服生物利用度（oral bioavailability，OB） ≥30%和藥物相似度（drug-likeness，DL） ≥0. 18 作為篩選 條 件 篩 選 活 性 成 分。 通 過 TCMSP 和SwissTargetPrediction 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行靶點預(yù)測， 并導(dǎo)入Uniprot 數(shù)據(jù)庫對基因進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理并記錄［13］，獲得蒲公英-桑葉的有效化學(xué)成分及對應(yīng)的蛋白靶點。

1. 2 蒲公英-桑葉治療 AML 相關(guān)靶點篩選

以“AML” 為關(guān)鍵詞， 在SymMap、DisGeNET 數(shù)據(jù)庫［14］、人類基因數(shù)據(jù)庫（GeneCards）［15］ 和在線人類孟德爾遺傳（Online Mendelian Inheritance inMan， OMIM） 數(shù)據(jù)庫［16］ 中檢索疾病潛在靶點。將收集到的靶點進(jìn)行匯總，導(dǎo)入Uniprot 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行驗證，去除重復(fù)靶點，得到AML 潛在靶點。將AML 潛在靶點與藥物活性成分靶點取得交集，選擇重疊靶點作為靶點庫。

1. 3 構(gòu)建藥物-有效成分-靶點網(wǎng)絡(luò)和蛋白-蛋白互作（protein-protein interaction， PPI）網(wǎng)絡(luò)

將重疊靶點上傳到 STRING 在線數(shù)據(jù)庫，確定并可視化藥物和 AML 之間的化合物-靶點通路關(guān)系。根據(jù) Cytoscape 3. 8. 0 軟件 CytoNCA 插件的中介中心性（betweenness centrality， BC）、 接 近 中 心 性（closeness centrality， CC） 和 度 中 心 性（degreecentrality，DC） 3 個參數(shù)，對PPI 網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?，得到核心?jié)點，計算參數(shù)的中位數(shù)，選擇3 個參數(shù)大于中位數(shù)的所有節(jié)點作為核心節(jié)點。

1. 4 富 集 分 析

采 用 R （4. 1. 1） 語 言 中 的ClusterProfiler 軟件包［17］， 對蒲公英- 桑葉治療AML 的靶點進(jìn)行基因本體論（Gene Ontology，GO） 功能和京都基因與基因組百科全書（KyotoEncyclopedia of Genes and Genomes，KEGG） 信號通路富集分析。

1. 5 分子對接

從 Pubchem數(shù)據(jù)庫下載包括槲皮素（quercetin）、蒲公英萜醇（taraxerol）、kaemfprol、木犀草素（luteolin） 和artemetin 配體的二維（2D）結(jié)構(gòu)和三維（3D） 結(jié)構(gòu)。核心靶點的晶體結(jié)構(gòu)由RCSB 數(shù)據(jù)庫提供，包括信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3 （signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）（6GFA）、表皮生長因子受體（epidermalgrowth factor receptor， EGFR）（4WD5）、蛋白激酶B1 （protein kinase B1， AKT1）（3O96）、重組人表皮生長因子（epidermal growth factor， EGF）（1NQL）、 血 管 內(nèi) 皮 生 長 因 子 A （vascularendothelial growth factor A， VEGFA）（4DEQ）、原癌基因 MYC （5I50）、 腫瘤蛋白 P53 （tumorprotein P53，TP53）（3DCY）、絲裂原活化蛋白激酶3 （mitogen-activated protein kinase 3， MAPK3）（6GES）、 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3（cysteinyl aspartate specific proteinase-3， CASP3）（6CKZ）、肉瘤基因SRC （2BDJ）、熱休克蛋白90α家族A 類成員1 （heat shock protein 90 alpha familyclass A member 1，HSP90AA1）（4BQG）、連環(huán)蛋白β1 （catenin beta 1， CTNNB1）（6O9B）、磷脂酰肌醇激酶-3 催化亞基α （phosphoinositide kinase-3catalytic subunit alpha， PIK3CA）（7I1B）、白細(xì)胞介素6 （interleukin-6，IL-6）（1ALU）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）（5M2J）、絲裂原活化蛋白激酶1 （mitogen-activated protein kinase 1，MAPK1）（6G54） 和磷脂酰肌醇激酶-3 調(diào)節(jié)亞基1（phosphoinositide kinase-3 regulatory subunit 1，PIK3R1）（1PBW）。采用Mgltools 1. 5. 6軟件修復(fù)配體和受體（去水，加氫），使用AutoDock軟件進(jìn)行分子對接，檢測關(guān)鍵生物活性物質(zhì)之間的結(jié)合親和力。

