周青 林寧 劉帥妹 張瑞金 李孟蘭 封婕 黃麗麗 吳玉璘

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒感染所導(dǎo)致,通過性接觸、母嬰和血液等方式進行傳播,其傳染性強,流行性廣,是引起慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌的主要誘因,臨床癥狀主要表現(xiàn)為腹脹和乏力等[1-3]。乙型肝炎不僅可提高妊娠糖尿病、胎膜早破、產(chǎn)前出血和剖宮產(chǎn)等風(fēng)險,還會造成母嬰傳播[4-6],威脅新生兒的健康;雖然乙型肝炎免疫球蛋白和乙肝疫苗的的聯(lián)合應(yīng)用可以有效阻斷母嬰傳播,但仍然存在5%～10%阻斷失敗的風(fēng)險[7-10]。有研究報道妊娠期乙肝表面抗原攜帶者會增加膽汁淤積癥和子癇前期的發(fā)生風(fēng)險,同時影響子代遠期生長,對孕婦和胎兒造成很大的危害[11-12]。因此,孕前乙肝五項血清學(xué)檢測極其重要。乙型肝炎血清學(xué)檢測是國家免費孕前優(yōu)生項目醫(yī)學(xué)檢驗的重要內(nèi)容之一,廣泛開展孕前夫婦乙型肝炎的檢測,有利于降低母嬰傳播的風(fēng)險和優(yōu)生優(yōu)育的開展。為保證項目的規(guī)范實施,提高基層實驗室檢測能力和服務(wù)質(zhì)量,從2012年起本中心根據(jù)《臨床實驗室室間質(zhì)評評價要求》[13-14]每年對江蘇省參與免費孕前優(yōu)生健康檢查的臨床檢驗實驗室,開展兩次乙肝五項血清學(xué)試驗室間質(zhì)評活動,現(xiàn)將2012—2021年乙肝五項血清學(xué)試驗相關(guān)室間質(zhì)評結(jié)果進行匯總報告。

對象與方法

一、參評單位與檢測方法

參加室間質(zhì)評活動單位是承擔(dān)江蘇地區(qū)國家免費孕前優(yōu)生檢查項目的臨床檢驗實驗室,檢測項目包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗體(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗體(HBeAb)和乙肝核心抗體(HBcAb)。檢測方法包括ELISA、化學(xué)發(fā)光法、膠體金、時間分辨免疫熒光法、乳膠法、化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測法、磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法。

二、質(zhì)評方法

1.質(zhì)控品發(fā)放:本中心統(tǒng)一采購質(zhì)控品,并通過順豐快遞郵寄到各個參評單位臨床檢驗實驗室,每個檢測項目包含5份標(biāo)本。

2.質(zhì)控品檢測:各參評單位收到質(zhì)控品之后,在規(guī)定的時間內(nèi)采用平時檢測常規(guī)標(biāo)本的試劑和方法對質(zhì)控品進行檢測,并將檢測結(jié)果通過網(wǎng)絡(luò)回報至本中心。

3.質(zhì)控品預(yù)期結(jié)果確定:定性結(jié)果按照廠家提供室間質(zhì)評質(zhì)控品說明書來確定檢測結(jié)果的預(yù)期值。

三、評分標(biāo)準(zhǔn)

按照國家衛(wèi)生健康委臨檢中心室間質(zhì)量評價的統(tǒng)一要求,使用PT得分評價的方法,PT得分是參照美國CLIA′88能力比對檢驗分析質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),代表HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 5個項目檢測結(jié)果與預(yù)期值一致所得的分?jǐn)?shù)。每份質(zhì)控品的檢測結(jié)果與預(yù)期值一致,得20分,否則得0分,每個檢測項目共有5份標(biāo)本,滿分應(yīng)為100分,且總分≥80分為合格,總分<80分為不合格。

滿分率為PT得分100分的實驗室數(shù)占參與本次室間質(zhì)評總的實驗室數(shù)的百分比、合格率為PT得分≥80 分的實驗室數(shù)占參與本次室間質(zhì)評總的實驗室數(shù)的百分比、不合格率為PT得分<80分的實驗室數(shù)占參與本次室間質(zhì)評總的實驗室數(shù)的百分比。

