摘 要：葡萄灰霉病是危害葡萄生產(chǎn)最主要的真菌病害之一，對(duì)葡萄的產(chǎn)量和品質(zhì)均有較大影響，對(duì)灰霉病綠色防治方法進(jìn)行探索可為優(yōu)質(zhì)安全葡萄果品生產(chǎn)提供良好的生產(chǎn)實(shí)踐基礎(chǔ)。通過對(duì)陽(yáng)光玫瑰葡萄進(jìn)行離體葉片接種灰霉病菌進(jìn)而探索生物源藥劑的防治效果。結(jié)果表明，較對(duì)照而言，生物源藥劑（綠地康3號(hào)、苦參堿和棕櫚精油）可以阻止葡萄葉片灰霉病病斑面積的擴(kuò)大，其中苦參堿的防治效果最佳。所以，設(shè)施葡萄灰霉病綠色防治方法中建議優(yōu)先使用苦參堿。

關(guān)鍵詞：葡萄灰霉病；生物源；農(nóng)藥藥效

葡萄是世界四大水果之一，在我國(guó)廣泛種植且被公認(rèn)為重要的果樹類經(jīng)濟(jì)作物?，F(xiàn)階段葡萄生產(chǎn)多采用設(shè)施栽培模式，有效地降低了病蟲害風(fēng)險(xiǎn)（尤其是霜霉?。1-2]，設(shè)施葡萄常見病害為灰霉病，灰霉病病菌是一種寄主范圍廣的兼性寄生菌，分生孢子經(jīng)過氣流傳播，侵染到破損的葉片、花、穗[3-4]。發(fā)病時(shí)，病斑邊緣呈不規(guī)則形，病葉下垂或干枯，花序和果實(shí)容易腐爛脫落，從而造成經(jīng)濟(jì)損失。溫室大棚排水設(shè)施差、土壤黏性大、枝葉茂密、通風(fēng)透光不良、溫濕度高均能引起灰霉病發(fā)病[5]。

現(xiàn)階段對(duì)葡萄灰霉病病菌的防治以化學(xué)防治為主，生物防治和生態(tài)控制為輔?；颐共〔【鷮?duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，容易產(chǎn)生抗藥性，影響了化學(xué)防控的有效性，并且化學(xué)農(nóng)藥對(duì)生態(tài)環(huán)境造成的破壞廣受社會(huì)關(guān)注，所以采用生物農(nóng)藥替換化學(xué)農(nóng)藥成為今后病蟲害防治的一個(gè)重要發(fā)展方向[6-8]。綠地康3號(hào)是中農(nóng)綠康北京生物技術(shù)有限公司研發(fā)的生物源藥劑，可以使作物表面形成一種高效的保護(hù)膜，能有效地防止有害病原菌進(jìn)入植物體內(nèi)，有效阻止植物病蟲害、病原細(xì)菌生長(zhǎng)，誘導(dǎo)出植物機(jī)體對(duì)病原菌的防護(hù)機(jī)能，抑制菌類對(duì)植物的危害，起到保護(hù)植物的作用，綠地康3號(hào)防治葡萄病害的研究已有相關(guān)報(bào)道[9]?？鄥A是由苦參的組織提取制成，主要成分為生物堿和黃酮類，近年來，國(guó)內(nèi)逐漸開發(fā)出苦參堿農(nóng)藥，應(yīng)用于葡萄的病蟲害防治[10]。據(jù)報(bào)道植物精油對(duì)病菌活性有抑制作用[11]。此外，華東師范大學(xué)研究發(fā)現(xiàn)丙酸鈣在酸性較強(qiáng)的情況下可完全抑制灰霉菌的孢子生長(zhǎng)，可有效預(yù)防葡萄果實(shí)灰霉病的發(fā)生，有效控制葡萄采后的品質(zhì)劣變[12]。鑒于前人報(bào)道，筆者在本試驗(yàn)中選擇4種不同的生物源藥劑，通過在離體葉片上進(jìn)行接種觀察發(fā)病情況，分析藥劑藥效，為葡萄生產(chǎn)提供理論數(shù)據(jù)和實(shí)踐依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）由本課題組分離純化，經(jīng)過形態(tài)學(xué)觀察和分子鑒定[13]，菌株保存于馬鈴薯蔗糖瓊脂（ PDA） 培養(yǎng)基斜面上（ 4 ℃保存 ） 。

試驗(yàn)于2023年6月在上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，大小一致的葡萄幼嫩葉片取自上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院莊行試驗(yàn)站的10年生陽(yáng)光玫瑰葡萄樹上。

