◎ 劉李婷，陳姍姍，常 薇，李 超，吳 坤

（陜西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院農(nóng)副食品所，陜西 西安 710048）

山梨酸結(jié)構(gòu)式為2,4-己二烯酸，具有共軛雙鍵體系，能夠與許多親核試劑反應(yīng)[1]。山梨酸是目前國(guó)際上使用較為廣泛的防腐劑[2]，可以抑制微生物的生長(zhǎng)，從而延緩食品腐敗[3-4]。能力驗(yàn)證是一種通過(guò)實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)，按照相關(guān)準(zhǔn)則評(píng)估參與者能力的活動(dòng)[5-6]。而組織能力驗(yàn)證需制作盲樣，本文制作4 個(gè)濃度水平樣品，并通過(guò)均勻性及穩(wěn)定性試驗(yàn)得出數(shù)據(jù)，為各機(jī)構(gòu)組織能力驗(yàn)證設(shè)計(jì)盲樣提供指導(dǎo)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

樣品：橙汁飲料（市售康師傅橙汁）；試劑：超純水；乙酸銨（分析純）。儀器：高效液相色譜儀（島津SPD-20A）；超聲清洗振蕩機(jī)（昆山市超聲儀器KQ-500E）。

1.2 儀器條件

色譜柱：C18ODS-3（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：0.02 mol·L-1乙酸銨∶甲醇=95∶5；流速：1.0 mL；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品前處理

在50 mL 離心管中稱取約2 g 樣品，加水約25 mL渦旋混勻，50 ℃水浴超聲20 min，再次加水并定容后渦旋混勻超聲振蕩5 min，取適量上清液過(guò)0.22 μm 水系濾膜，濾液待上機(jī)檢測(cè)[7]。

1.3.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案

分別稱取適量山梨酸加入橙汁飲料中，使?jié)舛确謩e為A（0.022 g·kg-1）、B（0.045 g·kg-1）、C（0.046 g·kg-1）、D（0.075 g·kg-1），依照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)指南》（CNAS—GL003：2018）[8]中的規(guī)定來(lái)設(shè)計(jì)樣品的均勻性及穩(wěn)定性試驗(yàn)，并通過(guò)多組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 均勻性試驗(yàn)

依照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)指南》（CNAS-GL003：2018）[8]中的規(guī)定，根據(jù)單因子方差分析法進(jìn)行樣品均勻性試驗(yàn)。均勻性檢驗(yàn)是指從A、B、C、D 4 個(gè)不同濃度水平樣品中隨機(jī)抽取10 份，其中每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定2 次，在短時(shí)間內(nèi)由同一試驗(yàn)人員根據(jù)上述的測(cè)試方法，在相同試驗(yàn)條件下對(duì)樣品進(jìn)行項(xiàng)目的檢測(cè)[9]。樣品均勻性試驗(yàn)采用單因子方差統(tǒng)計(jì)分析進(jìn)行評(píng)定，當(dāng)樣品中檢測(cè)含量的F值小于F臨界值[F0.05(9，10)=3.02]時(shí)，表明樣品制備均勻，可用于實(shí)驗(yàn)室使用。樣品均勻性結(jié)果見表1 和表2。由表2可知，A、B、C、D 4 個(gè)不同濃度水平樣品的F值小于臨界值，表明在0.05 顯著性水平時(shí)，樣品間和樣品內(nèi)均無(wú)顯著性差異，樣品均勻。

表1 樣品中山梨酸測(cè)定結(jié)果表

表2 方差分析結(jié)果表

2.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)

選取在試驗(yàn)期間的不同時(shí)間間隔內(nèi)抽取10 個(gè)樣品，其中每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定2 次，試驗(yàn)條件（試驗(yàn)方法、試驗(yàn)人員、儀器、實(shí)驗(yàn)室條件）均與均勻性檢驗(yàn)相同。此次穩(wěn)定性試驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間為18 d。測(cè)定時(shí)間間隔根據(jù)先密后疏的原則進(jìn)行設(shè)計(jì)，共設(shè)計(jì)為3 個(gè)時(shí)間間隔。樣品分別于制樣后第1 天（4 月27 日）、第9 天（5 月5 日）、第18 天（5 月14 日）進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)上述均勻性試驗(yàn)所測(cè)結(jié)果作為參比數(shù)據(jù)，用t檢驗(yàn)法進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)。若結(jié)果t值小于tα(n1+n2-2)時(shí)則表明兩個(gè)平均值間無(wú)顯著性差異，即表示所制備樣品穩(wěn)定。穩(wěn)定性試驗(yàn)的結(jié)果如表3 所示。由表3 可知，t值均＜t臨界值（t0.05(18)=2.101），表明在0.05 顯著性水平時(shí)無(wú)顯著性差異，樣品穩(wěn)定。

表3 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表

3 結(jié)論

本文介紹的橙汁飲料中的山梨酸制備方式所制得的4 個(gè)濃度水平樣品均勻性良好，在18 d 內(nèi)樣品性質(zhì)穩(wěn)定，可用于能力驗(yàn)證使用，并可指導(dǎo)各機(jī)構(gòu)進(jìn)行盲樣制作，從而為各機(jī)構(gòu)在組織能力驗(yàn)證中的盲樣制作考核提供指導(dǎo)，具有一定的參考價(jià)值。