常正江 陳小龍

作者單位：716000 陜西省延安市人民醫(yī)院

乳腺癌是目前臨床上常見的女性惡性腫瘤,每年新增病例數(shù)位居世界第一[1]。傳統(tǒng)的手術(shù)切除、放化療以及免疫、靶向治療等手段可在一定程度上改善乳腺癌的預(yù)后,但由于患者的早期診斷率較低,患者長期預(yù)后仍然存在巨大挑戰(zhàn)[2]。由于乳腺癌早期不易與其他良性腫瘤區(qū)分,加上缺乏有效的腫瘤標(biāo)志物對(duì)高?；颊哌M(jìn)行早期識(shí)別,導(dǎo)致乳腺癌的預(yù)后不理想。因此,進(jìn)一步探索乳腺癌早期診斷及病情評(píng)估的相關(guān)分子標(biāo)志物在疾病防治中極其重要。乳腺癌組織中微小核糖核酸-92a(miR-92a)的表達(dá)與臨床分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[3];可溶性細(xì)胞間黏附分子-1(sICAM-1)與乳腺癌病情密切相關(guān),可用于術(shù)后動(dòng)態(tài)監(jiān)測病情[4];血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)與乳腺癌腫瘤大小、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后密切相關(guān)[5]。本研究主要探討 miR-92a、sICAM-1、VEGF在乳腺癌患者中的表達(dá)及與超聲血流參數(shù)的相關(guān)性,旨在為疾病的早期診斷及病情評(píng)估提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性收集2021年1月到2021年12月期間本院收治的乳腺癌患者102例作為乳腺癌組,年齡30～70歲,平均年齡(52.3±8.4)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):①首次確診且臨床資料記錄完整;②符合《中國晚期乳腺癌規(guī)范診療指南(2020版)》[6]的診斷標(biāo)準(zhǔn),術(shù)后病理組織均經(jīng)病理檢查證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他系統(tǒng)的惡性腫瘤;②肝、腎功能受損;③合并嚴(yán)重感染性疾病;④合并自身免疫系統(tǒng)疾病。⑤合并心腦血管疾病。同期收集100例乳腺良性結(jié)節(jié)患者作為對(duì)照組,年齡30～70歲,平均年齡(51.9±8.0)歲,經(jīng)術(shù)后病理組織切片確診為良性結(jié)節(jié)。兩組研究對(duì)象的年齡、性別等比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)備案通過,所有患者知情同意。

1.2 超聲檢查方法

超聲檢測儀器為日本東芝Aplio 500儀器,線陣探頭頻率4～11 MHz?；颊卟扇⊙雠P位,使乳腺病變部位充分暴露。圖像穩(wěn)定后測定血流參數(shù),測量3次PSV、EDV、PI、RI值,取平均值進(jìn)行記錄。以上操作由2名資深B超醫(yī)生進(jìn)行。

1.3 血清學(xué)檢測方法

所有研究對(duì)象空腹8小時(shí)以上于次日8點(diǎn)左右抽取靜脈血3 ml注入無添加劑的干燥試管,顛倒混勻數(shù)次后靜置30 min,再以3000 rpm的速度離心10 min,吸取上清液置于-80 ℃超低溫冰箱中保存?zhèn)溆谩iR-92a采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測,其逆轉(zhuǎn)錄引物是5'-CTCAACTGGTGTCGT,GGAGTCGGCAATTCAGTTGAGACAGGCCG-3',上游引物是5'-ACACTCCAGCTGGGTATTGCACTTGT CCCG-3',下游引物是5'-TGGTGTCGTGGAGTCG-3'。通過2-△△CT法計(jì)算相對(duì)表達(dá)量,每個(gè)標(biāo)本檢測3次,儀器為美國ABI7500型PCR儀。sICAM-1采用酶聯(lián)免疫方法進(jìn)行檢測,檢測試劑盒由上海玉博生物科技有限公司提供,儀器為雷杜公司RT-6100酶標(biāo)分析儀。VEGF應(yīng)用羅氏cobas e601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑進(jìn)行檢測。同一檢測項(xiàng)目均在同一臺(tái)儀器完成,嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組miR-92a、sICAM-1、VEGF水平比較

乳腺癌組miR-92a、sICAM-1、VEGF水平明顯高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。

表1 兩組miR-92a、sICAM-1、VEGF水平比較

2.2 miR-92a、sICAM-1、VEGF檢測對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值

繪制miR-92a、sICAM-1、VEGF對(duì)乳腺癌的ROC 曲線,結(jié)果顯示,三項(xiàng)聯(lián)合檢測的曲線下面積(AUC)為0.897,靈敏度為89.3%,特異度為90.0%,提高了診斷效能,具體見表2和圖1。

圖1 miR-92a、sICAM-1、VEGF對(duì)乳腺癌的ROC曲線

表2 miR-92a、sICAM-1、VEGF檢測對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值分析

2.3 乳腺癌發(fā)生的影響因素分析

以是否發(fā)生乳腺癌為因變量,將miR-92a、sICAM-1、VEGF作為自變量進(jìn)行多因素Logistic回歸分析,結(jié)果顯示,miR-92a、sICAM-1、VEGF是乳腺癌發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素(P<0.05),見表3。

