羅宏新 張艷瓊 鄧超 鄒麗云 三明市中心血站檢驗(yàn)科 （福建 三明 365000）

內(nèi)容提要： 目的：探討全自動(dòng)設(shè)備在血站血液檢測(cè)中的應(yīng)用情況。方法：納入2021年1月～2022年12月血站采集的100份血液樣本作為研究對(duì)象，隨機(jī)分組，觀察組使用全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)+全自動(dòng)加樣器檢測(cè)血站血液樣本，對(duì)照組用手工方式檢測(cè)，比較兩種檢測(cè)手段的應(yīng)用效果。結(jié)果：全自動(dòng)設(shè)備檢測(cè)精確度高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；全自動(dòng)設(shè)備非特異性反應(yīng)低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；全自動(dòng)設(shè)備檢測(cè)靈敏度高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：全自動(dòng)設(shè)備在血站血液檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值較高，能夠提高血液樣本檢測(cè)精確度和靈敏度，能夠降低非特異性反應(yīng)。

血站血液檢測(cè)方法與檢測(cè)工作效率也息息相關(guān)。常規(guī)的手工檢測(cè)方法雖然取得了一定的成果，但效率低，耗時(shí)耗力。研究發(fā)現(xiàn)，全自動(dòng)設(shè)備在血站血液檢測(cè)中的應(yīng)用，可提升工作人員工作效率，能夠減少人為失誤概率，檢測(cè)精確度有保證[1]?，F(xiàn)階段，全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀廣泛應(yīng)用在血站血液檢測(cè)中，從根本上提高了血液檢查效率。在全自動(dòng)設(shè)備應(yīng)用支持下，最大程度上提高了血液檢測(cè)質(zhì)量，并逐漸代替了傳統(tǒng)手工方法。如在血常規(guī)檢測(cè)中，全自動(dòng)細(xì)胞分析儀的使用，大大縮短了檢測(cè)時(shí)間，以直方圖的形式展示細(xì)胞體積的分布情況，為血液檢驗(yàn)工作的開(kāi)展提供了保障?；诖?，本文隨機(jī)抽取手工檢測(cè)陽(yáng)性樣本100份作為研究對(duì)象，研究了全自動(dòng)設(shè)備在血站血液檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。

1.資料與方法

1.1 一般資料

于本站2021年1月～2022年12月采集的血液樣本中，隨機(jī)抽取手工檢測(cè)陽(yáng)性樣本100份作為研究對(duì)象。血樣提供者男 45例，女55例，年齡21～84歲，平均（49.62±6.20）歲，所有患者均接受HbsAg、抗-TP、抗-HCV陽(yáng)性檢查，本血站血液樣本，均為無(wú)償獻(xiàn)血者提供，獻(xiàn)血者符合相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定，患者均知情同意。

試劑：采用ELISA法對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)試劑：抗-TP：英科新創(chuàng)、抗-HCV：北京萬(wàn)泰、HBsAg：英科新創(chuàng)：均通過(guò)國(guó)家藥品生物制品檢定所批檢，質(zhì)量合格，質(zhì)控品生產(chǎn)廠家為北京康徹思坦：HBsAg 0.2IU/mL，抗-TP6mIU/mL，抗-HCV0.05NCU/mL。

儀器設(shè)備：全自動(dòng)儀器：BEPIII全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)、RSP-150全自動(dòng)樣本加樣系統(tǒng)，手工使用的輔助設(shè)備：寶予德加樣器、安圖洗板機(jī)iVO、安圖酶標(biāo)儀PHOMO。

1.2 方法

將血液樣本按照本科室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程分別使用手工方法和全自動(dòng)儀器檢測(cè)，陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行原試劑雙孔復(fù)試，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，將已知濃度的質(zhì)控品進(jìn)行倍比稀釋，每種濃度檢測(cè)40次，對(duì)兩種方法的靈敏度檢測(cè)進(jìn)行比較，評(píng)價(jià)全自動(dòng)設(shè)備的檢測(cè)效能。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 21.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以n、%表示。計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，以±s表示。P＜0.05視為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 檢測(cè)結(jié)果

