仉 弦

（山東省新泰市畜牧獸醫(yī)事業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，山東泰安 271200）

豬偽狂犬病是一種由偽狂犬病病毒引起的傳染病，它不僅會影響家畜、野生動物和伴侶動物，還會危及試驗(yàn)動物的健康。該病的臨床表現(xiàn)主要包括發(fā)熱、腦脊髓炎和生產(chǎn)母豬的嚴(yán)重繁殖障礙。這種病毒造成的經(jīng)濟(jì)損失僅次于口蹄疫和豬瘟。雖然豬偽狂犬病在我國的豬群發(fā)生相對較早，但是對這種疾病的了解仍然不足。由于缺乏應(yīng)有的警惕和恰當(dāng)?shù)姆乐茖Σ?，這種病流行猖撅，危害日益嚴(yán)重。為了預(yù)防豬偽狂犬病，需要采取一系列的預(yù)防措施。一方面農(nóng)民和飼養(yǎng)員需要加強(qiáng)對豬偽狂犬病的了解，提高對疫情的警惕性。另一方面要加強(qiáng)豬群的管理和衛(wèi)生，減少病毒的傳播。此外，還應(yīng)該加強(qiáng)疫苗的研發(fā)和使用，提高豬的免疫力，降低疫情的發(fā)生率。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

豬偽狂犬病毒ELISA 抗體檢測試劑盒購自武漢某公司。試驗(yàn)豬來自于山東省泰安市新泰市某規(guī)?；i養(yǎng)殖場。試驗(yàn)時間為2020 年1 月至2021 年2 月，共選擇了250 頭繁殖母豬和200 頭種公豬以及1000 頭仔豬。豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗購自浙江某公司。

1.2 試驗(yàn)方法

將250 頭繁殖母豬和200 頭種公豬以及1000頭仔豬按照隨機(jī)分組原則分為5 組，每組各繁殖母豬50 頭、種公豬50 頭和仔豬200 頭。

1.3 血液采集

在免疫接種14d 后隨機(jī)從試驗(yàn)各組豬群前腔靜脈或者耳靜脈采集血樣10 份，將采集到的血液樣本放入無菌試管中，3000r/min 離心10min將血清分離出來-20℃冷凍保存待測。

1.4 抗體檢測與判定方法

將凍存的血清樣本在室溫條件下解凍。試劑盒中所配的稀釋液和酶標(biāo)板準(zhǔn)備好。將稀釋液加入到每個酶標(biāo)板孔中，再加入2μL 待檢測血清樣本。將酶標(biāo)板封閉，搖晃15～30s，并在37℃孵育1h。酶標(biāo)板孔內(nèi)的液體倒掉并用洗滌緩沖液洗板，重復(fù)此步驟3 次。將稀釋液加到酶標(biāo)板孔中，再加入10μL 酶標(biāo)記抗體。將酶標(biāo)板封閉，搖晃15～30s，并在37℃孵育1h。將酶標(biāo)板孔內(nèi)的液體倒掉并用洗滌緩沖液洗板，重復(fù)此步驟3次。加入底物溶液到每個酶標(biāo)板孔中，并在37℃下孵育20min。每個酶標(biāo)板孔中加入終止溶液，并振蕩混勻。使用酶標(biāo)儀檢測每個孔的吸光值，記錄樣本的OD 值。S=樣品孔OD630nm值，N=陰性對照孔OD630nm值平均。若S/N≤0.6，樣品應(yīng)判定為陽性，S/N＞0.7，樣品應(yīng)該判定為陰性。0.6＜S/N≤0.7，樣品疑似陽性必須重新測試。

2 結(jié)果

2.1 各組豬偽狂犬病S/N 均值

由表1 可知，普通免疫、跟胎免疫、定時免疫組豬群在100 日齡之前豬偽狂犬病S/N 均值小于0.6，這說明3 個組的免疫效果良好，3 種免疫方法都可以用于今后的生豬免疫接種。100 日齡之后抗體呈現(xiàn)逐漸消退的態(tài)勢，需要加強(qiáng)疫苗免疫接種。種豬免疫組的豬偽狂犬病S/N 均值大于0.7，這說明母原抗體在40 日齡左右，逐漸消退為陰性，生豬在育肥養(yǎng)殖階段容易受到野毒株感染，所以在今后免疫程序制定過程中需要強(qiáng)化二次免疫。