1.2 試驗(yàn)方法

取大小一致的幼嫩葉片，放打濕的濾紙上（圖1），使用不同的藥劑用噴壺均勻地噴在葉片背面，每隔2小時(shí)噴1次，連噴2次。

不同藥劑處理如下：CK—清水；T1—綠地康3號(hào)（中農(nóng)綠康北京生物技術(shù)有限公司），稀釋500倍；T2—0.6% 苦參堿（內(nèi)蒙古清源保生物科技有限公司），稀釋500倍；T3—棕櫚精油（上海美植家園藝有限公司），稀釋800倍；T4—丙酸鈣（南通奧凱神武技術(shù)開發(fā)有限公司），0.5%，pH值5.0。

待藥劑揮發(fā)干后，選用在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)3天的菌落，使用0.8厘米打孔器進(jìn)行打孔，將打孔后的菌餅鋪在葡萄葉片背面（圖2），并放入人工培養(yǎng)箱（上海皓莊有限公司，型號(hào)LI280A）中培養(yǎng)，設(shè)置溫度22 ℃、相對(duì)濕度90%觀察記錄葉片感染情況，觀察5天后，使用ImageJ軟件統(tǒng)計(jì)葡萄葉片病斑感染面積[14]。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用Excel 2010 和SPSS 18.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析。

2 結(jié)果與分析

葡萄葉片背面接種灰霉病后，每天觀察病斑的生長(zhǎng)情況，不同處理下病斑的發(fā)展趨勢(shì)有所不同，CK和T4處理下的病斑發(fā)展速度較快，T2處理下的病斑發(fā)展速度較慢。

由圖3和表1可知，不同處理下陽(yáng)光玫瑰葉片上灰霉病病斑在5天后有明顯的差異，其中CK和T4處理的病斑感染面積最大，分別為8.16和8.29 厘米2；T1和T3處理的病斑面積次之，分別為4.55和4.31 厘米2；T2處理的病斑面積最?。?.73 厘米2），且與其他處理有顯著差異。由上可知，清水處理和丙酸鈣處理下灰霉病病斑發(fā)展情況較為類似，說明丙酸鈣可能對(duì)葉片灰霉病防治方面沒有作用；綠地康3號(hào)和棕櫚精油處理下的灰霉病病斑面積較清水處理小，且具有顯著差異，說明綠地康3號(hào)和棕櫚精油防治葡萄葉片灰霉病有效果；相比較而言，苦參堿處理下病斑擴(kuò)散面積最小，說明苦參堿對(duì)葡萄葉片灰霉病防治效果最佳。

3 討 論

灰霉病是廣泛分布于全世界葡萄種植國(guó)家和地區(qū)的重要病害，它嚴(yán)重影響了葡萄的產(chǎn)量和品質(zhì)。傳統(tǒng)防治灰霉病的藥劑如腐霉利、嘧霉胺、多菌靈、百菌清等由于使用頻繁，灰霉病菌對(duì)部分藥劑已產(chǎn)生抗藥性，防效較差。經(jīng)分析，葡萄品種、栽培方式、栽培條件等因素不同，灰霉病藥劑防效可能有所差異[15-17]，故在葡萄生產(chǎn)中，可通過調(diào)節(jié)設(shè)施棚內(nèi)溫濕度，園藝地布覆蓋地面，以及葉片、枝條和果實(shí)的科學(xué)管理等措施有效防止灰霉病的發(fā)生，同時(shí)，鑒于生物防治較化學(xué)防治具有安全、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，生產(chǎn)中應(yīng)優(yōu)先采用生物防治。

本試驗(yàn)結(jié)果表明供試的4種藥劑中，3種藥劑（綠地康3號(hào)、苦參堿和棕櫚精油）對(duì)葡萄葉片的灰霉病均有一定的防治效果，其中苦參堿最能有效抑制灰霉病的發(fā)生。馬蕊等[8]在田間試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)葡萄果實(shí)灰霉病使用苦參堿藥劑后發(fā)病率較對(duì)照降低；楊勇等[10]研究發(fā)現(xiàn)丁子香酚和苦參堿混配對(duì)葡萄灰霉病菌防治效果明顯，可以減少和替代化學(xué)農(nóng)藥的使用，提高果品品質(zhì)。綜合以上結(jié)果，建議在設(shè)施葡萄生產(chǎn)上優(yōu)先使用苦參堿對(duì)葡萄灰霉病進(jìn)行防治。

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