2 結(jié) 果

2. 1 蒲公英-桑葉活性成分及靶點

本研究基于數(shù)據(jù)庫挖掘并結(jié)合文獻(xiàn)［18］ 補充，得到蒲公英-桑葉的活性成分 39 個（圖1）， 其中蒲公英 14 個， 桑葉25 個，蒲公英和桑葉共同活性成分 3 個，包括quercetin、β 胡蘿卜素（beta-carotene） 和豆甾醇（stigmasterol）。 通過 TCMSP 數(shù)據(jù)庫和 Swiss-TargetPrediction 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行靶點預(yù)測，剔除可能性為0 的基因后匯總?cè)ブ兀?獲得551 個潛在靶點基因（圖2）。

2. 2 蒲 公 英 - 桑 葉 對 AML 靶 點 的 識 別

在GeneCards、OMIM， SymMap 和DisGeNET 數(shù)據(jù)庫中分別檢索到681、343、468 和160 個靶點。篩選和去除重復(fù)的靶點后， 共得到1 235 個與AML相關(guān)的靶點。通過對藥物活性成分靶點和AML 相關(guān)靶基因進(jìn)行相交，共得到148 個靶基因（圖3）。

2. 3 藥 物 - 有 效 成 分 - 靶 點 網(wǎng) 絡(luò)

利 用Cytoscape 3. 8. 0軟件構(gòu)建了包含182個節(jié)點（32個活性成分節(jié)點和148 個靶點節(jié)點） 及413 個邊的藥物-有效成分-基因靶點網(wǎng)絡(luò)（圖4）。以該網(wǎng)絡(luò)為基礎(chǔ)，對組分、靶點和疾病之間的關(guān)系進(jìn)行系統(tǒng)分析。

2. 4 GO 功能和 KEGG 信號通路富集分析

對上述148 個重疊靶點進(jìn)行GO 功能富集分析，生物過程（biological process， BP） 包括細(xì)胞因子介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑、激酶活性正向調(diào)節(jié)和氧化應(yīng)激反應(yīng)等； 細(xì)胞組成（cellular component， CC） 包括質(zhì)膜外側(cè)面、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)復(fù)合物和膜筏； 分子功能（molecular function， MF） 包括絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶活性和DNA-結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合等。見圖5。KEGG 信號通路主要包括磷脂酰肌醇3- 激酶（phosphoinositide 3-kinase， PI3K） /蛋白激酶B（protein kinase B，AKT） 信號通路、TNF 信號通路和Janus 激酶（Janus kinase，JAK） /信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子（signal transducer and activator oftranscription，STAT） 信號通路等。見圖6。

2. 5 PPI 網(wǎng) 絡(luò) 的 構(gòu) 建 和 核 心 基 因 篩 選

采 用CytoNCA 插件分析PPI 網(wǎng)絡(luò)拓?fù)洌Y選核心基因，以DC、BC 和CC 的中位數(shù)為篩選標(biāo)準(zhǔn)（圖7）。在PPI 網(wǎng)絡(luò)中，根據(jù)以上篩選條件進(jìn)行首次篩選，獲得具有51 個節(jié)點和142 條邊的新網(wǎng)絡(luò)。對上述網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行第二次過濾， 得到另一個新的網(wǎng)絡(luò)， 有17 個節(jié)點和112 條邊。拓?fù)浞治鲲@示：PPI 網(wǎng)絡(luò)中核心作用靶點是STAT3、EGFR、AKT1、EGF、VEGFA、MYC、TP53、MAPK3、CASP3、SRC、HSP90AA1、CTNNB1、PIK3CA、IL-6、TNF、MAPK1 和PIK3R1 等。