漏檢率為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 項目的5份標(biāo)本中檢測結(jié)果為陰性與預(yù)期值陽性不一致標(biāo)本例數(shù)占檢測結(jié)果應(yīng)為陽性標(biāo)本總例數(shù)的百分比?？傟栃月z率為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 項目的5份標(biāo)本中檢測結(jié)果為陰性與預(yù)期值陽性或弱陽性不一致標(biāo)本例數(shù)占檢測結(jié)果應(yīng)為陽性或弱陽性標(biāo)本總例數(shù)的百分比;陽性漏檢率為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 項目的5份標(biāo)本中檢測結(jié)果為陰性與預(yù)期值陽性不一致標(biāo)本例數(shù)占檢測結(jié)果應(yīng)為陽性標(biāo)本總例數(shù)的百分比;弱陽性漏檢率為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 項目的5份標(biāo)本中檢測結(jié)果為陰性與預(yù)期值弱陽性不一致標(biāo)本例數(shù)占檢測結(jié)果應(yīng)為弱陽性標(biāo)本總例數(shù)的百分比。

四、統(tǒng)計方法

采用Excel表進行數(shù)據(jù)錄入,SPSS 19.0軟件分析處理數(shù)據(jù),計數(shù)資料以百分率(%)表示,組間比較采用χ2檢驗,P<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、2012年—2021年室間質(zhì)評考核成績

2012年—2021年一共組織開展19次室間質(zhì)評活動,其中2012年僅有一次,其余均為每年2次。HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 5個項目室間質(zhì)評的合格率(≥80分)分別從最低94.2%(81/86)、94.2%(81/86)、94.2%(81/86)、90.9%(70/77)和67.4%(64/95)至100%之間浮動;滿分率分別從最低72.6%(69/95)、73.7%(70/95)、94.2%(81/86)、82.1%(78/95)和13.7%(13/95)至100%之間浮動,詳見表1。將2012—2016年與2017—2021年兩個時間段乙肝五項血清學(xué)檢測結(jié)果滿分率和合格率進行比較,結(jié)果顯示:與2012—2016年相比較,2017—2021年乙肝五項血清學(xué)滿分率和合格率均明顯提高,且HBsAg、HBsAb和HBcAb在兩個時間段滿分率和合格率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),HBeAg合格率、HBeAb滿分率在兩個時間段差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),詳見表2。

表1 2012年—2021年江蘇省免費孕前優(yōu)生健康檢查乙肝五項血清學(xué)試驗室間質(zhì)評結(jié)果Table1 Pre-pregnancy health examination of hepatitis B serology laboratory quality evaluation results in Jiangsu Province,2012-2021

表2 2012—2016年和2017—2021年乙肝五項血清學(xué)考核成績滿分率和合格率比較(%)Table 2 Comparison of full mark rate and qualified rate of five hepatitis B serological assessment scores from 2012 to 2016 and from 2017 to 2021(%)

二、乙肝陽性漏檢率

2012年第一次—2021年第二次,HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb總陽性漏檢率分別從9.8%(28/285),13.2%(25/190),5.8%(5/86),16.8%(16/95) 和 47.4%(135/285)降至為0%;陽性漏檢率分別從2.9%(5/172)、5.8%(5/86)、5.8%(5/86)、8.2%(19/231)、47.4%(135/285)降至0%;弱陽漏檢率最高達27.4%(26/95)、26.3%(25/95)、1.2%(1/82)、16.8%(16/95)和28.4%(23/81),詳情見表3。

表3 2012年—2021年江蘇省免費孕前優(yōu)生檢查乙肝五項血清學(xué)試驗室間質(zhì)評結(jié)果陽性漏檢率Table 3 Positive missed rate of the external quality assessment of five serological tests of hepatitis B in Jiangsu Province,2012-2021

討 論

室間質(zhì)評通過向各臨床檢驗實驗室發(fā)放質(zhì)控品,確定實驗室之間檢測方法的可比性,是評價實驗室檢測結(jié)果準(zhǔn)確性和實驗室檢測質(zhì)量的重要手段以及促進臨床檢驗實驗室檢測質(zhì)量持續(xù)改進的重要工具?；鶎訉嶒炇覅⒓邮议g質(zhì)評項目,可獲得能力驗證,及時發(fā)現(xiàn)實驗室存在的問題,并針對性制定改正措施,從而提高檢測能力[15-18]?；鶎訉嶒炇覚z測能力的提高和規(guī)范化建設(shè),可降低漏報誤報率,提高實驗室的檢測水平[19]。本中心從2012年起,每年組織開展2次乙肝五項血清學(xué)試驗室間質(zhì)評活動,一方面了解各基層臨床檢驗實驗室乙肝五項血清學(xué)檢測水平;其次可以幫助成績不理想的基層實驗室進行分析總結(jié)找出原因并督促改進,完成基層實驗室的整改,提高乙肝五項血清學(xué)檢測水平。