陽(yáng)性結(jié)果取其平均值和標(biāo)準(zhǔn)差作比較，全自動(dòng)設(shè)備檢測(cè)精確度更高，與手工檢測(cè)方法相比，有顯著的優(yōu)勢(shì)（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1.檢測(cè)結(jié)果(n=100)

2.2 重復(fù)性試驗(yàn)

陽(yáng)性結(jié)果，按血站標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行雙孔復(fù)試，剔除其他原因引起的非特異性反應(yīng)的結(jié)果，全自動(dòng)設(shè)備與手工檢測(cè)血樣樣本HBsAg、抗-TP存在一定的差異性（P＜0.05）；根據(jù)計(jì)算，全自動(dòng)設(shè)備與手工檢測(cè)非特異性反應(yīng)存在明顯的差別，具體見(jiàn)表2。

表2.全自動(dòng)設(shè)備重復(fù)性試驗(yàn)分析

2.3 檢測(cè)靈敏度

將質(zhì)控品進(jìn)行倍比稀釋，每種濃度檢測(cè)40次，取其平均值；全自動(dòng)檢測(cè)設(shè)備檢測(cè)靈敏度比手工檢測(cè)靈敏度高，兩種檢測(cè)手段靈敏度相比，有明顯的差異性（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3.全自動(dòng)設(shè)備在血站血液檢測(cè)中的靈敏度分析(S/CO)

3.討論

全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)的誕生和應(yīng)用，是酶免試驗(yàn)實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化的意義，解放工作人員雙手同時(shí)，規(guī)避了人為因素所致的誤差問(wèn)題。研究證實(shí)，全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)能夠提高酶免試驗(yàn)的特異性[2]。研究結(jié)果顯示，“費(fèi)米系統(tǒng)”能夠提高乙肝、丙肝表抗特異性，且“費(fèi)米系統(tǒng)”明暗度更高[3]。由此可知，整個(gè)酶免試驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間很長(zhǎng)，步驟很多，通過(guò)依托高性能的全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)，能夠提高工作效率，盡快出具檢驗(yàn)結(jié)果。在全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)處理模式下，衍生了全自動(dòng)酶免分析連體機(jī)，進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)樣本加樣、稀釋、孵育、加試劑、讀數(shù)等環(huán)節(jié)的全自動(dòng)，為臨床酶免試驗(yàn)項(xiàng)目、高樣本量應(yīng)用提供了保障。全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)組成結(jié)構(gòu)較多，包括進(jìn)樣針、清洗系統(tǒng)、驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)、控制系統(tǒng)等，各個(gè)系統(tǒng)之間協(xié)同作用，其工作原理明確[4]。全自動(dòng)樣本加樣系統(tǒng)本身具有智能化、自動(dòng)化特征，設(shè)定好相應(yīng)的參數(shù)信息，便可自動(dòng)放入檢測(cè)樣本，全過(guò)程于自動(dòng)化狀態(tài)下進(jìn)行；與傳統(tǒng)的手工方式相比，進(jìn)樣效率更高。因此，將全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)與全自動(dòng)樣本加樣系統(tǒng)聯(lián)合應(yīng)用在血站血液檢測(cè)中能夠很大程度提高檢測(cè)工作質(zhì)量和效率。

本試驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，全自動(dòng)設(shè)備檢測(cè)HBsAg 平均值、CV，分別為（3.412±0.982）、28.78%；手工檢測(cè)均值（3.387±1.285）、CV為37.94%；全自動(dòng)設(shè)備抗-TP檢測(cè)均值（5.235±0.804）、CV為15.36%；手工檢測(cè)均值、CV，分別為（5.394±1.264）、23.43%。全自動(dòng)設(shè)備檢測(cè)抗-HCV均值為（4.654±0.515）、CV為11.07%；手工檢測(cè)均值、CV，分別為（4.564±1.018）、22.30%。上述數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，兩種不同檢測(cè)手段檢測(cè)精確度有明顯的差異性（P＜0.05）；提示表明全自動(dòng)設(shè)備檢測(cè)精確度更高，能夠很大程度上提升血液樣本檢測(cè)質(zhì)量。