2. 6 分子對接結(jié)果

采用分子對接技術(shù)對上述網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析結(jié)果進(jìn)行驗證，并在網(wǎng)絡(luò)中篩選出具有高度值的藥物活性成分。quercetin、taraxerol、kaemfprol、luteolin 和artemetin 最終被篩選為分子對接的配體，選擇上述篩選的核心靶點作為受體蛋白。結(jié)合親和力低于0 kcal·mol?1表明配體分子可以自發(fā)地與受體蛋白結(jié)合，而低于?5. 00 kcal·mol?1則表明配體分子具有較好的結(jié)合親和力。部分活性成分與靶點的分子對接結(jié)果模式見圖8，其中粉色部分為蛋白質(zhì)受體，綠色部分為小分子配體，淺藍(lán)色部分為配體與受體之間形成的氫鍵，說明配體與受體之間的結(jié)合相當(dāng)穩(wěn)定。本研究共獲得72 個分子對接結(jié)果（圖9）， 結(jié)合親和力最高的配對結(jié)果為 taraxerol 與 MYC （? 8. 73 kcal·mol?1）， 其中quercetin、kaemfprol、luteolin 和artemetin 與各個靶點均有很好的結(jié)合親和力。AKT1、STAT3、HSP90AA1、IL-6 和MAPK1 等靶點與各活性成分的對接結(jié)果也較好，可能在蒲公英-桑葉治療AML中發(fā)揮重要作用。

3 討 論

AML 是一種由骨髓中幼稚的粒細(xì)胞或其他髓系細(xì)胞（如紅系或巨核系） 發(fā)生惡性增生和克隆擴散所致癌癥，在其發(fā)生發(fā)展過程中涉及多個基因或信號通路。

藥對是2 味中藥配對應(yīng)用，2 種中藥同時應(yīng)用具有復(fù)方的基本特征， 且較復(fù)方簡單， 可提高療效，降低毒副作用，因此通常被認(rèn)為可通過多種途徑和作用靶點發(fā)揮作用。目前臨床用于治療白血病的復(fù)方中藥主要有清熱解毒、扶正補虛和活血化痰三大類。清熱解毒法多用于白血病尚未進(jìn)行系統(tǒng)化療或化療的誘導(dǎo)緩解階段。許多清熱解毒藥均具有抗癌細(xì)胞作用， 可與化療藥物發(fā)揮協(xié)同作用［19］。在中藥方劑中，桑葉具有清熱解毒、降血壓和利尿等作用，常用于治療肝熱目赤、肺熱咳嗽和高血壓等。研究［20］ 表明：桑葉富含生物堿、黃酮類、多酚和多糖等多種活性成分，具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤及保護(hù)心血管等功效。蒲公英具有清熱解毒、消腫利尿和活血化瘀的作用，除了抗炎和抗氧化等藥理作用外，蒲公英及其有效成分的抗腫瘤作用也尤為明顯［21］。目前已有研究［22］ 表明：蒲公英的有效成分對乳腺癌、肺癌和肝癌等多種癌癥有明顯的抑制作用。研究［23］ 顯示：水性蒲公英根提取物可通過激活人白血病Jurkat 細(xì)胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶8 （cysteinyl aspartate specificproteinase 8， CASP8） 選擇性誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。但蒲公英-桑葉聯(lián)合治療AML 的潛在機制尚不明確。