表3 乳腺癌發(fā)生的多因素Logistic回歸分析

2.4 兩組超聲血流參數(shù)的比較

乳腺癌組患者的PSV、EDV明顯高于對(duì)照組,PI、RI明顯低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表4。

表4 兩組超聲血流參數(shù)比較

2.5 miR-92a、sICAM-1、VEGF與乳腺癌患者超聲血流參數(shù)的相關(guān)性

采用Spearman相關(guān)性分析 miR-92a、sICAM-1、VEGF與超聲血流參數(shù)的關(guān)系,結(jié)果顯示,miR-92a、sICAM-1、VEGF與PSV、EDV呈正相關(guān)(P<0.05),與PI、RI呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),見表5。

表5 miR-92a、sICAM-1、VEGF與乳腺癌患者超聲血流參數(shù)的相關(guān)性分析

3 討論

乳腺癌已成為全世界范圍內(nèi)最常見的女性惡性腫瘤之一。根據(jù)全球癌癥數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示,2020年全球約有1000萬人死于惡性腫瘤,其中乳腺癌占11.7%[7]。乳腺癌早期的臨床表現(xiàn)為乳頭溢液、乳房包塊、腋窩淋巴結(jié)腫大等等,晚期可發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移,出現(xiàn)多器官病變,嚴(yán)重威脅患者生命安全。血清腫瘤標(biāo)志物在惡性腫瘤的早期診斷中起著重要作用,但乳腺癌的診斷缺乏高靈敏度和特異度的標(biāo)志物[8]。因此,尋求有效的血清學(xué)標(biāo)志物對(duì)乳腺癌的早期診斷及病情評(píng)估具有重要作用。

miR-92a是目前研究最多的微小核糖核酸之一,主要參與調(diào)控心、肺、免疫系統(tǒng)等器官的發(fā)育以及新生血管的形成過程,可促使惡性腫瘤細(xì)胞增殖,提高腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移能力,在腫瘤進(jìn)展過程中發(fā)揮致癌作用[9]。s ICAM-1是粘附分子中的免疫球蛋白超家族成員之一,具有介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)相互粘著、相互識(shí)別、傳遞信號(hào)的作用,正常情況下不表達(dá)或低表達(dá)[10]。sICAM-1作為介導(dǎo)細(xì)胞間黏附的一種黏附分子,其與配體結(jié)合可介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞與不同細(xì)胞、基質(zhì)之間的黏附,促進(jìn)腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移[11]。VEGF是一種寡二聚體糖蛋白,由腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞分產(chǎn)生,是參與血管生成的正向調(diào)節(jié)因子,能夠促進(jìn)腫瘤新生血管生成,為腫瘤細(xì)胞增殖提供氣體交換與營養(yǎng),其水平隨腫瘤的進(jìn)展程度而逐漸升高[12]。本研究為乳腺癌的診斷篩選了miR-92a、sICAM-1、VEGF這3個(gè)指標(biāo),結(jié)果顯示,其水平在乳腺癌患者中均明顯升高,這與上述研究結(jié)論一致。利用ROC曲線分析了這3個(gè)指標(biāo)的診斷效能,結(jié)果顯示,聯(lián)合檢測的靈敏度和特異度可達(dá)到89.3%、90.0%,相比較單一檢測而言,可進(jìn)一步提高診斷效能。進(jìn)一步利用多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示miR-92a、sICAM-1、VEGF是乳腺癌發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素,這在邱曉陽[13]、徐小艷[14]的報(bào)道中也有體現(xiàn)。

超聲是臨床常用輔助檢查手段,因具有操作簡單、無創(chuàng)傷性等優(yōu)點(diǎn)而廣泛應(yīng)用。乳腺惡性腫瘤可促使機(jī)體產(chǎn)生血管生成因子,加速血管生長,造成腫瘤內(nèi)部血流增多,且流速加快、分布紊亂,再加上腫瘤缺乏肌層、血管壁薄、彈性不佳,導(dǎo)致血流信號(hào)異常[15]。惡性腫瘤常呈現(xiàn)高流速、低阻力的情況。臨床上常常采用PI、RI作為惡性腫瘤的參考指標(biāo),PSV、EDV則是輔助參考標(biāo)準(zhǔn)[16]。本研究顯示,乳腺癌患者的PSV、EDV明顯升高,PI、RI明顯降低,正好與上述研究相符。利用Spearman相關(guān)性分析可知 miR-92a、sICAM-1、VEGF與超聲血流參數(shù)密切相關(guān),提示 miR-92a、sICAM-1、VEGF在一定程度上可以反映乳腺癌的血流情況,用于評(píng)估病情。

綜上所述,miR-92a、sICAM-1、VEGF在乳腺癌患者中明顯升高,且與患者超聲血流參數(shù)密切相關(guān),是乳腺癌發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素,三項(xiàng)聯(lián)合檢測有助于乳腺癌的早期診斷及病情評(píng)估。但本次研究屬回顧性研究,未進(jìn)行前瞻性設(shè)計(jì),可能存在一定的選擇偏倚,待日后進(jìn)行改進(jìn)來進(jìn)一步驗(yàn)證此次研究的正確性。