摘" 要：為了研究養(yǎng)殖密度對(duì)欽州鋸緣青蟹非特異性免疫能力的影響，挑選規(guī)格統(tǒng)一、體重（47.28±3.03）g的鋸緣青蟹（Scylla serrata）共1800只，共設(shè)置4個(gè)養(yǎng)殖密度組，分別為密度1組、密度2組、密度3組和密度4組。每個(gè)密度組飼養(yǎng)的鋸緣青蟹密度分別為40只/桶、80只/桶、160只/桶和320只/桶。每個(gè)密度小組分3個(gè)重復(fù)小組，每個(gè)重復(fù)小組的鋸緣青蟹均分別飼養(yǎng)在1.0 m×0.8 m×0.4 m規(guī)格的塑料桶中。飼養(yǎng)時(shí)間為期14 d。飼養(yǎng)結(jié)束后對(duì)鋸緣青蟹的非特異性免疫指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ACP和LZM以密度1組的最高，隨著養(yǎng)殖密度的增加，ACP和LZM呈逐漸降低的趨勢(shì)，ACP除了密度2組和密度3組相比差異不顯著（Pgt;0.05），其他各個(gè)小組間均達(dá)到差異顯著的水平（Plt;0.05），密度1組和密度4組的ACP相比差異極顯著；密度1組、密度2組和密度3組LZM對(duì)比組間差異不顯著，但是密度1組和密度3組的LZM相比差異顯著（Plt;0.05），密度1組和密度4組的LZM相比差異極顯著（Plt;0.01）；ALP密度2組的高于密度1組，但是差異不顯著（Pgt;0.05），密度1組和密度2組的ALP均顯著地高于密度3組（Plt;0.05），極顯著地高于密度4組（Plt;0.01）。試驗(yàn)說(shuō)明高養(yǎng)殖密度抑制了ACP、ALP和LZM的活性，造成鋸緣青蟹的免疫功能下降

關(guān)鍵詞：養(yǎng)殖密度；鋸緣青蟹（Scylla serrata）；非特異性免疫

中圖分類(lèi)號(hào)：S966.12文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A" "文章編號(hào)：1674-2419（2024）03-0291-03

青蟹是印度洋和太平洋等地區(qū)的主要的經(jīng)濟(jì)蟹種之一，主要分布于熱帶和亞熱帶的咸水港灣或者紅樹(shù)林區(qū)域[1]。青蟹具有個(gè)體大、肉量多、肉質(zhì)鮮美等特點(diǎn)，深受中國(guó)眾多消費(fèi)者的喜愛(ài)，所以在中國(guó)對(duì)于青蟹的市場(chǎng)需求量非常大[2]。據(jù)相關(guān)研究統(tǒng)計(jì)，青蟹屬有4種，分別為欖綠青蟹（Scylla olivacea）、鋸緣青蟹（Scylla serrata）、紫螯青蟹（Scylla tranquebarica）和擬穴青蟹（Scylla paramamosian）[3]，中國(guó)廣西欽州地區(qū)分布的青蟹以鋸緣青蟹為主，是欽州市名貴的海產(chǎn)之一。近幾年，欽州鋸緣青蟹養(yǎng)殖有了較大的發(fā)展，是當(dāng)?shù)貪O民主要的經(jīng)濟(jì)來(lái)源之一，所以提高當(dāng)?shù)劁従壡嘈返酿B(yǎng)殖效益顯得尤為重要。當(dāng)前在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中養(yǎng)殖戶為了獲得較大的水體利用效率，經(jīng)常采用增加養(yǎng)殖密度來(lái)提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益[4]；但是養(yǎng)殖密度不是越高越好，過(guò)高的養(yǎng)殖密度會(huì)影響水生動(dòng)物的生長(zhǎng)，且高密度養(yǎng)殖下，會(huì)給水生動(dòng)物造成密度脅迫應(yīng)激，使得水生動(dòng)物的抗氧化和免疫功能均受到影響，嚴(yán)重的話會(huì)導(dǎo)致水生動(dòng)物死亡[5-6]。所以，該研究以提高欽州地區(qū)鋸緣青蟹養(yǎng)殖效益為出發(fā)點(diǎn)，探討不同的養(yǎng)殖密度對(duì)該地區(qū)鋸緣青蟹免疫力的影響，以期為該地區(qū)鋸緣青蟹的合理養(yǎng)殖以及提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益做理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用的鋸緣青蟹購(gòu)于欽州某青蟹養(yǎng)殖基地，規(guī)格統(tǒng)一質(zhì)量為（47.28±3.03）g；購(gòu)買(mǎi)來(lái)的鋸緣青蟹先暫養(yǎng)于塑料桶中，暫養(yǎng)期間桶中的水質(zhì)鹽度要保持在（4.8±0.5）‰，同時(shí)保證溶解氧≥5.2 mg/L，水溫控制在（28.0±1.0）℃，同時(shí)桶中水要求每天更換1次；堿性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）和溶菌酶（LZM）等免疫相關(guān)酶測(cè)定試劑盒購(gòu)置于南京建成生物工程研究所有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