本研究采用基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法分析蒲公英-桑葉治療AML 的潛在分子機制，并進(jìn)行了分子對接進(jìn)行驗證。在蒲公英-桑葉抗AML 的148 個靶點中，基于CytoNCA 軟件分析的關(guān)鍵靶點分別為STAT3、EGFR、AKT1、EGF、VEGFA、MYC、TP53、MAPK3、CASP3、SRC、HSP90AA1、CTNNB1、PIK3CA、IL-6、TNF、MAPK1 和PIK3R1 等，可能在AML 中起到關(guān)鍵作用。上述蛋白參與了炎癥反應(yīng)、血管生成、氧化應(yīng)激、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡等各種生理過程。蒲公英-桑葉的潛在活性成分靶向STAT3 的度值最高，而STAT3 蛋白是潛在的細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子，是細(xì)胞生長的重要調(diào)節(jié)因子。STAT3 在正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的生長調(diào)控中均發(fā)揮重要作用，且在AML 細(xì)胞的存活中起關(guān)鍵作用［24］ 。研究［25］ 證實：STAT3 抑制劑可以抑制AML 的自噬并降低腫瘤生 長 速 度。 另 一 項 研 究［26］ 表 明：選擇性靶向JAK2/STAT3 通路是AML 的有效治療策略。姜黃素與三氧化二砷聯(lián)合應(yīng)用可誘導(dǎo)KG1-a 細(xì)胞凋亡并下調(diào)JAK2 和STAT3 的表達(dá)［27］。另外，在本研究的網(wǎng)絡(luò)圖中 AKT1 度值較高。AKT1 是絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶中的一種，AKT 蛋白調(diào)節(jié)多種細(xì)胞功能，包括正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的增殖、存活、代謝和血管生成， kaempferol 與 AKT1 結(jié)合可降低AKTl 磷酸化水平，促進(jìn)HL60 細(xì)胞凋亡［28］。

quercetin、luteolin、taraxerol 和artemetin 是化合物- 靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)中排名前 4 位的化合物，而kaemfprol 是桑葉活性成分中最為重要的化合物。在上述活性成分中，quercetin 度值最高，并且是蒲公英-桑葉共同的活性成分。quercetin 是在水果和蔬菜中發(fā)現(xiàn)的最豐富的類黃酮之一，在抗炎、抗腫瘤和抗氧化中起著至關(guān)重要的作用［29］。quercetin已被證明對AML 具有治療作用，通過調(diào)節(jié)AMPK的活性來抑制哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin， mTOR） 的磷酸化，從而起到調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬和細(xì)胞凋亡的作用［30］。luteolin 是一種黃酮類化合物，存在于許多藥用植物和蔬菜中。研究［31］ 表明：luteolin 可以誘導(dǎo)人早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞分化為健康的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞， 抑制癌細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。kaemfprol 是一種廣泛存在的類黃酮， 可與AKT1結(jié)合，進(jìn)而降低AKT 磷酸化水平，促進(jìn)HL-60 細(xì)胞凋亡［32］。蒲公英根含有多種類型的五環(huán)三萜類化合物，其中以taraxerol 最為突出，具有重要的藥理作用［33］。taraxerol 具有抗瘧原蟲、抗糖尿病、抗癌和抗炎的潛力，并可通過受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡發(fā)揮抗白血病的作用［34-37］。artemetin 存在于多種不同的藥用植物中，可通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來抑制人髓系白血病細(xì)胞的增殖［38］。

本研究中潛在靶點的GO 功能和KEGG 信號通路富集分析結(jié)果顯示：潛在靶點主要富集在細(xì)胞因子介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑、對激酶活性的正向調(diào)節(jié)和對氧化應(yīng)激的反應(yīng)等生物過程， 其相關(guān)通路也與PI3K/AKT、JAK/STAT 和TNF 信號通路有密切關(guān)聯(lián)。其中，PI3K/AKT 信號通路富集最為明顯。PI3K/AKT 信號傳導(dǎo)在AML 患者原始細(xì)胞中經(jīng)常被激活［39］， 進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡信號， 并干擾造血干細(xì)胞的正常分化。

