劉文文 祖萌萌 薛會(huì)元 候曉麗

作者單位：450000 河南中醫(yī)藥大學(xué)第五臨床醫(yī)學(xué)院,鄭州人民醫(yī)院

食管癌為臨床常見的惡性腫瘤,好發(fā)于中老年男性群體,具有較高的發(fā)生率與死亡率[1-2]。食管癌的病因較為復(fù)雜,一般認(rèn)為與長期吸煙飲酒、不良飲食習(xí)慣等聯(lián)系緊密[3]。近年,該病的發(fā)生率呈逐年上升趨勢,給廣大居民的身心健康帶來眾多威脅[4]。食管癌在早期多無明顯癥狀,大部分患者經(jīng)臨床確診時(shí)病情已處于中晚期,嚴(yán)重影響預(yù)后。因此,探尋能夠于早期及時(shí)診斷出病情的分子生物標(biāo)志物,指導(dǎo)臨床行及時(shí)的治療,對于改善患者預(yù)后具有重要意義。E鈣粘素屬于細(xì)胞粘附性分子,具有維持上皮細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)與功能作用,而當(dāng)其表達(dá)異常時(shí)會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移[5]。原黏蛋白α3(PCDHA3)屬于PCDHA團(tuán)簇之一,在肺癌的發(fā)生、發(fā)展中扮演重要角色[6]。但臨床關(guān)于E鈣粘素、PCDHA3與食管癌關(guān)系的研究報(bào)道較為缺乏?；诖?本研究以90例食管癌患者為研究對象,分析E鈣粘素、PCDHA3在患者體內(nèi)的表達(dá)及意義。報(bào)告示下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2022年1月至2022年12月本院收治的90例食管癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)病理檢查證實(shí)為食管癌;②生命體征平穩(wěn);③依從性良好;④術(shù)前未接受放化療;⑤患者知情同意本研究。排除標(biāo)準(zhǔn):①存在其余惡性腫瘤者;②伴有自身免疫性疾病者;③有認(rèn)知障礙,難以正常交流者;④合并嚴(yán)重肝腎功能衰竭者。90例患者中,男性46例,女性44例;年齡34～73歲,平均年齡(58.69±3.07)歲;腫瘤分型:潰瘍型29例,髓質(zhì)型27例,蕈傘型34例;TNM分期:Ⅰ～Ⅱ期46例,Ⅲ期44例;分化程度:低分化42例,中分化25例,高分化23例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:有48例,無42例。

1.2 方法

收集全部食管癌患者術(shù)中切取的癌組織與癌旁正常組織(距腫瘤組織邊緣≥3 cm),運(yùn)用免疫組織化學(xué)法檢測組織標(biāo)本中的E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)。具體步驟如下:對癌組織與癌旁正常組織標(biāo)本首先運(yùn)用10%甲醇溶液進(jìn)行24 h的固定處理,石蠟包埋,制成4 μm切片;然后用檸檬酸鈉緩沖液修復(fù)抗原,滴入3%過氧化氫溶液,于室溫下持續(xù)孵育15 min,完畢后用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)反復(fù)沖洗3次;運(yùn)用10%山羊血清在室溫環(huán)境下封閉0.5 h,滴加一抗,在4 ℃環(huán)境下過夜,次日再次運(yùn)用PBS反復(fù)沖洗3次,滴加二抗后在室溫下持續(xù)孵育30 min;最后行染色、脫水、封片、鏡檢。陽性評估依據(jù):①染色強(qiáng)度:不著色為0分:淡黃色為1分;棕黃色為2分;棕褐色為3分。②陽性細(xì)胞數(shù)評分:陽性表達(dá)率在1%～10%間為1分;>10%～50%間為2分;>50%為3分。兩者乘積在3分以上為陽性,相反則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)E鈣粘素、PCDHA3陽性表達(dá)情況。(2)E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)與患者臨床病理特征間的關(guān)系:收集患者的年齡、性別等資料,統(tǒng)計(jì)E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)與患者各項(xiàng)臨床病理特征之間的聯(lián)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 E鈣粘素、PCDHA3陽性表達(dá)情況

癌組織中E鈣粘素、PCDHA3陽性表達(dá)率低于癌旁組織,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表1。

表1 E鈣粘素、PCDHA3陽性表達(dá)對比(例,%)

2.2 E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)與患者臨床病理特征間的關(guān)系

E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)與患者的TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)與患者臨床病理特征間的關(guān)系(例,%)

3 討論

食管癌為臨床多發(fā)的消化道惡性腫瘤之一,主要發(fā)生在食管上皮,以鱗狀細(xì)胞癌較為常見,在臨床具有較高的發(fā)生率與死亡率[7-8]。鱗狀細(xì)胞癌起病較為隱匿,發(fā)病初期通常無典型癥狀,多數(shù)患者確診時(shí)已為中晚期,嚴(yán)重威脅患者的生命安全[9]。食管癌是由多因素相互作用而導(dǎo)致的疾病,臨床尚未完全明晰其發(fā)病機(jī)制,且食管癌的病死率處于較高水平,患者經(jīng)過有效的治療之后其5年生存率僅僅為20%左右[10-11]。因此,尋找與食管癌發(fā)生、發(fā)展有關(guān)的分子生物標(biāo)志物,指導(dǎo)臨床予以針對性的治療,對于改善患者預(yù)后具有重要意義。

E鈣粘素為鈣粘蛋白家族成員之一,能夠促使細(xì)胞與胞外基質(zhì)發(fā)生粘附作用,加速細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整[12-13]。腫瘤細(xì)胞會(huì)通過穿透正常組織細(xì)胞基膜和胞外基質(zhì)而侵襲四周的血管與淋巴,實(shí)現(xiàn)腫瘤的擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移。黏附分子在細(xì)胞間需要維持復(fù)雜的組織形態(tài),且屬于細(xì)胞之間相互作用的類型之一,與肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移等存在緊密聯(lián)系[14]。PCDHA家族能夠有效維持腫瘤上皮細(xì)胞的形態(tài),且會(huì)降低腫瘤細(xì)胞的變形能力與浸潤及轉(zhuǎn)移功能。PCDHA家族在惡性腫瘤內(nèi)會(huì)發(fā)生異常表達(dá)情況,其高表達(dá)會(huì)抑制癌癥基因的表達(dá),并參與腫瘤的調(diào)節(jié)過程[11]。PCDHA3為PCDHA家族成員之一,在惡性腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色,會(huì)參與腫瘤細(xì)胞的代謝、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡過程。但臨床關(guān)于兩者與食管癌患者間關(guān)系的報(bào)道較少,還需進(jìn)一步探究。本研究結(jié)果顯示,癌組織中的E鈣粘素、PCDHA3呈異常的低表達(dá)狀態(tài)。主要是由于腫瘤細(xì)胞會(huì)通過破壞正常組織細(xì)胞基膜,使得其結(jié)構(gòu)被破壞,以此完成增殖分化、擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移,而隨著細(xì)胞組織被破壞,將導(dǎo)致E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)降低。本研究結(jié)果還顯示,E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)與患者的TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。提示,E鈣粘素、PCDHA3表達(dá)與食管癌的發(fā)生發(fā)展具有緊密聯(lián)系,其參與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移過程,可作為輔助診斷食管癌的重要指標(biāo)。

綜上所述,E鈣粘素、PCDHA3在食管癌患者癌組織內(nèi)呈異常低表達(dá)狀態(tài),兩者與患者的TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間存在緊密聯(lián)系,參與疾病的發(fā)生、發(fā)展,臨床需予以高度重視。