選擇鋸緣青蟹共計(jì)1800只。試驗(yàn)共設(shè)置4個(gè)養(yǎng)殖密度組，分別為密度1組、密度2組、密度3組和密度4組。每個(gè)密度組飼養(yǎng)的鋸緣青蟹密度分別為40只/桶、80只/桶、160只/桶和320只/桶。每個(gè)密度小組分3個(gè)重復(fù)小組，每個(gè)重復(fù)小組的鋸緣青蟹分別飼養(yǎng)于規(guī)格為1.0 m×0.8 m×0.4 m的塑料桶中，飼養(yǎng)時(shí)間為14 d；飼養(yǎng)結(jié)束后每個(gè)密度組隨機(jī)抽取3只鋸緣青蟹，取其鰓部位組織0.1 g，然后根據(jù)質(zhì)量比加入15的生理鹽水研磨后離心取上清液，置于-80℃?zhèn)溆谩?/p>

1.3 試驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定以及數(shù)據(jù)處理

取通過(guò)1.2步驟保存的離心上清液，利用采購(gòu)的非特異性免疫相關(guān)的酶檢測(cè)試劑盒，根據(jù)使用說(shuō)明書(shū)對(duì)堿性磷酸酶（ALP）、酸性磷酸酶（ACP）和溶菌酶（LZM）指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定出的檢測(cè)結(jié)果采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），若組間存在顯著差異，則采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”，Plt;0.05表示組間差異顯著。

2 結(jié)果

養(yǎng)殖密度對(duì)鋸緣青蟹非特異性免疫指標(biāo)存在顯著的影響（表1）。酸性磷酸酶和溶菌酶以密度1組的最高，隨著養(yǎng)殖密度的增加，酸性磷酸酶和溶菌酶呈逐漸降低的趨勢(shì)。酸性磷酸酶除了密度2組和密度3組相比差異不顯著（Pgt;0.05），其他各個(gè)小組間均達(dá)到差異顯著的水平（Plt;0.05）。密度1組和密度4組的酸性磷酸酶相比差異極顯著，密度1組、密度2組和密度3組溶菌酶對(duì)比組間差異不顯著，但是密度1組和密度3組的溶菌酶相比差異顯著（Plt;0.05）。密度1組和密度4組的溶菌酶相比差異極顯著（Plt;0.01）。堿性磷酸酶密度2組高于密度1組，但是差異不顯著（Pgt;0.05）。密度1組和密度2組的堿性磷酸酶均顯著地高于密度3組（Plt;0.05），極顯著地高于密度4組（Plt;0.01）。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，高養(yǎng)殖密度抑制了酸性磷酸酶、堿性磷酸酶和溶菌酶的活性，造成鋸緣青蟹的免疫功能下降。