本研究中分子對接結(jié)果表明：AKT1、STAT3、HSP90AA1、IL-6 和MAPK1 蛋白與蒲公英-桑葉的活性成分quercetin、kaemfprol、luteolin 和artemetin 均具有良好的結(jié)合親和力，進(jìn)一步證實了蒲公英-桑葉有效成分可發(fā)揮抗AML 的功效。

本研究存在一定的局限性：首先，本研究是通過對公共平臺的數(shù)據(jù)分析得出的，需要通過實驗來驗證上述結(jié)果；其次，在蒲公英-桑葉與AML 靶點分子對接的研究中，需要進(jìn)一步的分子動力學(xué)模擬來驗證上述結(jié)果的準(zhǔn)確性；此外，還需要更多的蒲公英-桑葉活性成分的藥代動力學(xué)研究來揭示其治療AML 的有效性和安全性。由于AML 發(fā)病進(jìn)展較快，蒲公英-桑葉應(yīng)該作為輔助治療，不能替代傳統(tǒng)的化療和放療等治療手段。

綜上所述， 蒲公英- 桑葉的主要活性成分quercetin、taraxerol、kaemfprol、luteolin 和artemetin可能通過調(diào)控AKT1、STAT3、HSP90AA1、IL-6和MAPK1 等發(fā)揮抗AML 的作用， 同時對PI3K/AKT 信號通路的調(diào)節(jié)是蒲公英-桑葉發(fā)揮抗AML作用的重要機制。本研究結(jié)果為利用蒲公英-桑葉治療AML 提供了理論依據(jù)，但還需要后續(xù)的分子生物學(xué)實驗和臨床研究來驗證。

利益沖突聲明：

所有作者聲明不存在利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：

周鑫辰參與研究設(shè)計和論文撰寫，董姝含和張卓參與數(shù)據(jù)收集整理和統(tǒng)計學(xué)分析，沈明妹、汪香君和李迎參與論文修改，劉麗梅參與論文審校。

[參考文獻(xiàn)]

［1］ SIEGEL R L， MILLER K D， FUCHS H E，et al.Cancer statistics， 2022［J］. CA： Cancer J Clin，2022，72（ 1）： 7-33.

［2］ 梁欣荃， 唐亦舒， 朱 平， 等. 不同類型急性白血病患者血流感染流行病學(xué)及預(yù)后分析： 一項長達(dá)九年多中心947例患者回顧性研究［J］. 臨床血液學(xué)雜志， 2023，36（1）： 27-32.

［3］ NAGEL G， WEBER D， FROMM E， et al.Epidemiological， genetic， and clinical characterization byage of newly diagnosed acute myeloid leukemia based onan academic population-based registry study （AMLSGBiO）［J］. Ann Hematol， 2017， 96（12）： 1993-2003.

［4］ ZENG Y J， WU M， ZHANG H， et al. Effects ofqinghuang powder on acute myeloid leukemia based onnetwork pharmacology， molecular docking， and in vitroexperiments［J］. Evid Based Complement Alternat Med，2021， 2021： 6195174.

［5］ FANG T T， LIU L Q， LIU W J. Networkpharmacology-based strategy for predicting therapytargets of Tripterygium wilfordii on acute myeloidleukemia［J］. Medicine （Baltimore）， 2020， 99（50）：e23546.

［6］ 霍俊明， 于維賢， 李維奇， 等. 急性白血病臨床治療體會與分析［J］. 中醫(yī)雜志， 1987， 28（8）： 31-33.

［7］ DEEPA M， SURESHKUMAR T，SATHEESHKUMAR P K， et al. Purified mulberry leaflectin （MLL） induces apoptosis and cell cycle arrest inhuman breast cancer and colon cancer cells［J］. ChemBiol Interact， 2012， 200（1）： 38-44.