全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)廣泛應(yīng)用在臨床實(shí)驗(yàn)室中，技術(shù)穩(wěn)定性好，方便快捷，成本較低，且在醫(yī)療技術(shù)發(fā)展進(jìn)步下，逐漸滲透到定量領(lǐng)域中[5]。在免疫技術(shù)發(fā)展推動(dòng)下，單克隆體應(yīng)用范圍更加廣泛，微孔板、CAP 、標(biāo)記酶、酶底物等也相繼發(fā)展，均可應(yīng)用全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)[6]。大量臨床實(shí)踐表明，全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)在腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用作用十分顯著，可提高檢測(cè)靈敏度，對(duì)疾病診斷及預(yù)后評(píng)估有重要的意義[7]。免疫技術(shù)發(fā)展早期階段，主要是依靠手工操作開(kāi)展定性實(shí)驗(yàn)，最終得出陰陽(yáng)性結(jié)果，準(zhǔn)確率也很高。手工的ELISA實(shí)驗(yàn)步驟較多，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題，均可能影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。影響ELISA免疫試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素角度，如試劑盒，其使用狀態(tài)會(huì)影響檢測(cè)水平。為此，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求規(guī)范操作的情況下，穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)條件是獲取最佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵，最終可保證檢測(cè)靈敏度。全自動(dòng)設(shè)備實(shí)現(xiàn)了程序化的操作，解決了手工實(shí)驗(yàn)操作面臨的諸多影響因素，有效控制了人為因素引起的誤差，檢測(cè)結(jié)果精確度和敏感度更高，有利于檢出弱陽(yáng)性的樣本?；诖耍瑸樘岣逧LISA定性檢測(cè)的敏感性和特異性，必須依托全自動(dòng)設(shè)備實(shí)現(xiàn)。經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)能夠完全代替手工操作，可以高效完成ELISA試驗(yàn)，提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性同時(shí)，保證檢測(cè)數(shù)據(jù)更真實(shí)、更可靠[8]。同時(shí)，全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)方便保養(yǎng)和維護(hù)，為臨床血站血液檢測(cè)提供了便利，當(dāng)前，全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)已在國(guó)內(nèi)外檢驗(yàn)科、血站等檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)得到廣泛應(yīng)用。血站血液檢測(cè)中應(yīng)用全自動(dòng)設(shè)備，可保證檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性，能夠降低差錯(cuò)，實(shí)現(xiàn)對(duì)手工檢測(cè)的突破，有效規(guī)避了人為操作引發(fā)的失誤問(wèn)題，檢測(cè)流程更完善，方便人員操作，可以在最大程度上提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。

全自動(dòng)加樣器在血站血液檢測(cè)中，可簡(jiǎn)化繁瑣的實(shí)驗(yàn)流程，其裝置設(shè)計(jì)有8孔，每列可分裝不同體積的液體，節(jié)省了人工，減少了工作量，增加了處理量，工作效率更高[9]。同時(shí)，全自動(dòng)加樣器可分液范圍廣，分液速度快，適用于各種96孔板，如酶標(biāo)板、PCR板、深孔板等，分液體積也可自由選擇。陽(yáng)性結(jié)果，按血站標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行雙孔復(fù)試，剔除其他原因引起的非特異性反應(yīng)的結(jié)果，全自動(dòng)設(shè)備與手工檢測(cè)血樣樣本HBsAg、抗-TP存在一定的差異性（P＜0.05）；根據(jù)計(jì)算，全自動(dòng)設(shè)備與手工檢測(cè)非特異性反應(yīng)存在明顯的差別。通過(guò)重復(fù)性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，全自動(dòng)設(shè)備HBsAg檢測(cè)首次反應(yīng)陽(yáng)性數(shù)為50、重復(fù)反應(yīng)陽(yáng)性數(shù)為40、重復(fù)反應(yīng)陽(yáng)性率為80.00%；手工檢測(cè)首次反應(yīng)陽(yáng)性數(shù)、重復(fù)反應(yīng)陽(yáng)性數(shù)、重復(fù)反應(yīng)陽(yáng)性率，分別為60、40、66.67%。全自動(dòng)設(shè)備抗-TP檢測(cè)首次反應(yīng)陽(yáng)性數(shù)為40、重復(fù)反應(yīng)陽(yáng)性數(shù)為30、重復(fù)反應(yīng)陽(yáng)性率為75.00%；手工檢測(cè)首次反應(yīng)陽(yáng)性數(shù)、重復(fù)反應(yīng)陽(yáng)性數(shù)、重復(fù)反應(yīng)陽(yáng)性率，分別為50、30、60.00%；根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果可得出，全自動(dòng)設(shè)備能夠降低實(shí)驗(yàn)非特異性顯色，與傳統(tǒng)的手工檢測(cè)方式相比，有明顯的優(yōu)越性。