3 討論

鋸緣青蟹的非特異性免疫系統(tǒng)包括免疫器官組織、體液免疫和免疫細(xì)胞三大部分，ACP和ALP是甲殼動(dòng)物機(jī)體免疫機(jī)制過(guò)程中直接參與磷酸基團(tuán)的代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)，可以消除入侵機(jī)體的病原物，從而使得機(jī)體免受侵襲，是水解酶系統(tǒng)的重要組成部分[7-8]。黃永春等[9]人研究發(fā)現(xiàn)超過(guò)40萬(wàn)尾/m3凡納濱對(duì)蝦的養(yǎng)殖密度，對(duì)蝦體內(nèi)的ACP、ALP活性顯著降低；周素琴等[10]人發(fā)現(xiàn)環(huán)境脅迫會(huì)對(duì)鋸緣青蟹的ALP、ACP和LZM活性造成顯著性影響；該研究中發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的升高，ALP和ACP活性顯著低于低密度組，這些結(jié)果表明高養(yǎng)殖密度抑制了ALP、ACP的活性，造成鋸緣青蟹的免疫功能下降。LZM是吞噬細(xì)胞殺菌的物質(zhì)基礎(chǔ)，是衡量動(dòng)物體非特異性免疫的一個(gè)重要指標(biāo)[11-12]。該研究結(jié)果表明，低養(yǎng)殖密度下對(duì)LZM活性不會(huì)造成顯著影響，但是隨著養(yǎng)殖密度的升高抑制LZM活性越明顯。黃東科等[13]人在研究養(yǎng)殖密度對(duì)波紋龍蝦免疫力的影響過(guò)程中發(fā)現(xiàn)LZM的活性隨養(yǎng)殖密度的增大而下降，與該研究結(jié)果相符。

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Effect of density on the nonspecific immunity of Scylla serrata

WANG Tianyi1， RUAN Liangpeng2， ZHONG Changyan2

（1.Agricultural and Rural Service Center， Nari Town， Qinnan District， Qinzhou 535013， Guangxi China; 2.Qinzhou City Qinnan District Aquatics Technology Promotion Station， Qinzhou 535000， Guangxi China）

Abstract：In order to investigate the effects of culture density on the non-specific immunity of Qinzhou blue crabs （Scylla serrata）， 1800 blue crabs with uniform size and body weight （47.28±3.03） g were selected and four culture density groups were set up， namely density group 1， density group 2， density group 3 and density group 4. The densities of blue crabs in each density group were 40， 80， 160 and 320， respectively. Each density group was divided into 3 repeat groups， and the green crabs in each repeat group were raised in 1.0m×0.8m×0.4m plastic buckets， respectively. The feeding time lasted for 14 days. The non-specific immune indexes of blue crab were measured after feeding. The results showed that ACP and LZM were the highest in density group 1， and with the increase of culture density， ACP and LZM showed a gradually decreasing trend， except that there was no significant difference in ACP between density group 2 and density group 3 （Pgt;0.05）， and all other groups reached a significant difference level （Plt;0.05）. The ACP of density group 1 was significantly different from that of density group 4. There was no significant difference in LZM between density group 1， density group 2 and density group 3， but the difference in LZM between density group 1 and density group 3 was significant （Plt;0.05）， and the difference in LZM between density group 1 and density group 4 was extremely significant （Plt;0.01）. The ALP in density group 2 was higher than that in density group 1， but the difference was not significant （Pgt;0.05）. The ALP in density group 1 and density group 2 was significantly higher than that in density group 3 （Plt;0.05）， and was extremely significantly higher than that in density group 4 （Plt;0.01）. The results showed that the high culture density inhibited the activity of ACP， ALP and LZM， which resulted in the decrease of immune function of blue crabs.

Keywords：breeding density; Scylla serrata; nonspecific immunity

作者簡(jiǎn)介：王天藝（1977.10- ），男，漢族，廣西欽州人，水產(chǎn)工程師。研究方向：水產(chǎn)養(yǎng)殖。E-mail：qnnl3751522@126.com。