［8］ 楊子輝， 董 朕， 伍蕙嵐， 等. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析蒲公英抗氧化功能的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機制［J］. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報， 2023， 54（5）： 2170-2185.

［9］ WU Z Y， JI X W， SHAN C， et al. Exploring thepharmacological components and effective mechanism ofMori Folium against periodontitis using networkpharmacology and molecular docking［J］. Arch OralBiol， 2022， 139： 105391.

［10］RU J L， LI P， WANG J N， et al. TCMSP： a databaseof systems pharmacology for drug discovery from herbalmedicines［J］. J Cheminform， 2014， 6： 13.

［11］WU Y， ZHANG F L， YANG K， et al. SymMap： anintegrative database of traditional Chinese medicineenhanced by symptom mapping［J］. Nucleic Acids Res，2019， 47（D1）： D1110-D1117.

［12］LIU Z Y， GUO F F， WANG Y， et al. BATMANTCM：a bioinformatics analysis tool for molecularmechANism of traditional Chinese medicine［J］. SciRep， 2016， 6： 21146.

［13］UNIPROT CONSORTIUM. UniProt： a worldwidehub of protein knowledge［J］. Nucleic Acids Res， 2019，47（D1）： D506-D515.

［14］PI?ERO J， RAMíREZ-ANGUITA J M， SAüCHPITARCHJ， et al. The DisGeNET knowledgeplatform for disease genomics： 2019 update［J］. NucleicAcids Res， 2020， 48（D1）： D845-D855.

［15］STELZER G， ROSEN N， PLASCHKES I， et al. TheGeneCards suite： from gene data mining to diseasegenome sequence analyses ［J］. Curr ProtocBioinformatics， 2016， 54. DOI： 10.1002/cpbi.5.

［16］AMBERGER J S， HAMOSH A. Searching onlineMendelian inheritance in man （OMIM）： aknowledgebase of human genes and geneticphenotypes［J］. Curr Protoc Bioinformatics， 2017， 58：1.2.1-1.2.1.2.12.

［17］SZKLARCZYK D， GABLE A L， NASTOU K C， et al.The STRING database in 2021： customizable proteinproteinnetworks， and functional characterization of useruploadedgene/measurement sets ［J］. Nucleic AcidsRes， 2021， 49（D1）： D605-D612.

［18］GONZáLEZ-CASTEJóN M， VISIOLI F，RODRIGUEZ-CASADO A. Diverse biologicalactivities of dandelion［J］. Nutr Rev， 2012， 70（9）：534-547.

［19］ZHANG Y L， LIANG Y E， HE C W. Anticanceractivities and mechanisms of heat-clearing anddetoxicating traditional Chinese herbal medicine［J］. ChinMed， 2017， 12： 20.

［20］MA G Q， CHAI X Y， HOU G G， et al.Phytochemistry， bioactivities and future prospects ofmulberry leaves： a review［J］. Food Chem， 2022， 372：131335.

［21］劉曉燕， 龍 鳳， 趙 玉， 等. 蒲公英中有效成分抗腫瘤作用機制的研究進(jìn)展［J］. 中草藥， 2023， 54（10）：3391-3400.

［22］袁鑫怡， 曾淑欣， 楊 潤， 等. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與分子對接的蒲公英抗乳腺癌的機制研究［J］. 天津中醫(yī)藥，2023， 40（1）： 110-116.

［23］OVADJE P， CHATTERJEE S， GRIFFIN C， et al.Selective induction of apoptosis through activation ofcaspase-8 in human leukemia cells （Jurkat） by dandelionroot extract［J］. J Ethnopharmacol， 2011， 133（1）：86-91.

［24］YU H， PARDOLL D， JOVE R. STATs in cancerinflammation and immunity： a leading role forSTAT3［J］. Nat Rev Cancer， 2009， 9（11）： 798-809.