表1 免疫接種程序

表1 試驗(yàn)各個組別豬偽狂犬病S/N 均值

2.2 各組別豬群抗體合格率

由表2 可知，普通免疫、跟胎免疫、定時免疫組種豬的免疫合格率達(dá)到了100%，仔豬49 日齡前的抗體合格率也能夠達(dá)到100%，增長，但75 日齡之后，抗體水平呈現(xiàn)逐漸下降的態(tài)勢，120 日齡合格率趨近于0，這個階段有可能增加豬偽狂犬病毒野毒株感染的機(jī)會，建議在仔豬首次免疫接種之后，適當(dāng)進(jìn)行第2 次強(qiáng)化免疫接種。種豬免疫組28 日齡豬的抗體合格率在80%，42 日齡之后抗體合格率呈現(xiàn)急劇下降的態(tài)勢，基本沒有保護(hù)率，說明仔豬從母體當(dāng)中獲得的母源抗體維持時間不長。

表2 各組別豬群抗體合格率

3 討論

3.1 豬偽狂犬病免疫接種效果分析

通過本次研究，通過免疫接種效果可以看出，本次所選擇的疫苗能夠產(chǎn)生良好的免疫保護(hù)效果，無論是跟胎免疫還是一年兩次免疫，或者每間隔4 個月進(jìn)行免疫，均能夠取得良好的免疫接種效果，種豬的免疫抗體合格率達(dá)到100%，仔豬在49日齡前抗體合格率也能夠達(dá)到100%。75 日齡之后，仔豬的抗體呈現(xiàn)逐漸消失的態(tài)勢，120 日齡基本消失。在今后豬偽狂犬病疫苗免疫接種過程中，為了增強(qiáng)豬群的免疫能力，避免野毒株傳入，建議仔豬在首次免疫接種之后進(jìn)行第2 次強(qiáng)化免疫接種，而種公豬和繁殖母豬在春秋兩季進(jìn)行免疫接種之后，如果不給仔豬進(jìn)行免疫，接種仔豬在35 日齡之后抗體水平逐漸下降，直到全部為陰性，不能夠抵抗野毒株的侵襲，因此該種方法不宜推廣應(yīng)用。

3.2 豬偽狂犬病免疫接種低下的原因分析

3.2.1 種公豬偽狂犬病免疫接種低下的原因與對策分析

種公豬偽狂犬病免疫接種低下的原因包括了偽狂犬病疫苗的質(zhì)量參差不齊，部分疫苗的免疫效果不理想，影響了接種效果。疫苗接種方法不當(dāng)，如注射部位不準(zhǔn)確、注射深度不夠、疫苗混合不勻等，也會導(dǎo)致免疫接種效果不佳。此外，免疫程序不合理，如接種時間過早或過晚、接種間隔過長或過短等，會影響免疫效果。同時，種公豬的健康狀況不佳，如患有疾病、營養(yǎng)不良等，會影響疫苗的免疫效果。選用質(zhì)量可靠、免疫效果好的偽狂犬病疫苗，確保接種效果。確保疫苗接種部位準(zhǔn)確、注射深度適宜，疫苗混合均勻，避免疫苗浪費(fèi)和接種失敗。根據(jù)豬只的年齡、健康狀況和當(dāng)?shù)匾咔榈纫蛩?，制定合理的免疫程序，確保接種效果。保證種公豬的營養(yǎng)需求，加強(qiáng)疾病防治，提高豬只健康狀況，增強(qiáng)疫苗的免疫效果。