全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)功能特點(diǎn)顯著，適用于中小型實(shí)驗(yàn)室以及血站使用，為自動(dòng)化免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了科學(xué)的解決方案[10]。在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)在溫育、數(shù)據(jù)處理、加樣、數(shù)據(jù)保存等方面均實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。同時(shí)支持程序設(shè)置，將試劑瓶直接放入相應(yīng)的試劑架后，可開(kāi)始運(yùn)行。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)采取的是一次性注射器，大大降低交叉污染；分析系統(tǒng)具有液面探測(cè)功能以及缺液報(bào)警功能。全自動(dòng)樣本加樣系統(tǒng)通過(guò)液面感應(yīng)器自動(dòng)調(diào)整加樣針的高度，促使吸液量更精準(zhǔn)，有效規(guī)避血凝塊的吸入。通過(guò)優(yōu)化試劑架設(shè)計(jì)，避免了試劑浪費(fèi)情況，降低了試劑污染可能性。

全自動(dòng)檢測(cè)設(shè)備可檢測(cè)項(xiàng)目多，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)過(guò)程全自動(dòng)化目標(biāo)，應(yīng)用在血站血液檢測(cè)中，提高全自動(dòng)檢測(cè)設(shè)備性能同時(shí)，提高了血站血液檢測(cè)工作效率，檢測(cè)結(jié)果更精準(zhǔn)。傳統(tǒng)的手工檢測(cè)方法存在一定的局限性，在血站血液檢測(cè)中，實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)結(jié)果精確度的把控，實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)過(guò)程質(zhì)量的把控，切實(shí)發(fā)揮了全自動(dòng)設(shè)備檢測(cè)優(yōu)勢(shì)，在血站血液檢測(cè)中，展現(xiàn)了顯著的應(yīng)用價(jià)值。將全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)與全自動(dòng)加樣器聯(lián)合應(yīng)用，進(jìn)一步提高了檢測(cè)效能，靈敏度更高。將質(zhì)控品進(jìn)行倍比稀釋，每種濃度檢測(cè)40次，取其平均值；全自動(dòng)檢測(cè)設(shè)備檢測(cè)靈敏度比手工檢測(cè)靈敏度高，試驗(yàn)結(jié)果顯示，全自動(dòng)設(shè)備HBsAg檢測(cè)，質(zhì)控稀釋比例在1:1，1:2，1:4時(shí)，平均值分別是：3.514，1.864，0.705高于手工檢測(cè)的靈敏度。全自動(dòng)設(shè)備抗-TP檢測(cè)質(zhì)控稀釋在1:1，1:2，1:4時(shí)，平均值分別是：3.716，1.879，0.824也高于手工檢測(cè)的靈敏度。根據(jù)研究結(jié)果可見(jiàn)，任何比例下，全自動(dòng)設(shè)備檢測(cè)靈敏度都比手工檢測(cè)方式更高，兩種檢測(cè)手段檢測(cè)靈敏度對(duì)比，有明顯的差異性（P＜0.05）；再次說(shuō)明全自動(dòng)設(shè)備在血站血液檢測(cè)中的應(yīng)用作用，為血站血液樣本檢測(cè)工作的開(kāi)展提供了技術(shù)保障。本文研究成果，證實(shí)了全自動(dòng)設(shè)備在血站血液檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，ELISA法檢測(cè)過(guò)程中每個(gè)步驟都將影響著檢測(cè)結(jié)果，加樣過(guò)程中，手工加樣首先，加樣精密度不如儀器，其次，手工加樣過(guò)程中污染概率比儀器高，洗板過(guò)程中，手工檢測(cè)有拍板這一程序，結(jié)合在微板上的抗原抗體復(fù)合物會(huì)脫落一小部分，造成比色值比儀器檢測(cè)的低。因此，全自動(dòng)設(shè)備可提高血液樣本檢測(cè)精確度，檢測(cè)效能更高，有利于提高血站血液檢測(cè)工作效率。