［25］LARRUE C， HEYDT Q， SALAND E， et al.Oncogenic KIT mutations induce STAT3-dependentautophagy to support cell proliferation in acute myeloidleukemia［J］. Oncogenesis， 2019， 8： 39.

［26］VENUGOPAL S， BAR-NATAN M，MASCARENHAS J O. JAKs to STATs： a tantalizingtherapeutic target in acute myeloid leukemia［J］. BloodRev， 2020， 40： 100634.

［27］ZENG Y J， LIU F， WU M， et al. Curcumin combinedwith arsenic trioxide in the treatment of acute myeloidleukemia： network pharmacology analysis andexperimental validation［J］. J Cancer Res Clin Oncol，2023， 149（1）： 219-230.

［28］AMJAD E， SOKOUTI B， ASNAASHARI S.A systematic review of anti-cancer roles and mechanismsof kaempferol as a natural compound［J］. Cancer CellInt， 2022， 22（1）： 260.

［29］XIAO J， ZHANG B， YIN S M， et al. Quercetininduces autophagy-associated death in HL-60 cellsthrough CaMKKβ/AMPK/mTOR signal pathway［J］.Acta Biochim Biophys Sin， 2022， 54（9）： 1244-1256.

［30］SHAHBAZ M， IMRAN M， ALSAGABY S A， et al.Anticancer， antioxidant， ameliorative and therapeuticproperties of kaempferol［J］. Int J Food Prop， 2023，26（1）： 1140-1166.

［31］Al-Mosawe E H. The effect of luteolin on lymphocytecells in leukemia patient［J］. Al-Mustansiriyah J Sci，2013， 24（ 1）： 1-8.

［32］ZHENG D D， ZHOU Y M， LIU Y， et al. Molecularmechanism investigation on monomer kaempferol of thetraditional medicine Dingqing Tablet in promotingapoptosis of acute myeloid leukemia HL-60 cells［J］.Evid Based Complement Alternat Med， 2022， 2022：8383315.

［33］MUS A A， GOH L P W， MARBAWI H， et al. Thebiosynthesis and medicinal properties of taraxerol［J］.Biomedicines， 2022， 10（4）： 807.

［34］KHANRA R， DEWANJEE S， DUA T K， et al.Taraxerol， a pentacyclic triterpene from AbromaAugusta leaf， attenuates acute inflammation viainhibition of NF- κB signaling ［J］. BiomedecinePharmacother， 2017， 88： 918-923.

［35］KHANRA R， BHATTACHARJEE N， DUA T K，et al. Taraxerol， a pentacyclic triterpenoid， from AbromaAugusta leaf attenuates diabetic nephropathy in type 2diabetic rats［J］. Biomedecine Pharmacother， 2017， 94：726-741.

［36］YAO X Y， LI G L， BAI Q， et al. Taraxerol inhibitsLPS-induced inflammatory responses throughsuppression of TAK1 and Akt activation［J］.Int Immunopharmacol， 2013， 15（2）： 316-324.

［37］YAOI X， LU B Y， Lü C T， et al. Taraxerol inducescell apoptosis through A mitochondria-mediated pathwayin HeLa cells［J］. Cell J， 2017， 19（3）： 512-519.

［38］KO W G， KANG T H， LEE S J， et al.Polymethoxyflavonoids from Vitex rotundifolia inhibitproliferation by inducing apoptosis in human myeloidleukemia cells［J］. Food Chem Toxicol， 2000， 38（10）：861-865.

［39］MARTELLI A M， NY?KERN M， TABELLINI G，et al. Phosphoinositide 3-kinase/Akt signaling pathwayand its therapeutical implications for human acutemyeloid leukemia［J］. Leukemia， 2006， 20（6）： 911-928.

[基金項目] 吉林省科技廳科技發(fā)展計劃項目（YDZJ202201ZYTS515，20230203054SF）；吉林省人社廳創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)人才資助項目（2023RY12）