3.2.2 繁殖母豬偽狂犬病免疫接種低下的原因與對策分析

母豬偽狂犬病免疫接種低下可能有多種原因，疫苗的儲存、運(yùn)輸和使用條件不當(dāng)可能導(dǎo)致疫苗效力下降。對策是確保疫苗的正確儲存溫度和有效期，遵循疫苗使用說明書。母豬在孕期和哺乳期期間，特別是在懷孕早期，免疫應(yīng)該得到特別關(guān)注。對策是制定適當(dāng)?shù)拿庖哂媱?，確保母豬在適當(dāng)?shù)臅r間接種疫苗。同時，母豬的免疫狀態(tài)可能受到其他疾病、營養(yǎng)不良或應(yīng)激等因素的影響，從而影響對偽狂犬病疫苗的免疫反應(yīng)。對策是通過改善母豬的飼養(yǎng)環(huán)境、提供高質(zhì)量的飼料和增加營養(yǎng)補(bǔ)給來提高母豬的免疫狀態(tài)。養(yǎng)殖員在接種過程中可能存在技術(shù)操作不當(dāng)或未按照正確程序進(jìn)行接種的情況。對策是提供充足的培訓(xùn)和教育，確保養(yǎng)殖員正確掌握接種技術(shù)。

3.2.3 仔豬豬偽狂犬病免疫接種低下的原因與對策分析

豬偽狂犬病是一種由病毒引起的豬類傳染性疾病，它對豬的健康和生產(chǎn)造成了嚴(yán)重威脅。有些地區(qū)缺乏嚴(yán)格的免疫接種制度，導(dǎo)致仔豬免疫接種工作不夠規(guī)范、及時和全面。一些農(nóng)民或養(yǎng)殖戶在接種過程中缺乏專業(yè)知識和正確操作，導(dǎo)致免疫效果低下。部分地區(qū)使用的疫苗可能存在質(zhì)量問題，如疫苗保存不當(dāng)、未按照要求使用新鮮疫苗等，影響疫苗的有效性。部分養(yǎng)殖戶考慮到經(jīng)濟(jì)利益，為了降低成本而減少了免疫接種的頻次或劑量，從而導(dǎo)致免疫接種不足。為了解決上述問題應(yīng)該制定相關(guān)政策法規(guī)，明確責(zé)任人和執(zhí)法機(jī)構(gòu)，加強(qiáng)對免疫接種制度的監(jiān)管和落實(shí)。建立健全的免疫登記和檔案管理體系，確保仔豬免疫接種的全覆蓋和及時性。同時，政府和獸醫(yī)主管部門應(yīng)加強(qiáng)對農(nóng)民和相關(guān)養(yǎng)殖人員的接種技術(shù)培訓(xùn)，提高其免疫接種的操作水平和技術(shù)嫻熟度。加大對獸藥企業(yè)和疫苗生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)管力度，嚴(yán)格執(zhí)行有關(guān)疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，確保疫苗的質(zhì)量安全。加強(qiáng)對疫苗存儲和運(yùn)輸環(huán)節(jié)的監(jiān)控，確保疫苗的有效性。

4 小結(jié)

豬偽狂犬病是一種十分危險的傳染病，對于農(nóng)民和飼養(yǎng)員來說，應(yīng)該時刻保持警惕，加強(qiáng)預(yù)防工作，以保障豬的健康和生產(chǎn)。選用豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗時，應(yīng)選擇具有良好免疫效果和可靠口碑的疫苗。根據(jù)豬只的年齡、體重、健康狀況和當(dāng)?shù)匾咔榈纫蛩?，制定合理的免疫程序。確保疫苗接種部位準(zhǔn)確，注射深度適宜，疫苗混合均勻，避免疫苗浪費(fèi)和接種失敗。在疫苗運(yùn)輸、儲存和使用過程中，要嚴(yán)格遵循相關(guān)規(guī)定，避免疫苗污染。在疫苗接種后，要密切觀察豬只的免疫反應(yīng)，如出現(xiàn)異常反應(yīng)，要及時處理。此外，豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗免疫接種是預(yù)防和控制豬偽狂犬病的有效手段。在實(shí)際操作過程中，要關(guān)注疫苗的選擇、免疫程序的制定、接種方法的規(guī)范、防止疫苗污染等方面，確保免疫接種效果。同時，加強(qiáng)豬舍環(huán)境衛(wèi)生管理，提高豬只健康狀況，也是提高免疫接種效果的重要因素。綜合考慮多種因素，做好豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗免疫接種工作，有助于保障豬群的健康和生產(chǎn)效益。