綜合分析2012年—2021年乙肝五項血清學(xué)室間質(zhì)評結(jié)果發(fā)現(xiàn),江蘇地區(qū)各基層臨床檢驗實驗室乙肝五項血清學(xué)檢測能力逐步提升,其中HBsAg的滿分率從2012年72.6%提高到2016年第一次的100%,2016年第二次至2021年第二次滿分率一直保持在98%以上;HBsAb的滿分率從2012年73.7%提高到2014年第一次的100%,2014年第二次至2021年第二次滿分率一直保持在94%以上;HBeAg的滿分率從2012年至2021年第二次一直保持在94.2%以上;HBeAb的滿分率從2012年82.1%提高到2016年第二次的100%,2017年第一次至2021年第二次滿分率一直保持在95%以上,但在2020年第一次出現(xiàn)明顯下滑,僅為84.4%,總陽性漏檢率達8.2%,可能是因為部分實驗室的檢測試劑在長途運輸環(huán)境條件未得到保證或者因試劑開封之后未密封暴露時間過長或檢測員操作不當(dāng)[20];HBcAb的滿分率從2012年13.7%提高到2019年第二次的100%,2020年第一次至2021年第二次滿分率一直保持在96%以上。比較2012年至2016年和2017年至2021年兩個時間段,室間質(zhì)評考核成績的合格率和滿分率,顯示2017年至2021年合格率和滿分率明顯高于2012年至2016年時間段,可見基層醫(yī)療機構(gòu)乙肝五項血清學(xué)檢測能力顯著提高,得益于室間質(zhì)評工作的開展。當(dāng)實驗室檢測結(jié)果與預(yù)期值存在較大差異,基層工作人員認真分析原因,積極采取相應(yīng)措施并改進[21-23]。但仍有部分實驗室乙肝五項室間質(zhì)評成績未達到合格,可能是因為檢測人員操作不夠規(guī)范、儀器使用不符合操作規(guī)程和結(jié)果判讀不準(zhǔn)確等,因此該地區(qū)應(yīng)強化人員的培訓(xùn),并需專家組到現(xiàn)場進行規(guī)范指導(dǎo)[24]。2012年至2021年HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 弱陽漏檢率最高分別達27.4%、26.3%、1.2%、16.8%和28.4%,陽性漏檢率最高分別達2.9%、5.8%、5.8%、8.2%、47.4%,原因可能是操作人員技術(shù)差錯,需注重室內(nèi)質(zhì)控規(guī)范實施,提高檢測精密度,其次實驗室環(huán)境、不同試劑廠家、檢測方法及儀器檢測性能對結(jié)果也會產(chǎn)生影響。室內(nèi)質(zhì)控是保證檢驗質(zhì)量的關(guān)鍵之一,為室間質(zhì)評的基礎(chǔ),可檢測實驗室檢測精密度,反映結(jié)果準(zhǔn)確度的偏離情況,確保實驗室檢測結(jié)果的一致。各基層實驗需加強開展室內(nèi)質(zhì)控的規(guī)范程度,不斷提高檢測意識,確保孕前優(yōu)生健康檢查的服務(wù)質(zhì)量[25]。HBcAb項目從2012年—2021年第二次陽性漏檢率大多均高于其他項目的原因可能是其檢測方法為競爭性抑制反應(yīng),樣本抗體和酶標(biāo)抗體在同一反應(yīng)體系中,操作流程不規(guī)范,放置溫度較高或者時間較長均會影響結(jié)果的判定[26]。10年間HBcAb項目陽性漏檢率從47.4%降為0%,其原因可能是2012年多家實驗室采用膠體金方法,而后實驗室逐漸采用ELISA、化學(xué)發(fā)光等替代膠體金方法,膠體金試劑檢測靈敏度有限,顯色需要較高濃度的標(biāo)記物且實驗人員若操作不當(dāng)反應(yīng)時間過短會導(dǎo)致漏檢率升高[27]。

乙肝五項血清學(xué)檢測是國家免費孕前優(yōu)生健康檢查的重要環(huán)節(jié),其每項檢測的結(jié)果都有重要的意義,關(guān)乎孕前婦女乙肝病情診斷。各基層實驗室還需不斷堅持室內(nèi)質(zhì)控管理,不斷加強乙肝五項血清學(xué)實驗質(zhì)量控制的相關(guān)培訓(xùn),積極參加室間質(zhì)評活動,提高各基層實驗室的檢測能力和檢測質(zhì)量,更好地為育齡人群服務(wù)。