胡選亞 葉詠雪 楊叢家 徐錄梅

作者單位：473000 河南省南陽市第一人民醫(yī)院

結(jié)腸癌是一種發(fā)生于結(jié)腸黏膜上皮的惡性腫瘤,早期常無癥狀,病情不斷進展可誘發(fā)腹痛、便血、體重下降等,若不及時治療,會增加死亡風險[1-2]。手術(shù)為治療結(jié)腸癌主要方法,通過切除腫瘤組織,能夠阻止腫瘤繼續(xù)增殖及擴散,以延長患者生存時間[3-4]。但長期隨訪發(fā)現(xiàn),仍有較多結(jié)腸癌患者預后欠佳,故還需尋找更為客觀的生物學指標,為結(jié)腸癌早期診斷、預測轉(zhuǎn)移及復發(fā)提供參考。趨化因子是一類由細胞分泌的信號蛋白或小細胞因子,在敗血癥、慢性炎癥及傷口愈合中起到重要作用,在惡性腫瘤中也存在一定異常表達。而CXC趨化因子受體2(CXCR2)為趨化因子CXC亞家族受體,臨床認為其與特異性配體結(jié)合后,可激活細胞內(nèi)多種信號傳導,以介導細胞參與疾病的生理、病理多個過程。相關(guān)研究顯示[5-6],CXCR2在乳腺癌、食管癌等多種惡性腫瘤中均存在較高表達,與腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移等關(guān)系密切。但關(guān)于CXCR2在結(jié)腸癌中的臨床表達及臨床意義仍需進一步明確。鑒于此,本研究分析結(jié)腸癌組織中CXCR2趨化因子受體的臨床表達意義。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年5月至2019年5月我院收治的73例結(jié)腸癌患者作為研究對象,其中男性42例,女性31例;年齡48～72歲,平均年齡(58.74±5.18)歲;體質(zhì)量指數(shù)18～28 kg/m2,平均體質(zhì)量指數(shù)(23.19±1.93)kg/m2;文化程度:26例高中及以上,47例初中及以下。納入標準;均經(jīng)手術(shù)病理確診為結(jié)腸癌;精神狀態(tài)正常;患者及家屬簽署知情同意書。排除標準:存有肝腎功能衰竭;合并凝血功能障礙;存在急慢性感染;伴有其他惡性腫瘤;存在免疫功能障礙;預計生存期不足3個月。

1.2 方法

所有患者均經(jīng)手術(shù)采集病理標本及癌旁標本,經(jīng)福爾馬林固定、石蠟包埋切塊,保持病理切片厚度4 μm,之后開展免疫組織化學檢測。具體操作為:先將標本置于烤箱內(nèi)烘烤40 min,保持溫度65 ℃,之后常規(guī)脫蠟、梯度酒精水化,并以3%過氧化氫孵育,滅活內(nèi)源性過氧化物酶;將切片置于93.8 ℃水浴缸內(nèi)進行抗原修復,水浴20 min,保溫15 min,水浴缸內(nèi)溶液為檸檬酸三鈉緩沖液;室溫下血清封閉1 h,PBS緩沖液沖洗3次,每次5 min,甩去PBS溶液后,滴加一抗,室溫下溫育30 min,再轉(zhuǎn)移至4 ℃冰箱內(nèi)過夜;再次使用PBS緩沖液沖洗3次,每次5 min;將PBS液甩去后,滴加二抗,室溫下溫育30 min,再以PBS緩沖液沖洗3次,每次5 min;甩去PSB液,滴加DAB溶液顯色3～6 min,顯微鏡下觀察顏色反應;自來水沖洗充分,蘇木精復染,鹽酸-酒精分化后PBS沖洗返藍;最后梯度酒精脫水處理,二甲苯透明,并以常規(guī)樹脂封片后觀察。結(jié)果判斷:陽性表達以染色強度及陽性細胞比例綜合判斷,其中染色強度:0分為無色,1分為淡黃色,2分為棕黃色,3分為棕褐色;陽性細胞比:0分為<5%,1分為5%～25%,2分為26%～50%,3分為51%～75%,4分為>75%;兩者乘積為0～3分為陰性,3分以上為陽性。所有均開展長達3年隨訪,隨訪內(nèi)容為腫瘤復發(fā)轉(zhuǎn)移情況,隨訪方式為電話隨訪及門診復查,并收集所有患者年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、腫瘤直徑等資料。

1.3 觀察指標

(1)比較腫瘤組織與癌旁組織內(nèi)CXCR2表達差異。(2)比較不同CXCR2表達患者年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、腫瘤直徑等的差異。(3)隨訪3年,比較不同CXCR2表達患者遠期腫瘤復發(fā)轉(zhuǎn)移情況。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 CXCR2表達情況

腫瘤組織TIM-3陽性表達率為75.34%(55/73),高于癌旁組織的10.96%(8/73),差異有統(tǒng)計學意義(χ2=61.678,P=0.000)。

2.2 CXCR2表達與臨床病理特征間關(guān)系

腫瘤分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化程度、腫瘤直徑≥3 cm患者TIM-3表達陽性率高于腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中高分化程度、腫瘤直徑<3 cm患者,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 CXCR2表達與臨床病理特征間關(guān)系(例,%)

2.3 CXCR2表達與預后間的關(guān)系

隨訪3年,73例患者復發(fā)轉(zhuǎn)移率為35.62%(26/73)。CXCR2陽性表達組復發(fā)轉(zhuǎn)移率為43.64%(24/55),高于CXCR2陰性表達組的11.11%(2/18),差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.257,P=0.012)。

3 討論

結(jié)腸癌病因復雜,臨床認為與遺傳、不良飲食、消化道疾病等相關(guān),多種因素長期相互作用,可促使結(jié)腸黏膜組織出現(xiàn)增生性變化,久之還會引起癌基因與抑癌基因表達失調(diào),導致結(jié)腸癌的發(fā)生[7-8]。臨床治療結(jié)腸癌多以手術(shù)為主,病灶切除后可避免腫瘤持續(xù)擴散及轉(zhuǎn)移,以改善患者預后[9-10]。但惡性腫瘤病情較為復雜,即使經(jīng)規(guī)范化治療后仍會出現(xiàn)復發(fā)轉(zhuǎn)移現(xiàn)象,降低遠期生存率,故如何改善結(jié)腸癌患者預后成為臨床研究熱點。

隨著分子生物學研究的不斷深入,臨床發(fā)現(xiàn)越來越多的分子標志物參與結(jié)腸癌的發(fā)生及發(fā)展,明確該類分子標志物在腫瘤生長、侵襲及轉(zhuǎn)移中的作用,則可為臨床早期診治及評估患者預后提供參考。趨化因子受體在多種生理及病理過程中均存在一定作用,臨床認為趨化因子及趨化因子受體與腫瘤細胞轉(zhuǎn)移、侵襲存在密切關(guān)系。而CXCR2為重要趨化因子受體,幾乎能夠與所有ELR+的CXC類趨化因子結(jié)合,近年也被檢出在多種惡性腫瘤組織中呈高達[11-12]。本研究結(jié)果顯示,腫瘤組織TIM-3陽性表達率高于癌旁組織,腫瘤分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化程度、腫瘤直徑≥3 cm患者TIM-3表達陽性率高于腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中高分化程度、腫瘤直徑<3 cm患者,CXCR2陽性表達組復發(fā)轉(zhuǎn)移率高于CXCR2陰性表達組。提示CXCR2在結(jié)腸癌中呈高表達,且腫瘤分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化程度、腫瘤直徑≥3 cm患者陽性表達率更高,CXCR2表達水平能夠一定程度上預測患者預后,為臨床治療提供指導。其原因為CXCR2能夠參與腫瘤發(fā)生及發(fā)展的多個過程,可與白介素-8、中性粒細胞活化蛋白-2、腫瘤生長相關(guān)因子-1等多種趨化因子相結(jié)合,以介導產(chǎn)生多種生物效應,在腫瘤進展的炎癥細胞化學誘導過程中發(fā)揮重要作用,可通過介導炎癥反應來加快腫瘤發(fā)生、發(fā)展[13-14]。同時,CXCR2與腫瘤血管生成存在密切關(guān)系,當CXCR2表達水平較高時,能夠結(jié)合相應配體激活多種信號通路,使得細胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2的磷酸化而促使EGR-1表達升高,經(jīng)該信號通路可促使腫瘤新生血管形成,為腫瘤生長、轉(zhuǎn)移提供充足養(yǎng)分[15]。因此,CXCR2表達高的患者普遍腫瘤分期高、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度低,而該類因素又可直接對患者預后造成影響,增加術(shù)后復發(fā)轉(zhuǎn)移風險,臨床可將CXCR2作為治療的新靶點以完善抗腫瘤方案,改善患者預后。

綜上所述,CXCR2在結(jié)腸癌中呈高表達,腫瘤分期高、分化程度低、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者陽性表達率更高,能夠較好地預測術(shù)后復發(fā)轉(zhuǎn)移情況,可作為早期診治、預后評估的重要參考指標。